Adattamento neuronale al precondizionamento ipossico ripetitivo nei topi

Abstract

Fonte: Poinsatte, K., et al., Quantificazione della protezione neurovascolare a seguito di precondizionamento ipossico ripetitivo e occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media nei topi. J. Vis. Exp. (2015)

Questo video mostra il metodo del precondizionamento ipossico ripetitivo (RHP) esponendo un topo a cicli di ipossia controllati prima di indurre un ictus ischemico. L'esperimento valuta i suoi effetti sulla stabilità della barriera emato-encefalica, sull'adattamento neuronale e sull'infiammazione.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Precondizionamento ipossico ripetitivo

1. Progettazione personalizzata di quattro flussimetri sui regolatori di gas e fissaggio a camere di induzione standard da 15 L con tubi in cloruro di polivinile (PVC) per consentire al gas compresso dai serbatoi di ossigeno (O₂) di fluire nelle camere attraverso una porta di ingresso.
2. Dividi i topi in 2 gruppi: il gruppo di precondizionamento ipossico ripetitivo (RHP), che riceve esposizioni all'8% e all'11% di O₂, e il gruppo di controllo, che riceve esposizioni al 21% di O₂ (aria ambiente) contemporaneamente.
3. Rimuovere il coperchio superiore del filtro di ogni gabbia e posizionare la gabbia, con le bottiglie di cibo e acqua intatte, nelle camere collegate ai rispettivi serbatoi O₂. Chiudere e fissare il coperchio della camera.
   1. Apri la valvola principale del gas per i serbatoi e imposta il flusso iniziale per ogni camera di induzione a 2 L al minuto (LPM) per i primi 5 minuti di esposizione. Ridurre la portata a 1 LPM per il resto dell'esposizione.
   2. Al termine dell'esposizione, ridurre la portata a 0 LPM e chiudere le valvole del gas dei serbatoi.
   3. Aprire i coperchi della camera e riposizionare il coperchio superiore del filtro su ciascuna gabbia. Posizionare le gabbie in stabulazione standard fino alla successiva esposizione ipossica.
4. Spruzzare su ogni camera di induzione con NPD (Steris) o un disinfettante/deodorante equivalente dopo ogni utilizzo.
5. Esporre sia i topi 21% che i topi RHP alla stessa ora del giorno nel corso di due settimane.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Flussimetri, regolatori VetEquip	, Inc	Ordine speciale	Quattro misuratori di portata sono collegati a un tubo flessibile in PVC da 6,0 mm che si collega alla porta di ingresso su ciascuna camera di induzione con un connettore femmina in plastica. Questi misuratori di portata sono imbullonati a una barra metallica da 6,5" x 1" x 1". Questa barra metallica è imbullonata a un manometro MI-246-P con uscita DISS. Questo manometro e flussimetro possono essere fissati a ogni nuova bombola di gas con una chiave.
Serbatoio 21% O₂	AirGas	OX USP200
Serbatoio 11% O₂	AirGas	Specialty ordine
8% O₂ serbatoio	AirGas	Specialty ordine
15 L camere di induzione	VetEquip	941454