Un nuovo metodo di Drug Administration per multipli Zebrafish ( Danio rerio) E la quantificazione di Recesso

Sommario

Viene spiegato un nuovo metodo per ridurre la variabilità quando si espongono i pesci ai farmaci. È stato riscontrato che i pesci esposti a vari modelli di esposizione all'etanolo avevano livelli di ansia alterati durante la sospensione in un test scototassico chiaro/scuro.

Abstract

Il test dell'ansia nel pesce zebra è spesso studiato in combinazione con l'applicazione di sostanze farmacologiche. In questi studi, i pesci vengono regolarmente raccolti con una rete e trasportati tra gli acquari domestici e le vasche di dosaggio. Al fine di migliorare la facilità di somministrazione dei composti, è stato sviluppato un nuovo metodo per il trasferimento dei pesci tra le vasche per la somministrazione del farmaco. Gli inserti progettati per la deposizione delle uova sono stati utilizzati per trasferire gruppi di pesci nella soluzione farmacologica, consentendo un dosaggio accurato di tutti i pesci del gruppo. Ciò aumenta la precisione e l'efficienza del dosaggio, che diventa molto importante in lunghi programmi di somministrazione ripetuta del farmaco. Abbiamo implementato questa procedura per l'uso in uno studio che esamina il comportamento del pesce zebra nel test luce/buio dopo la somministrazione di etanolo con diversi programmi di 21 giorni. Nei pesci esposti a quantità giornaliere moderate di alcol c'era una differenza significativa nella preferenza di posizione dopo 2 giorni di sospensione rispetto al gruppo di controllo. Tuttavia, non è stata osservata una differenza significativa nella preferenza di localizzazione in un gruppo esposto alla somministrazione di abbuffate settimanali.

Questo protocollo può essere generalizzato per l'uso con tutti i tipi di composti che sono solubili in acqua e può essere utilizzato in qualsiasi situazione in cui viene esaminato il comportamento dei pesci durante o dopo lunghi programmi di somministrazione di farmaci. Il test luce/buio è anche un metodo prezioso per valutare i cambiamenti indotti dall'astinenza nell'ansia.

Introduzione

Il pesce zebra (Danio rerio) è una piccola specie di teleostei originario dell'India che è un organismo modello utile per comportamentale ¹ e Medical Research ^2,3. Zebrafish sono anche comunemente usato nella sperimentazione di varie sostanze farmacologiche per caratterizzare il loro impatto sul comportamento. Vari dosaggi e orari di somministrazione dei farmaci sono stati utilizzati per studiare il comportamento del pesce zebra dopo la somministrazione di composti come stimolanti ^4, ansiolitici ⁵ e etanolo ^6-8.

Il nostro laboratorio ha studiato gli effetti dei diversi or....

Protocollo

Tutte le procedure e test comportamentali sono stati approvati da Research Animal Comitato Etico dell'Università di MacEwan con il numero di protocollo 06-11-12, che è in conformità con il Consiglio canadese per le linee guida di cura degli animali per la cura e l'uso di animali da esperimento.

1. Preparare dosaggio Serbatoi, soluzioni e schema di somministrazione

1. Preparare un programma di somministrazione tale che gli animali vengono dosati nello stesso ambiente e nello stesso momento della giornata per evitare confusioni di tempo o di polarizzazione a stimoli visivi.
2. Ottenere il maggior numero di identici, 1....

Risultati

Per mantenere la precisione e controllo in studi farmacologici con zebrafish è importante volta la durata della somministrazione di etanolo costantemente e accuratamente come descritto sopra. La procedura può aumentare la facilità e la velocità del procedimento di dosaggio. La somministrazione di etanolo nei tempi previsti sia un settimanale o giornaliera, binge-moderata ha determinato livelli di ansia alterati, misurati con la luce / buio di prova, rispetto ai controlli. Quando la prova due giorni dopo l'ultima sommini.......

Discussione

Precedenti studi che coinvolgono la somministrazione del farmaco in zebrafish hanno semplicemente fatto affidamento sulla compensazione di pesce per il loro trasporto dal proprio serbatoio di casa nella soluzione della droga ^12,16. La compensazione non è sempre coerente e spesso richiede più tempo del previsto a causa della risposta di fuga del pesce zebra, che ha una significativa variabilità individuale. Metodi di trasferimento tradizionali, pur utile, possono essere migliorate riducendo la quantità di temp.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Sistema di alloggiamento da banco a tre ripiani	Aquatic Habitats	N/A
Acquario da riproduzione da 1,5 L con deflettore da 400 μm	Aquatic Habitats	N/A
Etilene puro da grano	Luxco, INC	N/A
Software di tracciamento del movimento Ethovision XT	Noldus Information Technology
Pipetta	Eppendorf Canada
Arena Luce/Buio	Personalizzato		Costruire secondo la descrizione della procedura. 9,5 cm di larghezza, 9,5 cm di profondità, 55 cm di lunghezza.