Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
1. Preparazione del modello
- Ospitare il maiale maschio adulto di 50 kg in una struttura per animali per 1 settimana prima dell'intervento chirurgico per acclimatare l'animale alle condizioni di stabulazione e ai conduttori. Accelerare il modello per un minimo di 6 ore prima dell'inizio dell'anestesia.
- Anestetizzare il modello utilizzando un'iniezione intramuscolare di ketamina (33 mg/kg), atropina (0,04 mg/kg) e buprenorfina (0,05 mg/kg) e isoflurano inalato (5%)9.
- Spostare il modello in posizione supina e spruzzare le corde vocali con lidocaina (1%) per prevenire il laringospasmo. Eseguire l'intubazione endotracheale diretta utilizzando un tubo endotracheale cuffiato da 6,5 Fr. Confermare la corretta posizione del tubo endotracheale utilizzando la capnografia.
- Inserire una flebo da 18 G nella vena marginale dell'orecchio e iniziare un'infusione di lattato di Ringer a una velocità di 200 ml/h. Applicare un unguento blando sugli occhi della modella per prevenire la secchezza durante l'anestesia generale.
- Monitora la frequenza cardiaca e la saturazione di ossigeno del modello utilizzando un pulsossimetro applicato alla coda del modello. Ventilare il modello tra 14 e 16 respiri/min utilizzando un ventilatore meccanico e un volume corrente di 5 - 10 ml/kg. Mantenere un'anestesia adeguata mirando a una concentrazione alveolare minima (MAC) di isoflurano compresa tra 2 e 2,5.
- Prima dell'inizio dell'intervento chirurgico, confermare l'adeguata profondità dell'anestesia testando i riflessi del dolore con un pizzico della zampa posteriore. Rivalutare i riflessi del dolore a intervalli regolari durante l'intervento.
2. Preparazione del dispositivo
- Preparare la radiofrequenza salina/bipolare accesa (SBRF; Figura 1) secondo le specifiche del produttore.
- Aprire il manipolo (punta di tenuta bipolare 6.0) e collegarlo al generatore.
- Impostare la portata salina su Bassa. Utilizzare soluzione salina allo 0,9% per una massima conduzione dell'energia.
- Impostare la potenza della radiofrequenza su 160 W.
3. Chirurgia: Laparotomia
- Eseguire una lunga incisione laparotomica aperta sulla linea mediana utilizzando un bisturi #10 che si estende dallo xifisternato al pube e passa attraverso tutti gli strati della parete addominale.
- Stabilire un'adeguata esposizione degli organi solidi di interesse (ad esempio, fegato, milza, reni), mobilizzare altre strutture e inserire un divaricatore se necessario><.
nota: Per semplicità, il fegato sarà indicato come l'organo solido di interesse per il resto di questo protocollo. Questo protocollo includerà anche la creazione di lesioni di grado simile all'interno del rene e della milza.
4. Chirurgia: Lesione Simulata di Organi Solidi
NOTA: Le lesioni descritte di seguito rappresentano una gerarchia di lesioni in peggioramento. Le lesioni sono create da un chirurgo traumatologo esperto e l'emostasi sarà ottenuta da un altro chirurgo.
- Utilizzando una lama di bisturi #10, applicare una forza abrasiva (avanti e indietro) sulla capsula epatica per indurre il sanguinamento capsulare. La lesione dovrebbe essere superficiale (cioè 1 - 2 mm) e di 2 cm2 di dimensioni. L'entità della lesione può quindi essere aumentata con incrementi di 1 cm2 a discrezione dell'operatore.
- Crea lacerazioni di organi solidi di gravità crescente utilizzando l'applicazione diretta di un bisturi. La lunghezza della lacerazione può estendersi da 5 cm a tutta la lunghezza dell'organo. La profondità della lacerazione deve essere di 1 cm e poi aumentata con incrementi di 1 cm a discrezione dell'operatore.
- Crea ferite penetranti con un dispositivo contundente come un morsetto Kelly usando un movimento pugnalante. Questi possono essere di spessore parziale (cioè il 50% dell'organo) o di spessore totale (cioè che passano completamente attraverso l'organo).
5. Emostasi
- Premere il pulsante del manipolo, avviando il flusso simultaneo di soluzione salina e l'erogazione di energia bipolare a radiofrequenza. La soluzione salina bollirà nel sito di applicazione.
- Applicare la punta del dispositivo direttamente sulla superficie grezza del fegato, sulle aree superficiali di sanguinamento o all'interno di difetti nel fegato stesso. Non pugnalare l'organo con l'effettore finale.
- Applicare l'aspirazione simultanea da una ventosa chirurgica standard, se necessario, per erogare la soluzione salina riscaldata e l'energia direttamente nelle aree di emorragia in corso. Questo aiuta anche a visualizzare la posizione precisa dell'emorragia in corso.
- Riscaldare i tessuti a circa 100 °C (coagulazione termica senza carbonizzazione significativa) con un leggero movimento avanti e indietro. Un "pop" uditivo si verificherà dopo 3-5 secondi e significa che l'ustione è completa. L'utente può quindi spostare lo strumento in modo organizzato sul sito di destinazione successivo.
- Se necessario, applicare un elettrocauterizzazione ad alta tensione diretta con precisione in combinazione con l'applicazione dell'SBRF e dei dispositivi di aspirazione per ottenere l'emostasi. Questo può essere necessario per l'emorragia più grande e vigorosa.
6. Sigillatura di dotti biliari di piccole e medie
dimensioni
- Utilizzando lo stesso metodo descritto sopra, applicare la punta dello strumento sul bordo tagliato/danneggiato del parenchima epatico per sigillare i dotti biliari di piccole e medie dimensioni.
