Impianto di finestra di imaging cranico in un modello murino: una procedura chirurgica per impiantare un vetrino coprioggetti a base di vetro per un accesso ottico stabile alle regioni del cervello murino

Abstract

Fonte: Alieva, M. et al. Imaging intravitale longitudinale del comportamento delle cellule tumorali cerebrali in risposta a una biopsia chirurgica invasiva.J. Vis. Exp.(2019)

Questo video presenta una procedura chirurgica per impiantare una finestra cranica in un modello murino per un accesso ottico stabile a diverse regioni del cervello.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Impianto di cellule tumorali e preparazione della finestra di imaging cranico

1. Preparazione chirurgica
   1. Usa topi adulti (>6 settimane) di qualsiasi ceppo o sesso. Sedare un topo iniettando fluanisone [neurolettico] + fentanil [oppioide]) (0,4 ml/kg) + benzodiazepine sedativo (2 mg/kg) alla dose di 1:1:2 in acqua sterile. Valutare lo stato di sedazione dell'animale pizzicando le dita dei piedi.
      

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Aghi ipodermici da 25 G x 16 mm	BD Microlancia
Spugna di gelatina assorbibile	Pfizer	Codice 300600
Vetrini coprioggetti rotondi 6 mm	VWR internazionale		Schiuma di gel
Colla cianoacrilica	Pattex	Codice 631-0168	Pattex Ultra gel
Cemento dentale	Vertice dentale		Autopolimerizzazione Vertex
trapano	Dremel		Dremel 3000 (trapano dentale potrebbe essere più conveniente) + 105 Taglierina per incisione
Pinzette curve fini	Dumont
Olio di silicone	Sigma Aldrich	AGT508
Fotogramma stereotassico	Stoelting	181838
Stereomicroscopio chirurgico	Olimpo		Stereotassico standard da laboratorio, ratto e topo
Unguento oftalmico	Kela Veterinaria		Duodrops veter kela 10 m
Xilocaina (Lidocaina 1% + Epinefrina 1:100.000) Anestetico locale	Astrazeneca		Xilocaina (Lidocaina 1% + Epinefrina 1:100.000)
Hypnorm	VetaPharma Ltd		Hypnorm (Fentanil citrato 0,315 mg/mL + Fluanison 10 mg/mL)
Midazolam	Actavis		Midazolam Actavis 5 mg/mL