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Tutte le procedure che coinvolgono partecipanti umani sono state eseguite in conformità con le linee guida istituzionali, nazionali e internazionali per il benessere umano e sono state esaminate dal comitato di revisione istituzionale locale.
1. Lavare le diapositive
- Preparare 10 μm di sezioni non colorate fissate in formalina e incluse in paraffina (FFPE).
- Posizionare i vetrini in un supporto per vetrini di vetro: utilizzare circa 3-5 vetrini a sezione trasversale più grandi a meno che il tessuto non sia minimo e siano necessari più vetrini.
- Riempire il supporto del vetrino con xilene e assicurarsi che tutto il tessuto sul vetrino sia sommerso. Lasciare riposare per 15 minuti.
- Dopo 15 minuti, versare lo xilene con i vetrini tenuti con la punta di una pipetta in modo che i vetrini non cadano.
- Versare altro xilene allo stesso livello di prima. Lasciare riposare per altri 15 minuti.
- Dopo 15 minuti, versare nuovamente lo xilene.
- Riempire il supporto del vetrino con etanolo al 100% (EtOH) e assicurarsi che tutto il tessuto sul vetrino sia completamente sommerso. Lasciare riposare per 3 minuti.
- Versare l'EtOH tenendo con cura i vetrini. Ricarica allo stesso livello con più EtOH. Lasciare riposare per 2 minuti.
- Versare nuovamente l'EtOH e rimuovere il vetrino. Posizionali con cura a faccia in su su un tovagliolo di carta pulito per asciugarli. Lasciare riposare per 10 minuti.