Colorazione con safranina-O: un metodo per visualizzare l'integrità strutturale e la cellularità della cartilagine

Abstract

Fonte: Zhao, Y., et al. Istituzione di un modello indotto chirurgicamente nei topi per studiare il ruolo protettivo della progranulina nell'osteoartrite. J. Vis. Exp. (2014).

In questo video, dimostriamo una procedura di colorazione della cartilagine utilizzando la safranina-arancia. Questo metodo aiuta a visualizzare la cartilagine e a rilevare eventuali danni.

Protocollo

1. Colorazione Safranin O

1. Iniziare con i vetrini contenenti sezioni sagittali seriali che coprono una regione dal centro del condilo laterale al centro del condilo mediale di un modello murino soppresso con il menisco mediale destabilizzato.
2. Successivamente, deparaffinare i vetrini in ossilene e idratarli in un gradiente di etanolo in acqua distillata. Successivamente, i vetrini vengono colorati con la soluzione di ferro ematossilina di Weigert, la soluzione Fast Green (FCF) allo 0,05%, la soluzione di acido acetico all'1% e la soluzione di safranina O allo 0,1%. Montare le diapositive utilizzando un mezzo resinoso.
3. Valutare i vetrini colorati con Safranin O in base alla perdita di proteoglicano (colore rosso) nella cartilagine e alla percentuale di distruzione nella struttura della cartilagine, eseguire analisi statistiche per il punteggio istologico.