È stata apportata una correzione a: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. Un abstract rivisto è stato ripubblicato a causa di un errore del editore.
1 aprile 2012
È stata apportata una correzione a: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. Un abstract rivisto è stato ripubblicato a causa di un errore del editore.
È stata apportata una correzione a: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. Un abstract rivisto è stato ripubblicato a causa di un errore del editore.
Riassunto rivisto:
La determinazione dei titoli virali infettivi è un approccio sperimentale fondamentale ed essenziale per i virologi. I saggi classici di formazione di placche non possono essere utilizzati per virus che non causano effetti citopatici significativi, come nel caso dei ceppi prototipici 229E e OC43 del coronavirus umano (HCoV). Pertanto, è stato sviluppato un saggio immunoperoxidasico indiretto alternativo (IPA), descritto nel presente articolo, per la rilevazione e la titolazione di questi virus. Cellule suscettibili vengono inoculate con diluizioni logaritmiche in serie di campioni contenenti il virus, in un formato a piastra a 96 pozzetti. Dopo la replicazione virale, il rilevamento del virus mediante IPA fornisce il titolo del virus infettivo, espresso come «Dose Infettiva del 50 percento in Colture Cellulari» (TCID50). Tale valore rappresenta la diluizione di un campione contenente il virus alla quale metà di una serie di pozzetti di laboratorio contiene virus infettivi in replicazione. Questa tecnica fornisce un metodo affidabile per la titolazione di HCoV-229E e HCoV-OC43 in campioni biologici come cellule, tessuti e fluidi. Questo articolo si basa su un lavoro inizialmente pubblicato in Methods in Molecular Biology (2008), volume 454, pagine 93-102.
Riassunto originale:
Il calcolo dei titoli virali infettivi rappresenta un approccio sperimentale fondamentale ed essenziale per i virologi. I saggi classici di formazione di placche non possono essere utilizzati per virus che non causano effetti citopatici significativi, come nel caso dei ceppi 229E e OC43 del coronavirus umano (HCoV). In questo articolo viene descritto un saggio immunoperoxidasico indiretto alternativo (IPA) per la rilevazione e la titolazione di questi virus. Cellule suscettibili vengono inoculate con diluizioni logaritmiche in serie dei campioni in una piastra a 96 pozzetti. Dopo la crescita virale, la rilevazione del virus mediante IPA fornisce il titolo del virus infettivo, espresso come «Dose Infettiva per Coltura Tissutale» (TCID50). Questo valore rappresenta la diluizione di un campione contenente il virus alla quale metà di una serie di pozzetti di laboratorio contiene virus in replicazione. Questa tecnica costituisce un metodo affidabile per la titolazione dell'HCoV in campioni biologici (cellule, tessuti o fluidi).
È stata apportata una correzione a: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. Un abstract rivisto è stato ripubblicato a causa di un errore del editore.
Riassunto rivisto:
La determinazione dei titoli virali infettivi è un approccio sperimentale fondamentale ed essenziale per i virologi. I saggi classici di placca non possono essere utilizzati per virus che non causano effetti citopatici significativi, come nel caso dei ceppi prototipici 229E e OC43 del coronavirus umano (HCoV). Pertanto, è stato sviluppato un saggio immunoperoxidasico indiretto alternativo (IPA), descritto nel presente articolo, per la rilevazione e la titolazione di questi virus. Cellule suscettibili vengono inoculate con diluizioni logaritmiche in serie di campioni contenenti il virus, in un formato a piastra a 96 pozzetti. Dopo la replicazione virale, il rilevamento del virus mediante IPA fornisce il titolo del virus infettivo, espresso come «Dose Infettiva del 50 percento in Coltura Tessutale» (TCID50). Tale valore rappresenta la diluizione di un campione contenente il virus alla quale metà di una serie di pozzetti di laboratorio contiene virus infettivi in replicazione. Questa tecnica fornisce un metodo affidabile per la titolazione di HCoV-229E e HCoV-OC43 in campioni biologici come cellule, tessuti e fluidi. Questo articolo si basa su un lavoro inizialmente pubblicato in Methods in Molecular Biology (2008), volume 454, pagine 93-102.
Riassunto originale:
Il calcolo dei titoli virali infettivi rappresenta un approccio sperimentale fondamentale e essenziale per i virologi. I saggi classici di formazione di placche non possono essere utilizzati per virus che non causano effetti citopatici significativi, come nel caso dei ceppi 229E e OC43 del coronavirus umano (HCoV). In questo articolo viene descritto un saggio immunoperoxidasico indiretto alternativo (IPA) per la rilevazione e la titolazione di questi virus. Cellule suscettibili vengono inoculate con diluizioni logaritmiche in serie dei campioni in una piastra a 96 pozzetti. Dopo la replicazione virale, la rilevazione del virus mediante IPA fornisce il titolo del virus infettivo, espresso come «Dose Infettiva per Colture Cellulari» (TCID50). Questo valore rappresenta la diluizione di un campione contenente il virus alla quale metà di una serie di pozzetti di laboratorio contiene virus in replicazione. Questa tecnica costituisce un metodo affidabile per la titolazione dell'HCoV in campioni biologici (cellule, tessuti o fluidi).
Nessun conflitto di interessi dichiarato.
Richiedi il permesso di riutilizzare il testo o le figure di questo articolo JoVE
Richiedi permesso