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Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
1. Imaging del topo incinta
- Posizionare il topo supino sulla piattaforma di monitoraggio. Il topo riceve continuamente anestetico isoflurano (tra l'1,5 e il 2,5%) e ossigeno (1 L/min) attraverso il cono nasale. Fissare delicatamente tutte le zampe ai cuscinetti di monitoraggio della frequenza cardiaca sulla piattaforma.
- Applicare 1-2 ml di gel per la trasmissione degli ultrasuoni sull'addome.
- Utilizzando il tavolino motore manuale, posizionare la sonda ecografica sul basso ventre.
- Individua la vescica, che dovrebbe apparire come un cerchio scuro pieno di liquido appena cefalico all'apertura vaginale.
- Una volta individuata la vescica, muovere la sonda molto lentamente cefalica per visualizzare l'utero gravido, che dovrebbe apparire come una forma cilindrica con aree rotonde nei siti di gravidanza. Questo può essere descritto come l'aspetto di perle su una catena.
- Una volta identificato l'utero gravido, inizia l'imaging 2D.
2. L'ecografia 2D (Figura 1)
- Una volta identificato l'utero gravido, iniziare dal sito di gravidanza più vicino alla vescica e spostare lentamente e sequenzialmente il cefalo per determinare il numero e la posizione dei siti di gravidanza.
- Se vengono visualizzati il rene, la milza o il fegato, riposizionare la sonda più vicino alla caudale (più vicino alla vescica) poiché l'utente si è spinto troppo in là nel cefalo.
- Immagina il corno uterino controlaterale allo stesso modo.
- Congelare l'immagine quando il fotogramma dell'ecografia si trova al centro del sito di impianto/gravidanza per salvarla per analisi e misurazioni successive.
NOTA: Ci vuole meno di un secondo perché l'immagine venga bloccata e salvata per un'analisi successiva.
- Misurare la distanza di impianto utilizzando la reazione di decidualizzazione iperecogena come marcatore facendo clic manualmente prima sullo strumento "misura" e quindi facendo clic sulla posizione di un sito di impianto. Quindi, trascinare il cursore sul sito di impianto successivo e fare clic per tracciare una linea che il computer riporterà automaticamente la sua distanza. Il software segnalerà quindi qual è la misurazione manuale. Questo passaggio non è computerizzato, ma si basa sull'utente per segnare la distanza tra i siti decidualizzati tracciando una linea tra i siti decidualizzati, per la quale il programma fornirà una misurazione.
- Misurare le dimensioni dell'impianto, le dimensioni del sacco gestazionale e le dimensioni dei poli fetali.
