Method Article

Endocardite modello sperimentale di meticillino resistente Staphylococcus aureus (MRSA) in Rat

DOI:

10.3791/3863

June 4th, 2012

In This Article

Summary

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Sperimentale endocardite modello di ratto a causa di meticillino-resistente S. aureus.

Abstract

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Infezioni endovascolari, tra cui endocarditi, sono pericolose per la vita sindromi infettive 1-3. Staphylococcus aureus è il più comune in tutto il mondo la causa di sindromi simili a morbilità e mortalità eccessivamente elevato, anche con opportuni trattamenti agente antimicrobico 4-6. L'aumento di infezioni dovute alla meticillina-resistenti S. aureus (MRSA), gli alti tassi di insuccessi terapeutici vancomicina clinici e crescenti problemi di linezolid e resistenza daptomicina avere tutte le complica ulteriormente la gestione dei pazienti affetti da tali infezioni, e ha portato a costi sanitari elevati 7, 8. Inoltre, va sottolineato che studi più recenti con i risultati dei trattamenti antibiotici sono stati basati in ambito clinico, e quindi potrebbe essere influenzata da fattori dell'ospite varia da paziente a paziente. Pertanto, un modello animale rilevante di infezione endovascolare in cui fattori dell'ospite sono simili da animale a animale è piùcruciale per indagare patogenesi microbica, come pure l'efficacia di nuovi agenti antimicrobici. L'endocardite in ratto è una consolidata modello animale sperimentale che si avvicina molto umana endocardite della valvola nativa. Questo modello è stato utilizzato per esaminare il ruolo di particolari fattori di virulenza stafilococco e l'efficacia dei regimi di trattamento antibiotico per endocardite stafilococcica. In questo rapporto, descriviamo il modello sperimentale di endocardite a causa di MRSA che potrebbe essere utilizzato per studiare la patogenesi batterica e risposta al trattamento antibiotico.

Protocol

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1. Preparazione del ceppi di MRSA per l'infezione

  1. Inoculare un'ansata della cultura MRSA da un tubo di magazzino a -80 ° C ad un sangue di pecora TSA (TSA) piastra (vedi Tabella di reagenti e attrezzature specifiche), e incubare a 37 ° C per il pernottamento.
  2. Controllare la purezza della cultura sulla piastra di agar sangue (fenotipi di colonie simili) per assicurarsi che non vi è alcuna contaminazione.
  3. Scegli una colonia dalla piastra di sangue di pecora TSA e inoculare la colonia in 5 ml Trypticase Soy Broth (TSB) in 15 ml snap-provetta.
  4. Incubare a 37 ° C per una notte con agitazione a 200 rpm.

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Discussion

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Il endocardite ratto è un modello animale importante e ben caratterizzato per studi in vivo nella patogenesi e agenti antimicrobici nel trattamento di infezioni batteriche 9-11. Inoltre, endocardite modello di ratto rappresenta un composito di infezioni acute e sub-acute, e mima da vicino controparte umana e umana endocardite della valvola nativa. Inoltre, accompagnata da un catetere a dimora, rappresenta una infezione classico biofilm associata, un problema comune e difficile nella pratica clinica <.......

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Disclosures

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Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.

Acknowledgements

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Questo lavoro è stato sostenuto dal National Institutes of Health [una sovvenzione di 39.108 R01AI-ASB] e l'American Heart Association [sovvenzioni SDG 0630219N e AID 09GRNT2180065 a YQX].

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Nome del reattivo Azienda Numero di catalogo Comments
Piastra di agar sangue, sangue di pecora 5% in Soy agar-agar (TSA) Diagnostica Hardy A10BX
Trypticase Soy Broth (TSB) Becton Dickinson 211825
Shaking incubatore Labnet I5311-DS
Tubi in polietilene Becton Dickinson 427401
Catetere introduttore Becton Dickinson 6999
Isofluorance Occidentale Medical Suppy, Inc 2147 Seguire le informazioni sulla sicurezza e la gestione
Strumenti chirurgici Strumenti Scienza Belle e Strumenti di ricerca biomedica, Inc. Trova gli strumenti dalle due aziende per le vostre esigenze

References

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  1. Petti, C. A., Fowler, V. G. Staphylococcus aureus bacteremia and endocarditis. Cardiol. Clin. 21, 219-233 (2003).
  2. Bashore, T. M., Cabell, C., Fowler, V. Update on infective endocarditis. Curr. Probl. Cardiol. 31, 274-352 (2006).
  3. Fowler, V. G. Jr, Justice, A., Moore, C.

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MRSA EndocarditisRat ModelSurgical ProcedureCatheter InsertionTail Vein InjectionQuantitative CultureIn Vivo ImagingAntibiotic EfficacyVirulence FactorsEndovascular Infection

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