Rimozione della membrana nittitante: una procedura chirurgica per rimuovere la membrana nittitante dall'occhio di coniglio

Abstract

Fonte: Honkanen, R. A., et al. Istituzione di un modello di occhio secco grave utilizzando la dacrioadenectomia completa nei conigli. J. Vis. Exp. (2020).

In questo video, dimostriamo una procedura chirurgica per rimuovere la membrana nittitante dall'occhio del coniglio.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Rimozione della membrana nittitante

NOTA: Per semplicità, la tecnica per l'occhio destro è descritta di seguito. Completa questa procedura sull'occhio sinistro in modo identico. Rimuovere la membrana nittitante bilateralmente durante il periodo di acclimatazione (di solito la prima settimana).

1. Metti il coniglio in un sacchetto di contenimento di dimensioni adeguate.
2. Somministrare un'iniezione sottocutanea di acepromazina (1 mg/kg) sulle spalle utilizzando una siringa da 1 cc e un ago da 26 G per sedare il coniglio. Il punto finale di questa lieve sedazione è quando l'animale mantiene una posizione rilassata della testa senza i normali movimenti di scansione e le sue orecchie non sono più completamente erette.
3. Utilizzando una micropipetta, applicare 25 μl di lidocaina senza conservanti (1%) sull'occhio. Inserire uno speculum di palpebra metallica tra le palpebre.
4. Afferrare la membrana nittitante al suo apice con una pinza da 0,3 (o equivalente) e tirarla sulla superficie corneale. Iniettare lidocaina all'1% con epinefrina 1:100.000 nello spazio sottocongiuntivale della membrana nittitante utilizzando un ago da 26 G. Iniettare circa 0,3 mL per formare una bolla di dimensioni modeste sopra la membrana nittitante. I volumi di iniezione superiori a 1 mL rientrano ampiamente nell'intervallo di dosaggio sicuro per i conigli (2-4 mg/kg).
5. Rimuovere lo speculum a filo. Attendere circa 5 minuti affinché la lidocaina e l'epinefrina facciano effetto. Durante questo periodo, eseguire la stessa procedura nell'altro occhio.
6. Riposizionare lo speculum del coperchio del filo. Afferrare ed estendere la membrana nittitante sulla superficie corneale utilizzando una pinza da 0,3. Tagliare la membrana alla sua base con forbici per tenotomia o equivalenti.
   nota: Lo spurgo è generalmente minimo, ma tenere a portata di mano un'unità di cauterizzazione della batteria ad alta temperatura e utilizzarla secondo necessità per ridurre al minimo lo spurgo. La pressione diretta sulla base tagliata della membrana nittitante può essere utilizzata anche per arrestare piccole emorragie, se si verificano.
7. Rimuovere lo speculum del coperchio del filo. Posizionare un unguento antibiotico topico (neomicina, polimixina, bacitracina e idrocortisone) sulla superficie corneale.
8. Eseguire una procedura identica all'occhio dell'altro come indicato dal protocollo.
9. Rimettere gli animali in gabbie individuali e lasciarli guarire per almeno una settimana, o fino a quando la superficie congiuntivale non è completamente guarita da un punto di vista clinico, prima di eseguire ulteriori test o interventi.
   nota: La guarigione clinica completa è indicata dalla mancanza di qualsiasi gonfiore, iniezione o secrezione dalle superfici congiuntivali. Gli animali devono tenere gli occhi aperti normalmente, senza la presenza di ptosi protettiva.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
acepromazina, Aceproinj	Henry Schein Salute degli animali, Dublino, OH	NDC11695-0079-8	0,1 ml/kg di iniezione sottocutanea per sedazione del coniglio
borsa per contenimento degli animali	Henry Schein Salute degli animali, Dublino, OH	Jorvet J0170	Utilizzare un sacchetto di dimensioni adeguate.
unità di cauterizzazione, per alte temperature, a batteria	Medline Industries Inc, Northfield, IL	RIFERIMENTO ESCT001	Tenere a portata di mano in caso di sanguinamento, protocollo 2.7
pinze, 0,3	Bausch e Lomb (Storz), Bridgewater, NJ	ET6319	Per la rimozione della membrana nittante, protocollo 2.5
speculum per coperchi, a filo	Bausch e Lomb (Storz), Bridgewater, NJ	Barraquer SUH01	Per la rimozione della membrana nittante, protocollo 2.4
Lidocaina 2% con epinefrina 1:100.000; miscela 50:50	Hospira Inc, Lake Forest IL	NDC 0409-3182-02	Pre-trattamento prima della rimozione delle membrane nittanti, protocollo 2.4
lidocaina, senza conservanti	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	L5647	1% in PBS per agente anestesiologico, per applicazione agli occhi, protocollo 2.4
per micropipetta	Eppendorf	Ricerca Plus 100 uL	Per l'applicazione di lidocaina senza conservanti sugli occhi, protocollo 2.4
puntali per micropipette	Prodotti medici in tutto il mondo	41071052	Per l'applicazione di lidocaina senza conservanti sugli occhi, protocollo 2.4
ad ago, calibro 26	BD, Franklin Laghi, NJ	RIFERIMENTO 305115	Per l'iniezione di lidocaina/epinefrina, protocollo 2.3 e 2.5
coniglio, bianco della Nuova Zelanda	Charles River Labs, Waltham, MA (NZW)	2-3 kg	Animali da ricerca
forbici, tenotomia di Westcott	McKesson Medico-Chirurgico, San Francisco, CA	Miltex 18-1480	Per la rimozione della membrana nittante, protocollo 2.7
siringa, 1 cc	BD, Franklin Laghi, NJ	riferimento 309659	Per l'iniezione di lidocaina/epinefrina, protocollo 2.3 e 2.5