Iniezione chirurgica di Cisterna Magna: un metodo per la somministrazione di cellule tumorali direttamente nel sistema nervoso centrale del modello murino

In questo articolo

Abstract

Fonte: Law, V. et al. Un modello di xenotrapianto di ommaya murino per studiare la terapia a bersaglio diretto della malattia leptomeningea. J. Vis. Exp. (2021)

In questo video, descriviamo la procedura per rilasciare cellule tumorali di derivazione umana nella cisterna magna del cervello di un topo. Il modello murino ortotopico può essere utilizzato per studiare la diffusione metastatica del cancro alle meningi craniche.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Preparazione dei CTC

Calcolare il numero di CTC necessarie per l'iniezione e preparare una sospensione monocellulare a 1,0 × 10⁴ cellule/μL in soluzione salina sterile tamponata con fosfato (PBS). Posizionare la sospensione cellulare su ghiaccio o a 4 °C per tutta la durata della procedura.
nota: Quando si utilizzano linee cellulari che richiedono la tripsinizzazione, assicurarsi di lavare le cellule....

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Risultati

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Figura 1: Iniezione di cellule tumorali circolanti nella cisterna magna in un modello murino di xenotrapianto per studiare la malattia leptomeningea e le metastasi del sistema nervoso centrale. (A) Un'illustrazione che mostri la posizione della cisterna magna e il sito di accesso al liquido cerebrospinale, in cui i CTC vengono iniettati utilizzando una siringa di Hamilton. (B) Un'immagine IVIS rappresentativa di topi ch.......