Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
Utilizzare conigli bianchi della Nuova Zelanda (NZW) del peso di 2-3 kg Animali leggermente sedati posti in una sacca di contenimento con acepromazina sottocutanea come sopra (1 mg/kg). Rimuovere tutta la pelliccia sul viso e sulla superficie dorsale del cranio per visualizzare i punti di riferimento chirurgici. Rifilare il pelo con le forbici da taglio lasciando un pelo fine residuo di circa 1 mm di lunghezza. Rimuovere tutti i residui di pelo utilizzando una crema depilatoria delicata seguendo le istruzioni del produttore.
1. Rimozione di OSLG
- Infiltrare i siti di incisione (marcatura chirurgica, linee della penna e palpebra posteriore superiore) con una miscela 50:50 di lidocaina al 2% con epinefrina 1:100.000 e bupivacaina allo 0,5% utilizzando una siringa da 5 cc con un ago da 30 G (Figura 1A).
nota: Le dimensioni della siringa e dell'ago non sono fondamentali.
- Utilizzare un ago Colorado collegato a un'unità elettrochirurgica per praticare le incisioni cutanee lungo i segni chirurgici. Le impostazioni possono variare in base alla risposta clinica e in genere sono comprese tra 10 e 15 unità sia per il taglio che per la coagulazione (Figura 1B).
- Applicare una tensione opposta attraverso l'incisione cutanea per separare i tessuti ed esporre le fibre muscolari fronto-scutellari sottostanti.
- Applicare una pressione mediale sul globo oculare per facilitare la visualizzazione dell'OSLG, visto come tessuto rigonfio situato appena medialmente o in profondità rispetto alle fibre muscolari della fronto-scutaola. Se necessario, spostare queste fibre muscolari lateralmente in modo da esporre l'incisione sottostante.
- Con una pinza dentata (0,3) e le forbici per capsulotomia, ritrarre delicatamente e tagliare la capsula fibrosa sovrastante l'OSLG. L'OSLG ha tipicamente un colore marrone chiaro (Figura 1C).
- Usando una pinza dentata o non dentata, afferrare il tessuto ghiandolare OSLG ed estrarlo delicatamente attraverso l'incisione superiore utilizzando una tecnica "mano su mano". Tagliare piccole bande fibrose usando le forbici per capsulotomia per liberare la ghiandola dalla sua posizione nell'orbita (Figura 1D).
nota: Quando il tessuto della ghiandola OSLG viene rimosso, inizierà a fondersi in una grande struttura simile a un tubo (dotto escretore principale).
- Quando la ghiandola è stata rimossa il più completamente possibile, utilizzare un generoso cauterizzazione con l'ago Colorado per creare carbonizzazione tissutale, troncando la ghiandola all'interno dell'incisione il più profondamente possibile. Questo servirà in seguito come punto di riferimento di conferma durante la rimozione del PSLG.
2. Rimozione di PSLG.
- Estroflesse la palpebra superiore con un applicatore con punta di cotone. L'estremità bulbosa del PSLG è solitamente facilmente visibile.
nota: In alcune dissezioni anatomiche, può essere possibile visualizzare il dotto escretore principale come una struttura lineare pallida larga circa 1 o 2 mm.
- Innestare il PSLG con una pinza dentata (0,3) e ritrarlo dalla superficie palpebrale utilizzando le forbici per capsulotomia per tagliare attorno alla sua base separandolo dal tarso sottostante (Figura 2A).
- Controllare il sanguinamento moderato con il cauterizzazione monopolare.
- Applicare una trazione continua sul tessuto separato per mantenere un piano del tessuto per la dissezione. Ciò consentirà di rimuovere anche il dotto escretore principale dell'SLG (Figura 2B).
nota: Man mano che la dissezione viene eseguita, in genere avanza verso il bordo orbitale superiore dove è possibile vedere i segni di cauterizzazione lasciati dalla rimozione dell'OSLG più superiore e localizzato medialmente.