La pneumonectomia di topo è un modello comunemente impiegato di crescita polmonare compensatoria. Questa procedura può essere utilizzata in combinazione con il tracciamento del lignaggio o con modelli murini transgenici per chiarire i meccanismi sottostanti.
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Articolo metodologico
Topo Pneumonectomia Modello di crescita compensatoria Lung
In questo articolo
Sommario
Abstract
Negli esseri umani, la riparazione e il rimodellamento interrotti del polmone danneggiato contribuiscono a una serie di disturbi polmonari acuti e cronici che possono portare alla disabilità o alla morte. I modelli animali di riparazione e rigenerazione polmonare basati sulla lesione sono limitati da risposte specifiche della lesione, rendendo difficile differenziare i cambiamenti relativi alla risposta e alla risoluzione della lesione dai cambiamenti relativi alla riparazione e alla rigenerazione polmonare. Tuttavia, l'uso di modelli animali per identificare queste vie di segnalazione di riparazione e rigenerazione è fondamentale per lo sviluppo di nuove terapie volte a migliorare la funzione polmonare a seguito di lesioni polmonari. Il modello di pneumonectomia murina utilizza la crescita polmonare compensatoria per isolare quei segnali di riparazione e rigenerazione al fine di definire più chiaramente i meccanismi di resettazione alveolare. Qui, descriviamo la nostra tecnica per eseguire la pneumonectomia di topo e la pneumonectomia fittizia. Questa tecnica può essere utilizzata in combinazione con il tracciamento del lignaggio o altri modelli murini transgenici per definire il meccanismo molecolare e cellulare della riparazione e rigenerazione polmonare.
Introduzione
La funzione principale del polmone è di fornire ossigeno e anidride carbonica scambio tra un organismo e l'atmosfera. Negli esseri umani, una serie di condizioni congenite ed acquisite portano a ridurre la superficie del polmone che si traduce in deficit della funzionalità respiratoria. Anche se una serie di terapie come corticosteroidi inalatori, broncodilatatori, ossigeno supplementare, e la ventilazione meccanica cronica sono utilizzati per attenuare le conseguenze di funzionalità polmonare ridotta 1-3, la terapia ideale per queste condizioni dovrebbe promuovere la ricrescita del tessuto polmonare funzionale - cioè, polmone rigenerazione. <....
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Protocollo
Uso affermazione Animal:: NOTA Tutte le procedure di questo studio sono stati condotti con l'approvazione e seguendo le linee guida del Istituzionale uso degli animali e del Comitato Care (IACUC) dell'Ospedale dei bambini di Cincinnati. Otto settimane di età C57BL / 6J maschi sono stati ottenuti da Jackson Laboratories (Bar Harbor, ME) e permesso di ambientarsi per una settimana prima dell'uso. Fino chirurgia, gli animali sono stati alloggiati in una struttura senza barriere-patogeno e fornito chow autoclavato e filtrata ad acqua libdium. Ogni gabbia mouse è stato alimentato con aria dedicato e acqua e sale sono stati mantenuti su una 12....
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Risultati
. Una trama di PNX e sham gestito pesi del mouse viene fornito in figura 6 Nelle nostre mani, la sopravvivenza è costantemente 95-100% per entrambi PNX e sham pneumonectomia. Per una descrizione di come il polmone destro re-cresce in questo modello e il decorso previsto, rimandiamo il lettore di manoscritti di Gibney et al. 15 e Wang et al. 14
Diversi problemi comuni devono essere evitati per eseguire con successo le procedure sham pne.......
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Discussione
Abbiamo fornito la descrizione più dettagliata delle procedure PNX del mouse PNX e mouse farsa segnalati fino ad oggi. Abbiamo fatto il lettore a conoscenza di alcuni dei problemi comuni che gli investigatori di apprendimento la procedura comunemente incontrano, e abbiamo delineato diverse tecniche sviluppate dal nostro laboratorio per mitigare queste trappole. Altri laboratori che utilizzano questo modello possono sviluppare altre modifiche tecnica o utilizzare strumenti diversi. Nel valutare le differenze nelle tecnic.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Gli autori ringraziano la Divisione dei Servizi Veterinari del Cincinnati Children's Hospital per la loro assistenza. Questo manoscritto è stato supportato dal National Institutes of Health K12 HD028827. Anna Perl PhD ha insegnato agli autori questa procedura chirurgica.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Applicatore di clip vascolari da 6 pollici | Teleflex Medical (WECK) | 137062 | |
| Horizon piccola clip rossa in titanio | Teleflex Medical (WECK) | 1201 | |
| Pinza curva da 12 cm | Fine Science Tools | 11003-12 | |
| Pinza Graefe seghettata curva da 10 cm | Fine Science Tools | 11052-10 | |
| Porta | aghi CastroviejoFine Science Tools | 12565-14 | |
| Forbici per strabismo dritte da 9 cm (punta smussata) | Fine Science Tools | 14075-09 | |
| Forbici fini dritte da 8,5 cm temprate | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| Forbici a molla dritte e smussate Cohan-Vannas | Fine Science Tools | 15000-12 | |
| Colla per pelle | Gluture | 32046 | |
| 22 G Angiocatheter | |||
| 24 G Angiocatheter | |||
| 3 ml Siringa | |||
| 4 Divaricatori | |||
| 2 Divaricatori | |||
| 5-0 Prolene su ago da taglio curvo | Ethicon | 8698G | |
| Siringa da 0,5 ml su ago | |||
| Soluzione salina | |||
| Buprenorfina | |||
| Press-n-Seal wrap | Glad Products Company | ||
| 12 x 12 pollici Sughero bordo pila | Ufficio Deposito | ||
| 70% etanolo | |||
| Betadine | |||
| Ventilatore per topi | Hugo Sachs Elektronnik | Minivent Tipo 845 | |
| Vaporizzatore isoflurano | OHMEDA | Excel 210 SE | |
| Unguento lacrimale artificiale | Puralube | NDC: 17033-211-38 |
Riferimenti
- Strueby, L., Thebaud, B. Advances in bronchopulmonary dysplasia. Expert review of respiratory medicine. , (2014).
- Donn, S. M., Sinha, S. K. Recent advances in the understanding and management of bronchopulmonary dysplasia. Seminars in fetal & neonatal med....
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Ristampe e permessi
