Fabbricazione e impianto di miniatura a doppio elemento Estensimetri per misurazione<em&gt; In Vivo</em&gt; Gastrointestinale Contrazioni nei roditori.

Gregory M. Holmes; Emily M. Swartz; Margaret S. McLean

doi:10.3791/51739

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Articolo metodologico

Fabbricazione e impianto di miniatura a doppio elemento Estensimetri per misurazione

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DOI:

10.3791/51739

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18 settembre 2014

Gregory M. Holmes¹ , Emily M. Swartz¹ , Margaret S. McLean¹

¹Department of Neural and Behavioral Sciences, Penn State University College of Medicine

In questo articolo

Sommario

La misurazione in vivo delle contrazioni della muscolatura liscia lungo il tratto gastrointestinale degli animali da laboratorio rimane una tecnica potente, anche se sottoutilizzata. Gli estensimetri flessibili a doppio elemento non sono disponibili in commercio e richiedono la fabbricazione. Questo protocollo descrive la costruzione di estensimetri affidabili ed economici per l'impianto acuto o cronico nei roditori.

Abstract

La disfunzione gastrointestinale rimane una delle principali cause di morbilità e mortalità. In effetti, la motilità gastrointestinale (GI) in salute e malattia rimane un'area di ricerca produttiva con oltre 1.400 studi pubblicati sugli animali solo negli ultimi 5 anni. Sono state sviluppate numerose tecniche per quantificare l'attività della muscolatura liscia dello stomaco, dell'intestino tenue e del colon. Le tecniche in vitro ed ex vivo offrono potenti strumenti per studi meccanicistici della funzione gastrointestinale, ma al di fuori del contesto dei sistemi integrati inerenti a un organismo intatto. Tipicamente, la misurazione in vivo delle contrazioni della muscolatura liscia dello stomaco ha comportato una preparazione anestetizzata accoppiata con l'introduzione di un sensore di pressione posizionato chirurgicamente, un carico di pressione statica come un palloncino leggermente gonfiato o dilatando lo stomaco con fluido sotto feedback controllato barostaticamente. Tuttavia, molti di questi approcci presentano svantaggi unici sia per quanto riguarda l'interpretazione dei risultati che l'applicabilità per l'uso in vivo in modelli animali sperimentali coscienti. L'uso di estensimetri a doppio elemento che sono stati apposti sulla superficie sierosa del tratto gastrointestinale ha offerto numerosi vantaggi sperimentali, che possono continuare a superare gli svantaggi. Poiché questi calibri non sono disponibili in commercio, questa presentazione video fornisce una guida dettagliata e passo dopo passo alla fabbricazione dell'attuale design di questi calibri. L'estensimetro descritto in questo protocollo è un progetto per la registrazione della motilità gastrica nei ratti. Questo design è stato modificato per registrare l'attività della muscolatura liscia lungo l'intero tratto gastrointestinale e richiede solo una sottile variazione nella fabbricazione complessiva. Sono inclusi dati rappresentativi dell'intero tratto gastrointestinale, nonché la discussione dei metodi di analisi, l'interpretazione e la presentazione dei dati.

Introduzione

Studi sperimentali che registrano vivo gastrointestinale (GI) motilità attraverso una serie di condizioni sperimentali rimangono un potente strumento per la comprensione dei processi normali e patofisiologici sottostanti necessarie per l'omeostasi dei nutrienti. Tradizionalmente, numerose metodologie sperimentali, alcune con analogie con quelle che si trovano nella pratica clinica ^1, sono stati impiegati per quantificare direttamente variazioni di GI tasso di contrazione ^2-5, la pressione intraluminale ^{6, 7,} o il transito GI dei marcatori non assorbibili ^{8, 9} o isotopi stabili ^10-12. Ognuna ....