Articolo metodologico

L'angiogenesi nel polmone del ratto ischemica

DOI:

10.3791/50217

⸱

8 febbraio 2013

 , 
1Johns Hopkins Asthma and Allergy Center, Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Johns Hopkins University

In questo articolo

Sommario

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Il polmone è perfuso sia l'arteria sistemica bronchiale e arterie polmonari. Nella maggior parte delle patologie polmonari, è il più piccolo vascolare sistemica che mostra neovascolarizzazione robusta. La cessazione del flusso ematico polmonare promuove l'angiogenesi vivace bronchiale. Noi forniamo i dettagli chirurgici di indurre ischemia arteriosa polmonare sinistra che promuove la neovascolarizzazione bronchiale.

Abstract

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Il polmone adulto è perfuso sia l'arteria sistemica bronchiale e il ritorno venoso intero che scorre attraverso le arterie polmonari. Nella maggior parte delle patologie polmonari, è il più piccolo vascolare sistemica che risponde ad una esigenza di perfusione polmonare avanzata e mostra neovascolarizzazione robusta. Ischemia vascolare polmonare indotta da ostruzione arteriosa polmonare ha dimostrato di provocare una rapida angiogenesi arteriosa sistemica nell'uomo e in modelli animali. Sebbene la valutazione istologica del corso tempo di proliferazione dell'arteria bronchiale nei ratti è stato accuratamente descritto da Weibel 1, meccanismi responsabili di questa crescita di nuovi vasi organizzata non sono chiare. Noi forniamo i dettagli chirurgici di indurre sinistra ischemia arteriosa polmonare nel ratto che porta alla neovascolarizzazione bronchiale. Quantificazione del grado di angiogenesi presenta una sfida aggiuntiva per la presenza dei due letti vascolari all'interno del polmone. Metodideterminare angiogenesi funzionale sulla base iniezioni microsfere sono etichettati.

Introduzione

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Angiogenesi sistemica nel polmone è ben riconosciuta. In condizioni patologiche quali asma 2, fibrosi polmonare interstiziale 3, cancro 4, tromboembolia polmonare cronica e 5, il sistema vascolare sistemica e circonda i prolifera polmonari e invade il parenchima polmonare. Tuttavia, i modelli animali per studiare questa attivazione differenziale del sistemica piuttosto che la circolazione polmonare sono pochi. Forse il modello più riproducibile di neovascolarizzazione sistemica nel polmone del mammifero adulto è quella che si verifica dopo induzione cronica ischemia arteriosa polmonare. La risposta a sinistra ostruzione del....

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Protocollo

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Tutti i protocolli eseguiti su ratti sono stati approvati dalla Johns Hopkins Animal Care University e del Comitato uso e in conformità con le linee guida NIH. Quando possibile, l'animale deve essere preparata chirurgicamente in una zona separata dalla zona chirurgica per ridurre al minimo la contaminazione del sito chirurgico.

1. Anestesia / analgesia

  1. Posto ratto (ratti Sprague Dawley maschi, 125-150 g; Harlan, Indianapolis, IN) in una camera di induzione infuso con 3% isoflurano.
  2. Posizionare ratto anestetizzato a bordo chirurgia attaccato al cono e ventilatore con il 3% anestesia isoflurano. Utilizzare la tecnic....

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Risultati

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Espressi vascolare: Risultati degli effetti di sinistra ischemia dell'arteria polmonare nel ratto sono rappresentati in figura 1. Viene mostrato un cast in metacrilato del circolo bronchiale e la vascolarizzazione estesa della struttura delle vie aeree sinistra 28 giorni dopo la LPAL. Per ottenere questo cast, il sistema vascolare sistemica è stata iniettata una miscela metacrilato (rosso), retrogrado nell'aorta discendente e la trachea è stata incannulata e iniettato con un materiale a base di .......

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Discussione

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Sinistra legatura dell'arteria polmonare in tutte le specie testate porta alla robusta neovascolarizzazione sistemica del polmone ischemica. Abbiamo presentato i dettagli del metodo chirurgico in un modello di ratto. I nostri risultati prodotti da fusione vascolare, istopatologia, e in vivo dimostrano che l'etichettatura arterie bronchiali proliferano e perfusione del parenchima polmonare. Così, i meccanismi di angiogenesi bronchiale può essere studiata in un modello animale che affianca la condizione u.......

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Dichiarazioni

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Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Ringraziamenti

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Riconosciamo il lavoro del dottor Adlah Sukkar, MD nell'assistere con fusione del polmone. Questo lavoro è stato finanziato dal NHLBI, HL088005.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Reagenti: Azienda
buprenorfina cloridrato, Puralube Butler Schein
bupivicaine APP Pharmaceuticals
Povidone-iodio swabstick Dynarex Corporation
polipropilene dimensioni sutura 6-0, 3/8 cerchio ago inversione di taglio Myco Medical
PE20 tubi Becton Dickinson
15 micron fluorosfere polistirene cremisi Invitrogen
1 ml di vetro siringa Hamilton Hamilton Azienda
Attrezzatura:
Genie Inoltre siringa pompa Kent scientifico
Spettrofotometro fluorescenza Digilab
Roditore Ventilatore Modello 683 Harvard Apparatus
Tabella 1. Tabella di reagenti e attrezzature specifiche.

Riferimenti

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  1. Weibel, E. R. Early stages in the development of collateral circulation to the lung in the rat. Circulation Research. 8, 353-376 (1960).
  2. Li, X., Wilson, J. W. Increased vascularity of the bronchial mucosa in mild asthma. Am. J. Respir. Crit. Ca....

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