È stata dimostrata una tecnica per la procedura microchirurgica per il trapianto eterotopico di cuori nei topi, compresi i metodi semplificati per il prelievo del donatore e l'anastomosi del vaso ricevente.
Articolo metodologico
È stata dimostrata una tecnica per la procedura microchirurgica per il trapianto eterotopico di cuori nei topi, compresi i metodi semplificati per il prelievo del donatore e l'anastomosi del vaso ricevente.
I topi sono spesso usati come donatori e riceventi trapianto di cuore negli studi di immunologia dei trapianti grazie alla vasta gamma di topi transgenici e reagenti disponibili. Una difficoltà è presentato a causa delle ridotte dimensioni dell'animale e le considerevoli sfide tecniche della microchirurgia coinvolto nel trapianto di cuore. In particolare, un alto tasso di guasto tecnico subito dopo il trapianto può risultare dalla morte del destinatario e complicanze post-operatorie come la paralisi degli arti posteriori o un cuore non batte. Qui, la tecnica completa per il mouse eterotopico trapianto cardiaco è dimostrata, coinvolgendo raccolta del cuore del donatore e del suo successivo impianto in un topo ricevente. Il cuore del donatore viene raccolto subito dopo in situ perfusione con soluzione salina eparinizzata e freddo recisione dell'aorta ascendente e l'arteria polmonare. L'operazione destinatario prevede la preparazione dell'aorta addominale e la vena cava inferiore (IVC), seguita daend-to-side anastomosi dell'aorta donatore con l'aorta destinatario utilizzando una singola corsa 10-0 microsuture e una simile anastomosi dell'arteria polmonare donatore con il destinatario IVC. A seguito dell'operazione l'animale viene iniettato con 0,6 ml di soluzione salina normale per via sottocutanea e permesso di recuperare su una piastra elettrica 37 ° C. I risultati di 227 trapianti di cuore del mouse sono riassunti con un tasso di successo a 48 ore del 86,8%. Dei fallimenti del 13,2% entro 48 ore, 5 (2,2%) hanno sperimentato la paralisi degli arti posteriori, 10 (4,4%) hanno avuto un cuore non batte a causa di innestare lesione ischemica e / o trombosi, mentre il 15 (6,6%) sono morti entro 48 ore .
Modelli animali di trapianto di organi in grado di fornire informazioni preziose per migliorare il trattamento dei pazienti sottoposti a trapianto clinici. Modelli murini sono particolarmente utili per studiare il meccanismo immunitario di rigetto del trapianto o accettazione a causa della vasta gamma di topi e reagenti specifici per i topi che non sono disponibili per altri modelli animali 1-3 geneticamente modificati. Una sfida con i modelli murini di trapianto è la piccola dimensione dei donatori e dei riceventi che richiede notevole abilità tecnica per ottenere risultati soddisfacenti.
Una tecnica è stata descritta per la p....
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Prima dell'inizio degli esperimenti, ottenere l'approvazione da Animal Care comitato etico dell'istituzione competente per gli esperimenti previsti. Mantenere i topi in conformità con i requisiti della vostra istituzione. Il seguente protocollo è stato approvato dai comitati Sydney University e Royal Prince Alfred Hospital.
Prima di iniziare l'intervento, tutti gli strumenti devono essere puliti a fondo e sterilizzati immergendo nel 80% di etanolo. Alcuni istituti prevedono la sterilizzazione in autoclave tuttavia questo potrebbe danneggiare gli strumenti di microchirurgia sottili a lungo termine. Ove possibile uso sterile....
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Dopo un periodo di formazione iniziale, sono stati analizzati 227 casi di topo eterotopico trapianto di cuore nel nostro gruppo. Il tasso di successo nelle prime 24 ore è stata 90,3% e al 48 hr era 86,8%. Dei 30 (13,2%) guasti entro 48 ore, 5 (2,2%) hanno sperimentato paralisi degli arti posteriori e doveva essere l'eutanasia, 10 (4,4%) aveva un cuore non batte a causa di lesioni ischemia trapianto e / o trombosi, mentre il 15 (6,6%) sono morti entro 48 ore. Alcuni sopravvivenza dell'innesto sperimentali sono mo.......
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Trapianto di cuore Mouse è un metodo microchirurgico impegnativo, che richiede una notevole abilità chirurgica da padroneggiare. L'aspetto più difficile è il piccolo diametro dei vasi. Inoltre, è necessario limitare il tempo di funzionamento destinatario e sanguinamento. La tecnica per il mouse trapianto di cuore è stato descritto da Corry et al. nel 1973 e successivamente da Mottram et al 12. I nostri modifiche includono i seguenti punti. In primo luogo, la perfusione immediata del cuor.......
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Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Questo lavoro è stato sostenuto dal Consiglio nazionale della sanità e ricerca medica (NHMRC) dell'Australia progetto di Grant 1.029.205, dalla Fondazione Microsearch dell'Australia, e dalla Myee Codrington Research Foundation medica.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Microscopio operatorio | Leica, Heerbrugg, Svizzera | M651 | Macchina per anestesia con ingrandimento 10-25X |
| Vet Quip Pty Ltd, Sydney, Australia | Vett3 | In grado di erogare una miscela di isoflurano e ossigeno nell'aria | |
| Tavola operativa | Negozio di ferramenta o fornitore | di ufficio Sughero denso o sintetico in grado di prendere perni | |
| Soluzione salina eparinizzata (5 U/ml, 4 ° C) | Pfizer, USA | FW25 | In siringa da 1 ml con ago da 23 G su ghiaccio |
| Soluzione salina normale (37 ° C) | AstraZeneca Pty Ltd, Australia | 4538 | In siringa da 1 ml con ago da 23 G su tampone caldo |
| Suture 10- nylon, 5-0 Vicryl | Ethicon, Inc. NJ, USA | 2870G/J421H | |
| Buprenorfina (0,05 mg/kg in soluzione fisiologica da 0,1 ml) | Reckitt Benckiser, Sydney, Australia | In siringa da 1 ml con ago da 23 G su ghiaccio | |
| Ampcillina (5 mg/kg in soluzione salina da 0,1 ml) | Aspen, Sydney, Australia | In siringa da 1 ml con ago da 23 G su ghiaccio | |
| Gel Schiuma | Pharmacia & Upjohn Co. USA | 801289304 | Tagliare in piccoli pezzi |
| Dispositivo di cauterizzazione ad alta temperatura | Medtronic, USA | 8444000 | |
| Termoforo / Temperatura destra | Kent Scientific Corporation, Turrington, CT 06790 | ||
| Strumenti di microchirurgia: | Shanghai Medical Instruments Co. Ltd., | ||
| Microneedleholders | Shanghai, Cina | WT2020 | |
| Microforbici | " " | WT1020 | |
| Micropinze (punta dritta) | " " | WA3010 | |
| Micropinze (punta curva) | " " | WA3020 | |
| Morsetti per microzanzare (1 paio) | " " | W40350 | |
| Morsetti atraumatici per microvasi (1 paio) | " " | W40130/W40150 |
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