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Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
1. Preparazione pre-operatoria
- Sterilizzazione degli strumenti: sterilizzare a vapore gli strumenti chirurgici in autoclave (121 °C per 15 minuti) prima dell'intervento. Imballare gli strumenti in un contenitore di metallo e conservarli fino a quando non vengono utilizzati in ambulatorio.
- Allestimento della piattaforma chirurgica: Assegnare un'area del banco di almeno 60 cm x 60 cm per l'operazione. Pulire la superficie dell'area con alcool al 75% e coprire con un asciugamano medico usa e getta. Posizionare una confezione sterile di strumenti chirurgici, reagenti, articoli chirurgici su un asciugamano medico monouso all'interno del 1/3 superiore dell'area. Lasciare puliti i restanti 2/3 dell'area per l'operazione chirurgica. Aggiungere un hotpad sotto il pad chirurgico per un supporto termico.
- Preparazione degli animali
- Posizionare l'animale (topi C57BL/6J, maschio, di 8 settimane) nella camera di induzione. Accendi il vaporizzatore a un livello di induzione del 4% per l'isoflurano e di 4 L/min per l'ossigeno. Dopo che l'animale è stato completamente anestetizzato, mantenere l'anestetico con il cono nasale e l'erogazione dell'anestetico a un livello dell'1,5% per l'isoflurano e di 0,4 L/min per l'ossigeno durante l'intervento chirurgico. Monitorare la respirazione dell'animale.
- Applicare unguento oculare alla clortetraciclina cloridrato per prevenire la secchezza corneale durante l'intervento chirurgico.
- Radere l'area chirurgica sulla superficie dorsale dalla regione toracica inferiore alla parte superiore della regione sacrale utilizzando un rifinitore per piccoli animali. Rimuovere il pelo rasato con salviette in tessuto.
- Applicare la crema depilatoria sulla zona rasata e lasciarla lì per non più di 3 minuti. Rimuovere la crema con una garza e sciacquare con 2 ml di soluzione fisiologica sterile allo 0,9%.
- Posizionare un cuscinetto cilindrico chirurgico su misura (Figura 1A) sotto l'addome del topo per sollevare la colonna lombare e facilitare l'operazione chirurgica.
2. Esposizione dei processi spinosi del terzo lombare al quinto lombare (L3–L 5)
- Usa il dito indice per toccare i processi spinosi sottocutanei delle vertebre lombari, che sono più verso l'esterno, e confronta con le vertebre toraciche e le vertebre sacrali per identificare la regione lombare.
- Risciacquare la pelle con alcool al 75%. Eseguire un'incisione cutanea della linea mediana di 3-4 cm sulla regione del legno dalla regione toracica media all'anca utilizzando una lama di bisturi per esporre la fascia.
- Identificare la colonna lombare dalla morfologia della fascia posteriore inserita sulle punte dei processi spinosi. In dettaglio, dalla terza fascia lombare (L3) alla prima sacrale (S1) si distinguono dalle altre fasce per la loro forma a "V". L'ultima punta a "V" si collega alla prima fascia sacrale (S1) e la prima punta a "V" corrisponde al processo spinoso L3 (Figura 1B).
- Praticare le incisioni del muscolo paraspinoso posteriore lungo i processi spinosi da L3 a L5 su entrambi i lati lateralmente con una lama di bisturi (Figura 1C). Controllare la profondità dell'incisione verso le faccette per ridurre l'emorragia.
- Separare gli strati muscolari utilizzando due pinze oftalmiche per esporre i processi spinosi da L3 a L5 e i legamenti sovraspinosi.
3. Resezione dei processi spinosi L 3–L5 insieme ai legamenti
- Separare i singoli processi spinosi tagliando i legamenti interspinosi utilizzando le cesoie di Venere (Figura 1D).
- Resecare i processi spinosi L3-L 5 insieme ai legamenti interspinosi con le cesoie di Venere (Figura 1E).
- Sutura l'incisione cutanea con treccia di seta sterile (misura della sutura 5.0) senza riattaccare i muscoli paravertebrali.
- Applicare l'unguento per gli occhi alla clortetraciclina cloridrato sul sito chirurgico.
