Ipertensione oculare cronica è indotta mediante fotocoagulazione laser del trabecolato negli occhi del mouse. La pressione intraoculare (IOP) è elevato per diversi mesi dopo il trattamento laser. La diminuzione di acuità visiva e la sensibilità al contrasto di animali da esperimento sono monitorati utilizzando il test optomotor.
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Articolo metodologico
Un modello di topo indotta da laser di cronica ipertensione oculare per caratterizzare difetti visivi
In questo articolo
Sommario
Abstract
Glaucoma, frequentemente associata a elevata pressione intraoculare (IOP), è una delle principali cause di cecità. Abbiamo cercato di stabilire un modello murino di ipertensione oculare per imitare ad alta tensione umana glaucoma. Qui illuminazione laser è applicato al limbus corneale per fotocoagulare il deflusso acquosa, inducendo chiusura dell'angolo. Le variazioni di IOP sono controllati mediante un tonometro rimbalzo prima e dopo il trattamento laser. Un test comportamentale optomotor viene utilizzato per misurare corrispondenti variazioni della capacità visiva. Il risultato rappresentante di un topo che si è sviluppato subito dopo IOP elevazione illuminazione laser è indicato. Un acuità visiva diminuita e la sensibilità al contrasto sono osservati in questo oculare ipertensiva mouse. Insieme, il nostro studio introduce un sistema modello prezioso per studiare la degenerazione neuronale e dei meccanismi molecolari sottostanti nei topi glaucomatosi.
Protocollo
Procedure
C57BL/6J topi (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) sono allevati presso la Northwestern University Animal Care strumento. Tutti gli animali sono utilizzati secondo protocolli approvati dalla Northwestern University Institutional Animal Care e del Comitato uso e conforme alle linee guida sull'uso degli animali in Neuroscience Research dal NIH.
1. Fotocoagulazione laser
La procedura di fotocoagulazione laser viene modificata dai protocolli precedentemente pubblicati 5-7.
- Anestetizzare un 40-60 giorni vecchio mouse con un'iniezione intraperitoneale....
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Risultati
Come descritto nelle Procedure, illuminazione laser è finalizzata alla trabecolato nella regione limbare fotocoagulare per il deflusso acquosa, inducendo chiusura di angolo (Figura 1). Occhi più esposte al laser senza significativi danni fisici, distacco pigmento o infezione, in linea con i risultati precedenti 6. Quando un piccolo gruppo di topi (meno del 5% di tutti gli animali al laser) espone i segni fisici di gravi danni, come palle sgonfie occhio, grave cataratta, distacco significativo.......
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Discussione
Segnaliamo soprattutto che l'ipertensione oculare sostenuta può essere indotta da illuminazione laser negli occhi del mouse. Rispetto al modello iniezione salina 18 e il modello cauterizzazione vena 11 entrambi richiedono estese competenze microchirurgia, l'illuminazione laser è relativamente semplice e facile da eseguire. Di solito siamo in grado di eseguire l'illuminazione laser per 4-6 topi in 2-3 ore. I passi fondamentali per raggiungere sostenuta IOP elevazione sono la camera anter.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari in competizione.
Gli autori sono dipendenti a tempo pieno della Northwestern University.
Gli autori hanno ricevuto alcun finanziamento che è stato fornito da aziende che producono reagenti e strumenti utilizzati in questo articolo.
Ringraziamenti
Il lavoro contenuto in questo documento è stata sostenuta dal Dr. Douglas H. Johnson Award per il Glaucoma Research dalla American Health Assistance Foundation (XL), la William & Mary Greve Scholar Award speciale della ricerca per prevenire la cecità (XL), il Illinois Società per la Prevenzione della Cecità (HC) e NIH concedere R01EY019034 (XL).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Reagent | |||
| moxifloxacin | Alcon Labs, Inc. | NDC 0065-4013-03 | 0,5 %, Rx solo |
| Proparacaina cloridrato | Bausch Lomb | NDC 24208-730-06 | 0,5 %, Rx solo |
| soluzione oftalmica USP | Bausch Lomb | NDC 24208-730-06,5 | %, Rx solo |
| ketamina | Butler Schein Animal Health | NDC 11695-0550-1 | 100 mg / kg |
| xilazina | LLOYD Inc. di Iowa | NADA 139-236 | 10 mg / kg |
| soluzione di atropina solfato | Alcon Labs, Inc. | NDC 61314-303-02 | 1 %, solo |
| Equipment | |||
| Slit Lamp, TOPCON | Visual Systems Inc | SL-3E | powered by PS-30A |
| OptoMotry 1.8.0 virtual | CerebralMechanics Inc. | ||
| sistema per test optocinetici | CerebralMechanics Inc. | ||
| Tonometro, TonoLab, per topi | Colonial Medical Supply | ||
| Pad riscaldante | Sunbeam Products Inc | 722-810 | |
| Laser ad argon | Coherent Inc | Ultima 2000SE | |
| DECAPICONE Porta cono in plastica | Braintree Sci Inc. | MDC-200 | per mouse |
Riferimenti
- Gupta, N., Yucel, Y. H. Glaucoma as a neurodegenerative disease. Curr. Opin. Ophthalmol. 18, 110-114 (2007).
- Quigley, H. A. Neuronal death in glaucoma. Prog. Retin. Eye Res. 18, 39-57 (1999).
- McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W.
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Ristampe e permessi
