Terapia genica basata su vettori virali per il ripristino dell'udito in un modello murino

Abstract

Fonte: Akil, O., et al., Metodo chirurgico per la consegna genica mediata da virus all'orecchio interno del topo attraverso la membrana della finestra rotonda. J. Vis. Exp. (2015)

Questo video mostra la procedura di somministrazione di un gene terapeutico nell'orecchio interno di un cucciolo di topo con perdita dell'udito indotta geneticamente. Utilizzando un vettore virale adeno-associato (AAV), il gene viene iniettato attraverso la membrana rotonda della finestra, consentendo alle particelle virali di entrare nelle cellule ciliate, ripristinare la produzione di trasportatore di glutammato e ristabilire la segnalazione sonora al cervello.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Preparazione dell'animale per l'intervento

1. chirurgico Eseguire le procedure chirurgiche in uno spazio pulito e dedicato. Autoclavare in autoclave tutti gli strumenti chirurgici e sterilizzare con uno sterilizzatore a perle di vetro prima dell'intervento chirurgico.
   NOTA: In questo protocollo, utilizzare topi FVB postnatali del giorno 10-12 (P10-12). Diverse età e ceppi di topi possono essere utilizzati per soddisfare le esigenze di un progetto specifico. I....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Ketamine	Butler Schein
Xylazine	AnaSed
Acepromazine	Fornito da UCSF LARC
Betadine Betadine	Puredue Pharma
Desametasone unguento oftalmico (TobraDex)	Alcon
Termoforo	Braintree scientific, inc.
Ago 25G	BD	305127
pipetta capillare in borosilicato	World precision instruments, inc.	1B100F-4
Microscopio da dissezione	Leica		MZ95
Micropipetta fiammeggiante/ marrone	Strumento Sutter Co
Puller Modello P-97
TDT Sistema BioSig III	Tucker-Davis Technologies