Articolo metodologico

Metodo di doppia colorazione: una tecnica per visualizzare le interazioni pianta-fungo utilizzando il rosso rutenio e il blu di cotone lattofenolo

8 luglio 2025

In questo articolo

Abstract

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Fonte: Marques, J. P. R., e Nuevo, L. G. Metodo di doppia colorazione per rilevare la pectina nell'interazione pianta-fungo. (2022).

Questo video mostra un metodo di doppia colorazione utilizzando il rosso rutenio e il blu di cotone lattofenolo per visualizzare pectine e chitine durante le interazioni pianta-fungo in una pianta di ruggine del caffè. La procedura aiuta a comprendere i meccanismi di difesa delle piante durante le infezioni fungine.

Protocollo

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1. Processo di doppia colorazione

  1. Inizia con sezioni di foglie ultrasottili e incorporate in resina di Coffee arabica cv. Catuaí infettate da ruggine del caffè. Coprire le sezioni con 2 ml di blu di cotone al 5% in lattofenolo (40% glicerolo, 20% fenolo e 20% acido lattico in acqua) e scaldarle su una piastra calda a 45 °C per 5 minuti (Figura 1A).
  2. Rimuovere il colorante in eccesso lavando tre volte il vetrino in un becher riempito con acqua distillata (Figura 1B-D).
  3. Colorare con 2 mL di rosso rutenio allo 0,01% in acqua per 1 minuto (Figura 1E).
  4. Rimuovere il colorante in eccesso lavando tre volte il vetrino in un becher riempito con acqua distillata (Figura 1F, G).
  5. Mettere una goccia di acqua distillata sulle sezioni e coprire le sezioni con un vetrino coprioggetti da 24 mm x 60 mm per eseguire l'analisi al microscopio ottico.

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Risultati

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Figura 1: Dettagli delle singole fasi del protocollo di doppia colorazione. (A) Coprire le sezioni con gocce di lattofenolo blu di cotone e riscaldare i vetrini su una piastra calda a 45 °C. (B-C) Rimuovere il colorante in eccesso lavandolo in acqua distillata. (D) Sezioni sui vetrini dopo il lavaggio (indicate da frecce). (E) Coprire le sezioni con gocce di rosso r...

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Dichiarazioni

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nessun conflitto di interessi dichiarato.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Piastra riscaldanteDubesserSSCD25X30-110Vmacchiatura
Cotone Blu LattofenoloMetaquímica70SOLSIG024629macchiatura
microscopiaZeiss#490040-0030-000Acquisizione di immagini
Vassoio per tazze di stampaggio in plasticaEmsCodice 10176-30macchiatura
Rosso rutenioLABHouse#006004macchiatura
Software Axion VisionZeiss#410130-0909-000Acquisizione di immagini

Ristampe e permessi

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Tag

Interazione pianta fungocolorazione al rosso ruteniovisualizzazione della pectinarilevamento della chitinapianta colpita dalla ruggine del caffincapsulamento degli austorianalisi microscopicacolorazione istologica

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