Colorazione H&E di sezioni di tessuto incluse in paraffina: una tecnica di colorazione differenziale per visualizzare sezioni di tessuto epatico utilizzando la combinazione di coloranti ematossilina ed eosina

Abstract

Fonte: Ellis, J. L et al., Analisi istologiche del danno epatico alcolico acuto nel pesce zebra. J. Vis. Exp. (2017).

In questo video, descriviamo una tecnica di colorazione con ematossilina ed eosina di sezioni di tessuto incluse in paraffina per studiarne l'istologia. La procedura include la deparaffinazione del tessuto seguita dalla colorazione delle cellule nel tessuto. Dopo la colorazione, il nucleo appare distintamente blu e le proteine nel citoplasma mostrano una colorazione rosa.

Protocollo

1. Preparazione delle soluzioni coloranti

1. Filtrare la soluzione madre di ematossilina Harris per rimuovere eventuali solidi che sono precipitati.
2. Piega un filtro da caffè a metà in modo che il filtro crei un cono. Aprire il pannello laterale in modo che il liquido scorra attraverso il filtro, consentendo l'aspirazione di eventuali detriti.
3. Posizionare il filtro all'interno di un imbuto e l'imbuto in una bottiglia di vetro. Versare gradualmente l'ematossilina attraverso il filtro.
   cautela: L'ematossilina è pericolosa in caso di contatto con gli occhi, ingestione e inalazione. Indossare sempre un c....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
95% etanolo (EtOH)	Decon Labs, Inc.	Codice: 2801	infiammabile
Scivoli carichi	Fisher Scientifico	12-550-16
Microscopio da dissezione	Leica Biosystems	Leica Mz 95
Set di coloranti eosina-floxina	Rifornimento per nuovi arrivati	1082A
etanolo	Sigma-Aldrich	E7023	infiammabile
Ematossilina di Harris	Poly Scientific R&D Corp.	S212	Irritante
Acido cloridrico (HCl)	Fisher Scientifico	Visualizzazione del materiale A144	Irritante
Isopropanolo	Rifornimento per nuovi arrivati	Codice 12094E	infiammabile
xileni	Fisher Scientifico	X3S-4	Irritante