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Articolo metodologico

Non terminale Tecniche di prelievo di sangue in Guinea Pigs

38.8K visualizzazioni

DOI:

10.3791/51982

11 ottobre 2014

In questo articolo

Sommario

Anche se un modello noto, la cavia rappresenta attualmente una nicchia in scienze animali sperimentali e dati limitati sono disponibili sul esecuzione della maggior parte delle procedure. Qui vi presentiamo quattro diversi approcci alla non-terminale in tecniche di campionamento del sangue in vivo su cavie sia coscienti o anestetizzati.

Abstract

Le cavie possiedono diverse analogie biologiche per l'uomo e sono convalidati modelli animali sperimentali 1-3. Tuttavia, l'uso di cavie rappresenta attualmente una zona relativamente ristretta dei dati di ricerca e descrittivi sulla metodologia specifica è corrispondentemente scarsa. Le caratteristiche anatomiche di cavie sono leggermente diversi da altri modelli di roditori, quindi la modulazione di tecniche di campionamento per ospitare per specie-specifiche differenze, ad es., Rispetto ai topi e ratti, sono necessari per ottenere campioni di qualità sufficiente e di alta. Per quanto sia lungo e breve termine in studi in vivo spesso richiedono ripetuto sangue campionamento la scelta della tecnica deve essere ben considerato, al fine di ridurre lo stress e il disagio negli animali, ma anche per garantire la sopravvivenza, nonché la conformità con i requisiti di dimensione del campione e accessibilità. Campioni di sangue venoso possono essere ottenuti ad un certo numero di siti in cavie ad es., La safena e giugularevene, ogni tecnica contenente sia vantaggi che svantaggi 4,5. Qui, vi presentiamo quattro diverse tecniche di campionamento del sangue sia per cavie coscienti o anestetizzati. Le procedure sono tutte le procedure non-terminali a condizione che i volumi di campione e il numero di campioni non superino le linee guida per la raccolta del sangue negli animali da laboratorio 6. Tutti i metodi descritti sono stati accuratamente testati e applicati per ripetute in vivo prelievo di sangue in studi all'interno della nostra struttura di ricerca.

Introduzione

La cavia è un modello valido e convalidato animale sperimentale a causa di un numero di somiglianze biologiche per l'uomo, come l'esigenza di un approvvigionamento alimentare di vitamina C, lipoproteine ​​plasmatiche paragonabili enzimi che metabolizzano e profili delle lipoproteine, così come similitudini in comune con placentazione umana e sviluppo prenatale 1-3,7,8. Questo rende la cavia un modello attraente e adatto per studiare gli effetti delle malattie dieta associata come la malattia non alcolica steatosi epatica, malattie cardiovascolari e gli effetti putativi di carenza di vitamina C, ma anche l'effetto di esempio., Intervent....

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Protocollo

Le procedure illustrate sono state eseguite secondo protocolli approvati dal danese Animal Sperimentazione Ispettorato sotto il Ministero dell'alimentazione, dell'agricoltura e della pesca.

1 Prelievo di sangue dal laterale safena o tarsale Vena

  1. Eseguire questa procedura senza anestesia e con l'aiuto di un investigatore, una gestione della cavia, e una raccolta del campione.
  2. Radere la regione tarsale della zampa posteriore con un rasoio elettrico fino a quando le vene sono visibili. Assicurarsi che la zona è abbastanza grande da evitare pelliccia interferire con il sito di puntura.
  3. Posizionare la....

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Risultati

Quattro diversi approcci alla non-terminali vivo tecniche di campionamento del sangue in entrambi in cavie coscienti o anestetizzati sono stati presentati. Figura 1 illustra il corso della safena laterale e vena tarsale nella cavia e possibili siti di puntura. Vene dell'orecchio visibili sulla superficie dorsale di un orecchio cavia sono illustrati nella Figura 2 Queste vene possono essere usate per il prelievo di sangue quando è richiesto solo un volume molto piccolo........

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Discussione

Rispetto ai topi e ratti, cavie sono timorosi per natura e devono essere affrontati con calma e gestite correttamente, al fine di ridurre lo stress. Da un punto di vista del benessere degli animali, agendo con cura è naturalmente una priorità; tuttavia, questo sarà anche ridurre il rischio di effetti di ansia associati sui dati raccolti ad es., aumento dei livelli ematici di corticosteroidi e di glucosio 12. Allo stesso modo, la gestione quotidiana sarà abituare gli animali a procedure normali e può .......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare. Tutte le procedure sono state approvate dalla legge Sperimentazione Animale della Danimarca, che è in accordo con il Consiglio d'Europa Convenzione ETS 123.

Ringraziamenti

Riconosciamo il sapiente aiuto di Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft ed i custodi degli animali presso il Dipartimento di Medicina Sperimentale, Frederiksberg Campus, Facoltà di Scienze della Salute e Scienze Mediche, Università di Copenhagen, Danimarca. Jacob Lønholdt viene ringraziato per l'eccellente assistenza tecnica per le riprese delle procedure. Questo studio è stato sostenuto in parte dal Centro LIFEPHARM di Farmacologia in vivo e Università di Copenhagen.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Rasoio elettricoWella (Contura), Danimarca273207È possibile utilizzare un prodotto alternativo. Fornitori multipli
Siringhe B.Braun-Omnifix-F, Germania9161406VÈ possibile utilizzare un prodotto alternativo.
AghiBD Microlance, Spagna301156È possibile utilizzare un prodotto alternativo. Fornitori multipli
Provetta di raccolta per microvette Sarstedt, D-51588Nü mbrecht, Germania201.288.100È possibile utilizzare un prodotto alternativo. Più fornitori
Analizzatore Accu-CheckRoche A/S Diagnostics, DanimarcaÈ possibile utilizzare un prodotto alternativo. Più fornitori
Eparina 5000 IE/mlLEO Pharma, DanimarcaPuò essere utilizzato un prodotto alternativo. Più fornitori
AnestesiaZoletil 50, Chemvet, DanimarcaÈ possibile utilizzare un prodotto alternativo. Più fornitori
AnestesiaNarcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, DanimarcaPuò essere utilizzato un prodotto alternativo. Più fornitori
AnestesiaTorbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, DanimarcaPuò essere utilizzato un prodotto alternativo.
neutro per gli occhiPuò essere utilizzato un prodotto alternativo. Fornitori multipli
Garza o batuffolo di cotone È possibile utilizzare un prodotto alternativo. Più fornitori
Disinfettante (70% di alcol)È possibile utilizzare un prodotto alternativo. Fornitori multipli
Unguento

Riferimenti

  1. DeOgburn, R., et al. Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs. Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).
  2. Fernandez, M., Volek, J. S.

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Ristampe e permessi

Tag

Campionamento del sangue nel porcellino d'Indiacampionamento non terminalecampionamento dalla vena safenacampionamento dalla vena giugularecampionamento dalla vena tarsalecampionamento dalla vena dell'orecchiocampionamento in animali anestetizzaticampionamento in animali coscientilinee guida per la raccolta del sanguecampionamento in vivo ripetuto