Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
1. Prelievo della vena giugulare
NOTA: Gli anestetici locali (come la lidocaina) dovrebbero essere usati prima di fare l'incisione cutanea.
- Prima dell'incisione cutanea, somministrare enrofloxacina profilattica (5 mg/kg) per via sottocutanea. Per l'analgesia, somministrare 0,05 mg/kg di buprenorfina per via sottocutanea due volte al giorno per 3 giorni.
nota: Per evitare un calo della temperatura corporea, è possibile utilizzare uno scrub chirurgico del sito di incisione invece di spruzzare il corpo dell'animale con il 70% di etanolo.
- Incidere longitudinalmente 50-60 mm della regione cervicale con il bisturi chirurgico. Sezionare senza mezzi termini i tessuti sottocutanei e la fascia per esporre un segmento di 20-30 mm della vena giugulare. Legare tutti i rami della vena esposta con suture di seta 4-0.
- Posizionare una sutura di seta 2-0 attorno alle vene giugulari interne ed esterne per eseguire la legatura immediatamente dopo aver inciso la vena giugulare nel passaggio successivo.
- Incidere la parete venosa (circa 1 mm) del lato distale della vena. Inserire un catetere a palloncino a 2 French dal taglio verso il lato prossimale della vena. Ligate la sutura di seta 2-0 nei siti distali delle vene giugulari.
- Gonfiare il palloncino con 0,2 mL di aria. Denudare l'intima della vena utilizzando tre passaggi del catetere per l'esfoliazione endoteliale.
nota: Questa procedura è considerata equivalente alla distensione di un innesto di vena safena negli interventi di rivascolarizzazione umana, che provoca l'esfoliazione endoteliale.
- Legare l'estremità prossimale della vena. Tagliare la vena per raccogliere.
nota: Distinguere attentamente l'estremità distale e prossimale della vena prelevata, perché l'anastomosi all'arteria deve essere eseguita in modo invertito (cioè, l'estremità distale della vena deve essere anastomizzata all'estremità prossimale dell'arteria). Ad esempio, l'inserimento di un catetere endovenoso da un certo lato funzionerebbe come marcatore.