La stimolazione cerebrale Slice Utilizzando una rete Microfluidic e della Camera di perfusione standard

Summary

Dimostriamo realizzazione di un semplice dispositivo a microfluidi che possono essere integrati con standard di configurazioni di elettrofisiologia per esporre superfici microscala di una fetta del cervello in un modo ben controllata da diversi neurotrasmettitori.

Abstract

Abbiamo dimostrato la realizzazione di due livelli dispositivo a microfluidi che possono essere facilmente integrati con configurazioni elettrofisiologia esistenti. I due livelli dispositivo a microfluidi è fabbricato con un passo a due di serie negativa resistere processo di litografia ^1. Il primo livello contiene microcanali con aspirazione e scarico ad ogni estremità. Il secondo livello contiene microscala fori circolari trova a metà strada della lunghezza di canale e centrato con larghezza del canale. Passiva metodo di pompaggio è utilizzato per pompare fluidi dal tubo di ingresso alla porta di uscita ^2. Il dispositivo a microfluidi è integrato con off-the-shelf camere di perfusione e consente una perfetta integrazione con l'impostazione di elettrofisiologia. I fluidi presentata al flusso di ingresso porte attraverso i microcanali verso i porti di uscita e di fuga attraverso le aperture circolari situato sulla parte superiore del microcanali nel bagno della perfusione. Così la superficie inferiore della fetta cervello nel bagno camera di perfusione e sopra il dispositivo a microfluidi può essere esposto con i neurotrasmettitori diversi. Lo spessore del dispositivo microscala microfluidica e trasparente la natura dei materiali [vetro coprioggetto e PDMS (polidimetilsilossano)] usato per fare il dispositivo a microfluidi permettono microscopia della fetta cervello. Il dispositivo a microfluidi consente la modulazione (sia spaziale e temporale) degli stimoli chimici introdotti microambienti fetta del cervello.

Protocol

SU-8 stampo di fabbricazione

Maestro preparazione

1. Il SU-8 master sul substrato di wafer di silicio viene preparato utilizzando un due fasi di serie negativa resistere processo di litografia.
2. I segni di allineamento sul wafer di silicio vengono rimossi con una lametta come l'altezza di queste strutture (che si trova lungo il perimetro esterno del wafer) è più che le strutture di dispositivo reale.
3. Il wafer di silicio viene poi pulita con alcool isopropilico e asciugato in un flusso di N _2. Pilastri di sostegno fatto di nastro con spessore inferiore della struttura più alta dispositivo sostituire i....

Discussion

Macroscala esistenti o microscala perfusione cerebrale camere fetta sono limitati in termini di risoluzione spaziale che forniscono ad esporre fettine di cervello di neurotrasmettitori. La tecnologia microfluidica dispositivo dimostrato qui supera questa limitazione utilizzando semplici tecniche bioMEMS. Si prevede che la semplicità nella fabbricazione del dispositivo microfluidica e la facilità di integrazione con esistenti configurazioni elettrofisiologia permetterà l'applicazione diffusa della tecnologia dei dispositivi dimostrata. E.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
RC-26GPL	Tool	Warner Instruments	W2-64-0236	Bagno grande a basso profilo RC-26GLP Camera
di registrazione SHD-26GH/10	Tool	Warner Instruments	W2-64-0253	Fermo per fetta in acciaio inossidabile per RC-26G, interasse filettatura 1,0 mm
PDMS (polidimetilsilossano)	Reagente	Dow Corning	Sylgard 184	Kit elastomero siliconico
Plasma Preen-II 862	Tool	Plasmatic Systems, Inc.		Sistema al plasma a microonde
Modello P-1	Tool	Warner Instruments	W2-64-0277	Serie 20 Piattaforma semplice, Modello P-1
SA-NIK	Tool	Warner Instruments	W2-64-0291	Adattatore per Nikon Diaphot/TE200/TE2000, SA-NIK
ACSF (liquido cerebro-spinale artificiale) ossigenato, riscaldato	Reagente			composizione esatta varia a seconda dell'applicazione