Questo settembre a JoVE, i ricercatori della Scuola di Medicina della Libera Università di Berlino dimostrano un nuovo metodo per studiare come i pazienti colpiti da ictus compensano i difetti del campo visivo. Per fare ciò, i nostri autori si avvalgono di un simulatore di guida completo di freni, volante e indicatori di direzione. Utilizzando un software di simulazione di guida e un sofisticato tracciamento oculare, i ricercatori possono confrontare il comportamento dello sguardo dei pazienti colpiti da ictus mentre navigano attraverso percorsi di guida virtuali con vari gradi di complessità. Sebbene l'infarto dell'arteria cerebrale posteriore possa portare a deficit visivi simili nei pazienti, alcuni sono in grado di navigare attraverso i percorsi di guida sviluppando movimenti oculari compensatori, mentre altri si schiantano contro ostacoli pericolosi, come i cinghiali. Attraverso l'analisi del comportamento compensatorio dello sguardo impiegato dai pazienti, i nostri autori vedono un grande potenziale per l'utilizzo della simulazione di guida come strumento per riabilitare i pazienti colpiti da ictus che cercano di superare i punti ciechi nei loro campi visivi.
In collaborazione con la University of Southern California, i ricercatori del Dipartimento di Oftalmologia dell'Oregon Health and Science University presentano un metodo per misurare il flusso sanguigno totale nella retina utilizzando la tomografia a coerenza ottica Doppler (OCT). La retina contiene milioni di neuroni che catturano immagini visive e le convertono in segnali elettrici, che viaggiano attraverso il nervo ottico fino al cervello. I vasi sanguigni entrano nella retina dal disco ottico, dove il nervo ottico si collega alla retina. Questi recipienti forniscono ossigeno e sostanze nutritive e rimuovono anche i rifiuti. In alcune malattie della retina (come la retinopatia diabetica) o il glaucoma (che colpisce il nervo ottico), la vascolarizzazione retinica può essere anormale. Poiché queste malattie sono le principali cause di perdita irreversibile della vista, le misurazioni del flusso sanguigno retinico possono essere molto utili nella pratica clinica e nella ricerca. A differenza dei tradizionali metodi di imaging ottico, come il laser Doppler e il color Doppler a ultrasuoni, il laser Doppler OCT può fornire misurazioni assolute del flusso sanguigno retinico; questi si basano sulla luce spostata Doppler, che viene retrodiffusa dai globuli rossi mentre scorrono attraverso i vasi. I nostri autori dimostrano come scansionare la retina e il disco ottico con l'OCT Doppler; le scansioni vengono poi classificate e analizzate con il software DOCTORC, sviluppato dai nostri autori. Questo metodo mostra una buona riproducibilità tra i selezionatori e i metodi. Inoltre, negli occhi con glaucoma, le misurazioni del flusso sanguigno retinico sono altamente correlate con la perdita della vista. Pertanto, l'OCT Doppler rappresenta un potente strumento che può essere utilizzato nella ricerca oftalmologica e nella pratica clinica.
In concomitanza con la stagione delle zanzare, i ricercatori del Dipartimento di Entomologia della Virginia Tech dimostrano una tecnica semplice e robusta per la mappatura cromosomica dei genomi delle zanzare. Su più di 40 generi di zanzare contenenti migliaia di specie, i ricercatori sono particolarmente interessati ai generi Anopheles, Aedes e Culex perché contengono specie che trasmettono malattie umane dannose. Circa il 90% del genoma di Anopheles gambia è stato mappato in posizioni cromosomiche; tuttavia, è estremamente difficile preparare diffusioni cromosomiche adatte per il genere Aedes o il genere Culex utilizzando linee cellulari e tecniche standard. Per superare questo problema, i nostri autori utilizzano larve di zanzara di 4° stadio, che hanno dischi immaginali che producono diffusioni cromosomiche di alta qualità. I ricercatori mostrano come sezionare i dischi immaginali e preparare preparazioni cromosomiche adatte per l'ibridazione in situ fluorescente (FISH). La mappatura del genoma è quindi possibile per le zanzare dei generi Aedes, Culex e Anopheles. Questa tecnica ha aperto la strada agli entomologi per creare mappe cromosomiche precise non solo per le zanzare, ma anche per altri insetti.
Nel Centro di Ricerca dell'Università del Quebec di Laval, i ricercatori dimostrano un metodo per tracciare la migrazione neuronale nel proencefalo murino. Un importante sito di neurogenesi nel cervello dei mammiferi è la zona subventricolare, e i neuroni appena nati migrano via da quest'area attraverso il flusso migratorio rostrale verso il bulbo olfattivo. Le cellule sono marcate con un retrovirus iniettato stereotassicamente che codifica per una proteina fluorescente verde; Quindi, utilizzando una combinazione di preparazione acuta della fetta, imaging timelapse e analisi delle immagini, i nostri autori possono calcolare la velocità di migrazione dei neuroblasti marcati. Attraverso un attento monitoraggio delle traiettorie cellulari lungo i vasi sanguigni, questo metodo può aiutare a chiarire i diversi segnali molecolari e i meccanismi cellulari che influenzano la migrazione cellulare.
Questo breve riassunto evidenzia solo alcuni importanti video-articoli che verranno rilasciati questo settembre in JoVE. Disponiamo anche di metodi per tracciare il destino cellulare nel pesce zebra con proteine fluorescenti fotoconvertibili, utilizzando micropipette per testare la rigidità cellulare e l'imaging del comportamento delle proteine che rispondono al danno al DNA.