Differenze valutando in capacità competitiva sperma in Drosophila

Sommario

Differenziale capacità competitiva sperma tra Drosophila Maschi con genotipi distinti possono essere accertata attraverso esperimenti a doppio accoppiamento. Ciascuno di questi esperimenti coinvolge uno dei maschi di interesse e un maschio riferimento. Marcatori facilmente identificabili nella prole consentono inferenza della frazione di individui generò da ogni male.

Abstract

La concorrenza tra i maschi conspecifici di concimazione gli ovuli è uno dei meccanismi di selezione sessuale, ovvero la selezione che opera sulla massimizzazione del numero di eventi di accoppiamento di successo piuttosto che sulla sopravvivenza massimizzazione e la vitalità ^1. Competizione spermatica rappresenta la competizione tra i maschi dopo copulare con la stessa femmina ^2, in cui la loro spermatozoi sono coincidenti nel tempo e nello spazio. Questo fenomeno è stato segnalato in molteplici specie di piante e animali ^3. Ad esempio, catturati in natura D. femmine melanogaster solito contengono spermatozoi 2-3 maschi ^4. Gli spermatozoi sono memorizzati in organi specializzati con capacità di archiviazione limitata, che potrebbe portare alla concorrenza diretta degli spermatozoi da diverse maschi ^2,5.

Confrontando la capacità competitiva sperma di diversi maschi di interesse (tipi maschili sperimentali) è stata eseguita attraverso controllato in doppio-accoppiamento sperimentazionets in laboratorio ^6,7. In breve, una singola femmina è esposto a due diversi maschi consecutivamente, un maschio sperimentale e un maschio riferimento di accoppiamento incrociato. Lo stesso schema di accoppiamento è poi seguito utilizzando altri tipi di sesso maschile sperimentali facilitando così il confronto indiretto della capacità competitiva del loro sperma attraverso un riferimento comune. La frazione di individui generò dai maschi sperimentali e di riferimento viene identificato utilizzando marcatori, che permette di stimare la capacità competitiva degli spermatozoi utilizzando espressioni matematiche semplici ^7,8. Inoltre, la capacità competitiva degli spermatozoi può essere stimata in due diversi scenari a seconda che il maschio sperimentale è seconda o prima di accoppiarsi (offesa e difesa dosaggio, rispettivamente) ^9, che si presume essere riflettente di diversi attributi di competenza.

Qui, descriviamo un approccio che consente di interrogare il ruolo dei diversi fattori genetici che sono alla base putatively tegli fenomeno della capacità competitiva sperma in D. melanogaster.

Introduzione

Dal Geoff Parker ha osservato la prevalenza di competizione spermatica negli insetti e le sue implicazioni evolutive ^2, un'ondata di studi in Drosophila e di altre specie hanno cercato di far luce su questo fenomeno a vari livelli. Alcuni esempi di aree di interesse sono stati l'indagine della sua variazione nelle popolazioni naturali ^9,10, la sua architettura genetica e la pertinenza dei sottostanti fattori genetici ^11-14, e il suo ruolo nel guidare la coevoluzione tra i sessi ^15,16. In D. melanogaster femmine, la limitata capacità degli organi di sperma di stoccaggio specializzati, un paio di spe....

Protocollo

Esperimenti su piccola scala devono essere eseguiti per acquisire familiarità con l'intera procedura.

1. Raccolta di femmine vergini e maschi Naïve

La versione più semplice di questo esperimento descritto è costituito da quattro tipi di croci iniziali, che coinvolgono la seguente combinazione di adulti: a) W ^1.118 individui, al fine di raccogliere femmine vergini, b) individui Oregon-R, al fine di raccogliere i maschi di riferimento naïve, c ) P {sw} maschi omozigoti e femmine vergini provenienti da una linea di controllo che porta l'organizzazione di SDIC w....

Risultati

La tabella 2 riassume alcune caratteristiche salienti di due esperimenti di reato (saggi 1 e 2), in cui D. melanogaster maschi sperimentali con e senza (tipo I e II, rispettivamente) un cluster SDIC funzionale sono confrontati ^14. Dopo aver preso in considerazione diversi episodi che si sono verificati alcuni replicati, 58-83% delle femmine sono risultati essere informativo e quindi la paternità conti di loro progenie potrebbero essere utilizzati per il calcolo di P _2.<.......

Discussione

Abbiamo descritto il disegno sperimentale per valutare le differenze nel contributo relativo geneticamente distinti D. melanogaster maschi alla progenie in esperimenti a doppio accoppiamento controllati ^7,8. Questo è stato fatto nel contesto di un fattore genetico ipotizzato di influenzare la capacità competitiva sperma, ed è stato illustrato nel saggio reato anche se una procedura simile vale per il saggio difesa (Figura 1). Questo disegno sperimentale può essere modificato a test a.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Tubo in lattice ambrato	VWR	62996-473	1/4 di pollice ID, 1/6 di pollice
Parete 1 ml graduato XL puntali	filtranti USA Scientific	1126-7810	È possibile utilizzare qualsiasi puntale per pipetta da 1 ml, ma i puntali semitrasparenti e lunghi sono migliori come ricevitore di mosche. Se si utilizzano le punte del filtro, estrarre ed eliminare il filtro utilizzando un ago dopo aver tagliato l'estremità della punta Parafilm
	Sigma	P-7793
Tessuto			Stereomicroscopio sottile e liscio
	Leica	S6D
CO2 Serbatoio	Airgas	CD-50	Utilizzare FlyNap (Carolina Biological Supply Company) come alternativa se il CO2 non è disponibile
Valvola di fondo FlyStuff, sistema completo	Genesee Scientific	59-121C	Non necessario se si utilizza FlyNap
Fiale di plastica	Genesee Scientific	32-109	Vengono forniti con vassoi di cartone che possono essere riutilizzati per contenere fiale
Batuffoli di cotone	Fisher Scientific	AS-212
Lievito secco attivo	Stella		Rossa Trovato nei negozi di alimentari generici
		Pennarelli Diversi	colori possono essere utilizzati per marcare diversi genotipi