Diagnostica ecografica ha dimostrato di essere efficace nella diagnosi delle diverse malattie respiratorie in soggetti umani e animali. Dimostriamo un protocollo ecografia completa utilizzata da laboratorio del Dr. Zuo per analizzare la cinetica del diaframma in particolare in modelli murini. Questa è anche una tecnica di ricerca non invasiva che può fornire informazioni quantitative sulla funzione dei muscoli respiratori mouse.
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Articolo metodologico
Diagnostic Ultrasound Imaging di funzione mouse Diaframma
In questo articolo
Sommario
Abstract
Analisi Funzione di roditore muscoli scheletrici respiratorio, in particolare il diaframma, viene comunemente eseguita isolando strisce muscolari utilizzando procedure chirurgiche invasive. Anche se questo è un metodo efficace di valutazione in vitro dell'attività diaframma, esso comporta un intervento chirurgico non-sopravvivenza. L'applicazione di non invasiva ecografia come una procedura in vivo è utile in quanto non solo riduce il numero di animali sacrificati, ma è adatto anche per monitorare la progressione della malattia in topi vivi. Così, il nostro metodo di imaging ad ultrasuoni può probabilmente contribuire allo sviluppo di nuove terapie che alleviano lesione muscolare indotto da varie malattie respiratorie. In particolare, nella diagnosi clinica delle malattie polmonari ostruttive, ecografia ha il potenziale di essere utilizzato in combinazione con altri test standard per rilevare l'insorgenza precoce di affaticamento muscolare diaframma. Nel protocollo attuale, si descrive come valutare con precisione diaframma contractilità in un modello murino utilizzando una tecnica diagnostica ecografica.
Introduzione
Recentemente, tecniche di imaging ad ultrasuoni di diagnostica sono state applicate a modelli murini di ipertensione renovascolare e pancreas 1,2 cancro. Tuttavia, queste tecniche non sono stati ampiamente utilizzati in roditori respiratoria saggio di funzione muscolare. Pertanto, abbiamo sviluppato un metodo di imaging ad ultrasuoni di diagnostica come un valido strumento per le valutazioni in vivo longitudinali di mobilità del diaframma nei topi.
Ci sono diversi vantaggi per diagnostica ecografica. Per esempio, è invasivo, sicuro, portatile, e consente misurazioni in tempo reale ad un costo relativamente basso 3....
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Protocollo
Tutte le procedure che coinvolgono soggetti animali sono stati approvati e completati in conformità e il rispetto degli Institutional Animal Care ed uso commissione Ohio State University (IACUC) norme e linee guida.
1. Topo Anestesia
- Istituire un tavolo procedura pulita con un pad isotermica riscaldata avvolta in un asciugamano chirurgico. Il rilievo di riscaldamento deve essere mantenuta tra 30 ° C e 34 ° C per stabilizzare la temperatura interna dell'animale, riducendo la probabilità di stress per l'animale.
- Posizionare il mouse in una camera di induzione di anestesia con i seguenti parametri: flusso di ossi....
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Risultati
Una tipica immagine ecografica di un diaframma mouse viene mostrato nella Figura 1A. Il diaframma topo spostamento verticale massima è stata registrata. Questa distanza è stata calcolata misurando con precisione la profondità di movimento del diaframma da relax contrazione utilizzando calibri elettronici che fanno parte del software ultrasuoni. Tabella 1 visualizza queste misurazioni della distanza di contrazioni diaframmatici da tre diversi topi. Dopo la conversione del file cine loop .......
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Discussione
Il protocollo sperimentale attuale sviluppa diagnostici tecniche di imaging ad ultrasuoni specifica dell'attività diaframma in un modello murino mediante un approccio non invasivo vivo. Le impostazioni di apparecchi per anestesia sono valori approssimati, che possono essere leggermente adattate per ciascun animale in quanto topi individuo può rispondere in modo diverso ad anestesia. Per evitare somministrazione anestesia improprio, è importante controllare regolarmente i segni vitali del topo compr.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari in competizione.
Ringraziamenti
Questo lavoro è sostenuto da finanziamenti del Fondo UO generale G110 e ricerca di eccellenza Fondo della ricerca biomedica e OSU-HRS Fondo 013.000. Gli autori desiderano ringraziare Lauren Chen per la sua assistenza nella preparazione di questo manoscritto.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sistema di diagnostica per immagini digitale ad ultrasuoni | veterinario Edan | DUS 3 VET | I parametri degli ultrasuoni includono: frequenza di 6,5 MHz, profondità di 29 mm. Nota: Per questo protocollo può essere utilizzata una macchina ad ultrasuoni equivalente Trasduttore |
| ad array micro-convesso | Edan | C611 | O |
| equivalente GE Logiq i unità portatile (HCU) | GE Healthcare | GE Logiq i hand-carried unit (HCU) | O sonda lineare GE equivalente |
| a 12 MHz | GE Healthcare | 12L-RS | O |
| equivalente Vaporizzatore per anestesia veterinaria | Webster Veterinary | Serial #: W422021 L'isoflurano | è stato utilizzato esclusivamente con questo vaporizzatore (o equivalente). Per l'anestesia iniziale è stata assemblata una camera di induzione personalizzata per l'anestesia. L'anestesia di mantenimento è stata eseguita utilizzando un cono nasale |
| Isothesia (Isoflurano, USP) | Butler Schein | 29405 250ML | PVL O |
| equivalente Contenitore assorbente per anestesia Enviro-pure | Surgivet Smiths Medical PM, Inc. | Parte #: 32373B10 | O equivalente Gel |
| trasmissione degli ultrasuoni | HM Sonic | N/A | O equivalente |
| Unguento veterinario Puralube | Puralube | NDC 17033-211-38 | O |
| equivalente Deltaphase isotermico pad | Braintree Scientific Inc. | 39DP | O equivalente |
| Depilatore | Nair N/A | O equivalente | |
| Rasoio elettrico | Remington | HC-5015 | O equivalente |
| Nastro chirurgico | 3M Micropore | 1530-1 | O |
| equivalente Garza spugne | Dynarex | 3262 | O equivalente |
Riferimenti
- Snyder, C. S., et al. Complementarity of ultrasound and fluorescence imaging in an orthotopic mouse model of pancreatic cancer. BMC Cancer. 9, 106(2009).
- Franchi, F., et al.
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Ristampe e permessi
