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Articolo metodologico

Una tecnica semplificata per produrre un modello di lesione ischemica

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DOI:

10.3791/3341

2 maggio 2012

In questo articolo

Sommario

Abbiamo sviluppato una tecnica minimamente invasiva per creare un modello di lesione ischemica coniglio orecchio dividendo l'arteria centrale, nervi e il fascio neurovascolare cranica. Un tunnel sottocutaneo quindi taglia tutti i tessuti sottocutanei. Questa procedura provoca un'interruzione minima pelle e può essere tranquillamente utilizzato in animali diabetici.

Abstract

Uno dei principali ostacoli nel corso della ricerca ferita diabetica è la mancanza di un modello di ferita ischemica che può essere tranquillamente utilizzato in animali diabetici. I farmaci che funzionano bene in non-ischemici ferite potrebbero non funzionare in ulcere diabetiche umani perché vasculopatia è uno dei principali fattori che ostacolano la guarigione di queste ferite. Abbiamo pubblicato un articolo nel 2007 che descrive un orecchio ischemico coniglio modello ferita creata da una tecnica chirurgica minimamente invasiva. Da allora, abbiamo ulteriormente semplificato la procedura per facilitare le operazioni. Su un orecchio, tre piccole incisioni cutanee sono state fatte sui peduncoli vascolari, 1-2 cm dalla base dell'orecchio. L'arteria centrale è stato ligato e tagliato lungo il nervo. Il bundle intera cranica è stato tagliato e legato, lasciando solo il ramo caudale intatto. Un tunnel sottocutaneo circonferenziale è stata fatta attraverso le incisioni, per tagliare i tessuti sottocutanei, i muscoli, nervi e piccoli vasi. L'altro orecchio è stato usato come controllo non-ischemica. Quattro le ferite sono state fatte sul lato ventrale of ogni orecchio. Questa tecnica produce 4 ferite ischemici e non ischemici 4 ferite in un animale per confronti a coppie. Dopo l'intervento chirurgico, l'orecchio ischemica era fredda e cianotica, e ha mostrato il movimento ridotto e una mancanza di polso dell'arteria orecchio. Temperatura della pelle dell'orecchio ischemica era 1-10 ° C inferiore a quello sull'orecchio normale e questa differenza è stata mantenuta per più di un mese. Auricolari dei tessuti ad alta energia contenuti di fosfato sono stati inferiori nell'orecchio ischemico che l'orecchio di controllo. Volte cicatrizzazione di ferite sono più nell'orecchio ischemica rispetto al non-ischemica orecchio quando lo stesso trattamento è stato usato. La tecnica è stato utilizzato su più di 80 conigli in cui 23 erano diabetici (diabete di tempo che va da 2 settimane a 2 anni). Nessun coniglio singolo ha sviluppato tutte le complicazioni chirurgiche, quali emorragie, infezioni, o rottura nelle incisioni cutanee. Il modello ha molti vantaggi, come la distruzione po 'di pelle, più tempo ischemico, e il tasso di successo superiore, rispetto a molti altri modelli. E 'can essere tranquillamente utilizzato in animali con ridotta resistenza, e può anche essere modificato per soddisfare i requisiti di test diversi.

Protocollo

1. Base anatomica

L'orecchio di coniglio è stato un materiale di studio privilegiato per la cura delle ferite fin dai primi anni del 20 ° secolo. L'orecchio è alimentato da tre fasci vascolari (centrale, craniale e caudale), il pacchetto centrale è la più grande, mentre le navi nei fasci craniali e caudali sono di dimensioni variabili. Occasionalmente, l'arteria caudale può essere assente. 1 Tutti questi recipienti sono facilmente identificabili dal lato dorsale dopo l'orecchio viene rasato (Fig. 1). Sul lato ventrale, la pelle distale non riceve apporto di sangue dai vasi prossimali. I tre fasci vaso ....

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Discussione

Il diabete colpisce 23,6 milioni di persone negli Stati Uniti, 2,3 e 15-20% di questi pazienti sviluppa ulcere del piede durante la loro vita, 4,5 ad un costo annuale di trattamento di più di $ 25 miliardi. 3,6 Tuttavia, anche i migliori disponibili trattamenti di raggiungere solo un tasso di guarigione del 50% e questo è spesso temporanea, 7 con tassi di recidiva addirittura al 66% nei diabetici. 3,6 Quando si verificano ulcere in pazienti diabetici, complicazioni .......

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Dichiarazioni

Non vi è alcun conflitto finanziaria di interesse coinvolti in questo studio.

Ringraziamenti

Questo studio è stato sostenuto in parte da sovvenzioni NIH 1RO1DK74566 e 1RO1AM52984. Gli autori desiderano ringraziare la signora Jacqueline McCarty in RRC per il suo aiuto durante l'intervento chirurgico, Drs. Jianpu Wang e Harshini Sarojini per il loro aiuto nella cura chirurgica e post-operatoria di alcuni conigli, il dottor Wan Rong per il suo lavoro istologia, e la signora Li Ming per le sue misurazioni HPLC di fosfati ad alta energia.

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Materiali

Per il monitoraggio durante l'intervento chirurgico

  1. Una piastra elettrica per mantenere la temperatura normale.
  2. Un monitor di ossigeno transcutaneo.
  3. Una temperatura monitor.

Per la chirurgia

  1. A # 3 # 15 coltello con lama.
  2. Due coppie di pinze (uno per la pelle e l'altro per altri tessuti molli).
  3. 2-3 paia di piccole pinze.
  4. Uno o due paia di forbici micro (per il taglio del tessuto).
  5. Un paio di piccole forbici (per il taglio di punti di sutura).
  6. Un ago supporto.
  7. Alcuni punzoni in acciaio inossidabile (per rendere le ferite).

Riferimenti

  1. Ninomiya, H. The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts. Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).
  2. American Diabetes Association: Diabetes statistics. , American Diabetes Association. Available from: http://www.diabetes.org/diabetes-basic....

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Ristampe e permessi

Tag

Ischemia dell orecchio di conigliolegatura del peduncolo vascolarecreazione di tunnel sottocutaneochirurgia mininvasivaricerca sulle ferite diabetichemisurazione della temperatura cutaneamonitoraggio transcutaneo dell ossigenovalutazione del tempo di guarigione della feritaanalisi dei fosfati ad alta energia