Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
Lo studio è stato condotto su sei suini maschi e femmine di tre mesi (Landrace tedesco) del peso di circa 40 kg. Gli animali sono stati portati nelle strutture di cura degli animali almeno 7 giorni prima degli esperimenti e sono stati alloggiati in conformità con le raccomandazioni sul benessere degli animali. Agli animali è stato fornito cibo e acqua ad libitum e il loro stato di salute è stato regolarmente valutato dal veterinario responsabile. Prima degli esperimenti è stato mantenuto un tempo di digiuno di 12 ore. L'intera procedura sperimentale e la gestione degli animali sono state supervisionate dal veterinario responsabile.
1. Induzione dell'anestesia e mantenimento dell'anestesia
- Per l'induzione dell'anestesia e il mantenimento dell'anestesia, premedicare gli animali e sedarli profondamente utilizzando un'iniezione intramuscolare seguita da iniezioni endovenose, se necessario, per eseguire l'intubazione endotracheale. Successivamente, indurre e mantenere l'anestesia utilizzando una combinazione di un agente anestetico volatile con un'applicazione continua di oppioidi integrata con un'ulteriore iniezione di bolo di oppioidi.
- Eseguire iniezioni intramuscolari di ketamina 20 mg·kg-1, azaperone 4 mg·kg-1 e midazolam 0,1 mg·kg-1 per la premedicazione e la sedazione.
2. Posizionamento della sonda
- Posiziona l'animale nella giusta posizione laterale e fletti la schiena dell'animale per allargare lo spazio tra le vertebre.
- Per il posizionamento percutaneo del drenaggio del liquido cerebrospinale per misurare e controllare la pressione cerebrospinale, identificare il livello di L 4/5 o L 5/6, perforare la pelle e lo spazio sottocutaneo con l'ago introduttore e rimuovere l'ago da intarsio.
- Posizionare una siringa piena di soluzione fisiologica sull'ago e introdurre con cautela l'ago con una pressione costante sulla siringa piena di liquido.
- Una volta che si avverte una perdita di resistenza come prova della posizione epidurale, reintrodurre l'ago dell'intarsio e introdurre l'ago 2-3 mm più avanti per perforare la dura madre e rimuovere l'ago dell'intarsio.
- Verificare la posizione intratecale gocciolando rapidamente di liquore trasparente. Introdurre lo scarico fino a 20 cm di profondità, collegare l'adattatore Luer-lock e verificare la posizione mediante un'attenta aspirazione del liquore.
- Fissare con cura il drenaggio con punti di sutura e collegarlo al sistema di drenaggio del liquido cerebrospinale.
