Grazie al collegamento drastica e negativa tra obesità e altre patologie concomitanti, la ricerca sul adiposo giochi di ruolo nella malattia e la salute generale è garantito. Presentiamo un protocollo per l'isolamento e l'escissione di depositi adiposi consentano lo studio della adiposo usare in situ e metodi in vitro.
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Articolo metodologico
Localizzazione, identificazione, e l'escissione dei Depositi Murine adipose
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'obesità è aumentata drasticamente negli ultimi decenni e colpisce oltre un terzo della popolazione adulta degli Stati Uniti. L'effetto economico dell'obesità nel 2005 ha raggiunto l'incredibile cifra di 190,2 miliardi di dollari solo in costi medici diretti. L'obesità è un importante fattore di rischio per una vasta gamma di malattie. Storicamente, si sapeva poco sull'adiposo e sulle sue funzioni principali ed essenziali nell'organismo. L'adiposo bruno e il bianco sono i due principali tipi di adiposo, ma la letteratura attuale ha identificato un nuovo tipo di grasso chiamato brite o adiposo beige. La ricerca ha dimostrato che i depositi adiposi hanno profili metabolici specifici e alcuni depositi consentono una propensione all'obesità e ad altri disturbi correlati. L'obiettivo di questo protocollo è quello di fornire ai ricercatori la capacità di identificare e asportare depositi adiposi che consentiranno l'analisi di diversi effetti fattoriali sul tessuto adiposo; così come il ruolo benefico o dannoso che l'adiposo svolge nella malattia e nella salute generale. L'isolamento e l'escissione dei depositi adiposi consente agli investigatori di esaminare i cambiamenti morfologici grossolani e i cambiamenti istologici. L'adiposo isolato può essere utilizzato anche per studi molecolari per valutare il cambiamento trascrizionale e traduzionale o per la sperimentazione in vitro per scoprire bersagli di interesse e meccanismi d'azione. Questa tecnica è superiore ad altre tecniche pubblicate grazie al design che consente l'isolamento di più depositi con semplicità e contaminazione minima.
Introduzione
Adiposa fatto un'apparizione notevole sotto i riflettori dei media, a causa della notevole aumento di obesità negli ultimi decenni del 20 ° secolo. L'obesità colpisce attualmente più di un terzo degli adulti e il 17% di bambini e adolescenti negli Stati Uniti (US) 1. Spanning tutti i gruppi etnici, ricerca statistica che circonda l'epidemia di obesità ha mostrato che i neri non ispanici hanno il tasso aggiustato per età più alta di obesità (49,5%) rispetto ai messicani americani (40,4%), tutti gli ispanici (39,1%), e non bianchi ispanici (34,3%) 2. L'effetto economico di obesità è anche una preoccupazione crescente per il sistema....
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Protocollo
NOTA: Tutte le procedure sugli animali sono state eseguite con l'approvazione della Cura e uso Comitato Animal Istituzionale (IACUC) dell 'Università di Cincinnati ed in conformità con la guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio dal National Institutes of Health (NIH Publication No . 85-23, Revised 1996).
1. Euthanize e sterilizzare il mouse
- Posizionare il mouse in un set contenente una dose supratheraputic di isoflurano e permettono di inalare a effetto. Una volta che il mouse è eutanasia, rimuoverlo dalla scatola.
- Cervicale dislocate come un secondo mezzo di eutanasia.
- Sterilizzare l....
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Risultati
Identificazione e localizzazione delle adiposo sottocutaneo inguinale, interscapolare adiposo bruno, viscerale adiposo epididimale (figura 1), nonché la aortico adiposo perivascolare arco, toracica adiposo aortica, suprarenal adiposo aortica e dell'aorta infrarenale adiposo (Figura 2) è stata ottenuta con successo usando il metodo chirurgico descritto. L'esame istologico e la differenziazione tra i campioni BAT e Wat sono stati positivamente valutati usando ematossilina e eosina (H &.......
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Discussione
L'obesità può portare a una grande serie di morbilità e la piena comprensione del ruolo che svolge adiposo non è pienamente compreso; ricerca pertanto continuato nel campo della adiposo è necessaria. I modelli animali, in particolare i modelli murini sono ideali per la ricerca iniziale nella progressione delle malattie e la sperimentazione di potenziali trattamenti farmaceutici. Utilizzando questi modelli, isolamento precisa e escissione di depositi adiposi è uno strumento estremamente importante e necessario nello .......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti o altri conflitti di interesse.
Ringraziamenti
Gli autori non hanno riconoscimenti.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Isoflurane | Med-Vet International | #RXISO-250 | |
| 70% Etanolo | Fisher | 07-678-001 | |
| DMEF-12 | Sigma Aldrich | D-6421 | Riscaldare a bagnomaria prima di applicare il fazzoletto. |
| Provette per microcentrifuga da 2 ml | Midsci | MCT-200-C-S | |
| Soluzione salina tamponata con fosfato | Sigma | Aldrich P5368-10PAK |
Riferimenti
- Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010. NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).
- Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index....
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Ristampe e permessi
