Transgenici e knockout modelli murini di malattie neurologiche sono utili per studiare il ruolo dei geni in neurofisiologia normale e anormale. Questo articolo descrive metodologie che possono essere utilizzati per studiare potenziamento a lungo termine, un meccanismo cellulare che può essere alla base dell'apprendimento e della memoria, in transgenici e knockout banche comportarsi modelli murini di neuropatologia.
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Articolo metodologico
Potenziamento a lungo termine di perforant Pathway-giro dentato Synapse in Liberamente Comportarsi Mice
In questo articolo
Sommario
Abstract
Studi di potenziamento a lungo termine dell'efficacia sinaptica, un fenomeno sinaptica attività-dipendente avente proprietà che lo rendono interessante come potenziale meccanismo cellulare sottostante apprendimento e di memorizzazione, sono da tempo utilizzati per chiarire la fisiologia dei vari circuiti neuronali nell'ippocampo, amigdala , e altre strutture limbiche e corticali. Con questo in mente, modelli transgenici murini di malattie neurologiche rappresentano piattaforme utili per condurre potenziamento a lungo termine (LTP) studi per sviluppare una maggiore comprensione del ruolo dei geni nella comunicazione sinaptica normale e anormale nelle reti neuronali coinvolti nell'apprendimento, emozioni e informazioni trasformazione. Questo articolo descrive metodologie di affidabilità indurre LTP nel topo liberamente comportarsi. Queste metodologie possono essere utilizzate in studi di transgenici e knockout banche comportarsi modelli murini di malattie neurodegenerative.
Introduzione
Lo sviluppo della tecnologia per manipolare i geni ha prodotto transgenici e knockout modelli murini di quasi tutte le malattie neurodegenerative e neurologiche. Ciò ha reso necessaria definizione di tecniche di ricerca elettrofisiologiche precedentemente utilizzati nelle più grandi specie di roditori al modello animale del mouse. Una di queste tecniche di indagine neurofisiologica è l'uso potenziamento a lungo termine (LTP) per testare l'efficacia di connessioni sinaptiche all'interno delle reti neuronali coinvolti in vari disturbi neuropatologici. Questo protocollo descrive le tecniche per affidabile indagine elettrofisiologica della LTP in banche compo....
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Protocollo
Questo protocollo è appropriato per i topi di 3 e 18 mesi di età e peso approssimativo corpo di 30-50 g). I topi possono essere ottenute presso il Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME). Tutti i protocolli chirurgici e sperimentali sono stati approvati dalla cura degli animali ed uso commissione Trinity College ed erano in conformità con la guida NIH per la cura e l'uso di animali da laboratorio.
1. Preparazione degli animali e procedure chirurgiche
- Preparare cocktail anestesia contenente ketamina (25 mg / ml), xilazina (2,5 mg / ml) e acepromazina (0,5 mg / ml). Iniettare 1 ml / kg di peso corporeo nel quadrante inferiore destro dell'addome c....
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Risultati
La tabella 1 mostra le coordinate per la DG e mpp fini del presente protocollo figura 1A mostra i contrassegni per le strutture di destinazione sul cranio.. Mostrato anche sono la posizione degli elettrodi di terra e di riferimento Figura 1B illustra rappresentante risposta evocata traccia sia pre- e posttetanization nello stesso animale. Si noti che il posttetanization risposta evocata è maggiore della risposta pretetanization che è indicativo di LTP induzione 2.<.......
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Discussione
In questo protocollo, abbiamo dimostrato un metodo affidabile e semplice per lo studio LTP in DG nei topi banche si comportano. Mentre molti studi di LTP in ratti svegli sono stati effettuati 3,4, pochissimi sono stati condotti in topi svegli dovuto principalmente alla complessità tecnica rappresentata dalla limitata cranica immobiliare in topi e il peso di headstages elettrodi relativi al peso medio di 5 topi. I pochi studi che hanno dimostrato LTP in DG in banche comportarsi topi utilizzati sia s.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Gli autori desiderano ringraziare il seguente: Dr. Giuseppe Bronzino, Dr. Khamis Abu-Hassaballah, signor RJ Austin-LaFrance, e la signora Jessica Koranda.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Ketamina (100 mg/ml) | Henry Schein | 10177 | |
| Xilazina (20 mg/ml) | Henry Schein | 33197 | |
| Acepromazina (10 mg/ml) | Henry Schein | 2177 | |
| Polvere acrilica dentale | Lang Dental Manufacturing Co. | 1330CLR | |
| Liquido acrilico dentale | Lang Dental Manufacturing Co. | 1306CLR | |
| Filo di tungsteno (0,127 mm) | World Precision Instruments | TGW0515 | |
| Tubo ipodermico in acciaio inossidabile (0,286 mm) | World Precision Instruments | 832400 | |
| Flunixin (50 mg/ml) | Henry Schein | 14165 | |
| Epoxilyte | Superior Essex | EP 6001-M | |
| Inserto in filo di acciaio inossidabile (0,2 mm) | World Precision Instruments | 792900 | |
| Apparecchio a telaio stereotassico | Kopf Instruments | Modello 902 | |
| Ear cuffs (padiglioni auricolari) | Kopf Instruments | Modello 921 | |
| Stimolatore elettrofisiologico | Astro-Med, Inc. | S88 | |
| B K Precision Corp. | 2542 | ||
| Unità di isolamento di corrente | Astro-Med, Inc. | Amplificatore differenziale PSIU-6 | |
| World Precision Instruments, Inc. | DAM-50 | ||
| Commutatore | Plastica Uno | SLC6 | |
| Trapano dentale | Stoelting | 58650 |
Riferimenti
- Paxinos, G., Franklin, K. B. J. The mouse brain in stereotaxic coordinates. , Compact 2nd edn, Elsevier Academic Press. (2004).
- Bliss, T. V. P., Lomo, T. Long-lasting potentiation of synaptic transmission in the dentate area of the anesthetized rabbit following sti....
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Ristampe e permessi
