Un protocollo step-by-step per il collocamento inter-posizionale di ingegneria tessutale Vessels (TEV) nella carotide di una pecora con anastomosi end-to-end e di valutazione digitale in tempo reale in vivo fino al sacrificio degli animali.
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Articolo metodologico
Tecnica chirurgica per l'impianto di ingegneria tessutale vascolari Innesti e successive
In questo articolo
Sommario
Abstract
Lo sviluppo di ingegneria tessutale Vessels (TEV) è avanzata dalla capacità di di routine ed efficace TEV impianto (4-5 mm di diametro) in un grande modello animale. Un protocollo passo-passo per il posizionamento tra posizionale della valutazione TEV digitale in tempo reale del TEV e arterie carotidi native è descritto qui. In vivo monitoraggio è reso possibile dal impiantazione di sonde di flusso, cateteri e cristalli ultrasonici (grado di registrare i cambiamenti di diametro dinamici di TEV impiantati e delle arterie carotidi native) al momento della chirurgia. Una volta impiantato, i ricercatori possono calcolare i modelli flusso di sangue arterioso, invasiva della pressione arteriosa e del diametro dell'arteria che producono parametri come la velocità dell'onda di polso, indice di aumento, le pressioni di impulsi e la conformità. L'acquisizione dei dati viene eseguita utilizzando un singolo programma per computer per l'analisi per tutta la durata dell'esperimento. Tali dati inestimabile permette di comprendere meglio TEV rimodellamento della matrice, la sua resemblanCé a controlli nativi / sham e prestazioni TEV generale in vivo.
Introduzione
L'obiettivo principale per lo sviluppo di TEV è stato quello di fornire un sostituto per la sostituzione del trapianto autologo quando vasi autologhi non sono disponibili e limitare donatori di vista morbilità. Ad esempio, il numero di interventi di bypass coronarico all'anno ha superato 350.000 negli Stati Uniti, e la fonte ideale di opportuni innesti rimane fianco arteria mammaria interna, discendente anteriore dell'arteria coronaria e safena 1. Dal momento che molte persone che soffrono di malattie vascolari non possono avere le arterie e le vene adatte per la sostituzione del trapianto autologo, lo sviluppo di TEV è così diventato un campo ....
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Protocollo
NOTA: Questo protocollo è stato approvato dalla cura e l'uso degli animali Comitato presso la State University di New York a Buffalo.
Preparazione 1. Pre-chirurgica
- Utilizzare pecore (Dorset croce, femmina, circa 1-3 anni con un peso di 40-60 kg) per il seguente studio. Somministrare ciclosporina A (200 mg / die), aspirina (975 mg / die), e coumadin (20-30 mg / die) per via orale, iniziando 3 giorni prima chirurgia e continua per tutta la durata di tutti gli studi.
- Assicurarsi che la pecora ha digiunato 12 ore prima dell'intervento chirurgico (alimentazione normale = 1,8 kg e 0,4 kg di fieno grano).
- ....
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Risultati
Più di 30 pecore sono stati sottoposti alla tecnica chirurgica descritta nella presente relazione per l'impianto di TEV (in corso di stampa) 9. Una tabella che riassume le più recenti operazioni di ovini dopo l'ottimizzazione del protocollo sono riportati nella tabella 2. Tutte le pecore recuperati dopo TEV l'impianto senza pericolo di vita complicazioni. In alcuni animali, la fibrosi è stata osservata in arteria nativa vicino alla punta del catetere arterioso. Non è stato osserva.......
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Discussione
Lo scopo di questo rapporto è quello di fornire una procedura affidabile e riproducibile di TEV impianto di interesse nella carotide ovine. Le arterie carotidi native degli animali utilizzati in questo modello sono stati 0,5-0,75 mm di spessore e 4,5-5 mm di diametro esterno. La tecnica chirurgica qui descritta ha avuto successo per l'impianto di TEV di varie geometrie di misura 0,25-1 mm di spessore, 4-5 mm di diametro esterno e 4 cm di lunghezza con grande successo dimostrando efficace fino a 3 mesi di durata, il .......
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Dichiarazioni
Non ci sono divulgazioni da segnalare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto da sovvenzioni dal Cuore e Polmone Istituto Nazionale (R01 HL086582) e la Stem Cell Science Fund di New York (NYSTEM, Contract # C024316) per STA e DDS illustrazioni utilizzate in video JoVE sono state completate da John Nyquist; Medical Illustrator dalla State University di New York a Buffalo.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Trasduttore di pressione | Becton Dickinson | P23XL-1 | Quantità: 1+ (1 per ogni arteria). Utilizzato con cupole a membrana riempite d'acqua. |
| Scatola dell'amplificatore e del trasduttore | Gould | 5900 | Quantità: 1, Nella gabbia devono essere inclusi due trasduttori e amplificatori. Sebbene questa unità specifica possa essere interrotta, altri trasduttori di pressione disponibili in commercio con uscita BNC/analogica comunicheranno con l'apparecchiatura Sonometrics. |
| Console T403 con modulo flussimetro perivascolare TS420 (x2) | Sistemi transonici | Modulo T403 e TS420 (x2) | Quantità: 1, Le sonde di flusso che misurano il flusso attraverso ciascuna delle arterie carotidi si collegheranno a ciascuna delle unità TS420. |
| Unità di misura digitale ad ultrasuoni | Sonometrics | TR-USB | Quantità: 1 |
| Sonda di flusso Precision S-Series 4 mm | Sistemi transonici Inc. | MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA | Quantità: 2 |
| 1 mm Sonometrics Crystals | Sonometrics Systems | 1R-38S-20-NC-SH | Quantità: 2-4 (2 per ogni arteria) |
| Catetere per impianto | BD (Becton Dickinson) | 381447 | Quantità: 1+ (1 per ogni arteria). Il catetere viene tagliato e fissato al tubo microborato, la stiletta viene utilizzata per l'inserimento. |
| Tygon Microbore Tubing | Norton Performance Plastics | (AAQ04127) Formulazione S-54-HL | Taglio a misura per un set di estensione |
| Luer Stub Adapter | BD (Becton Dickinson) | 427564 (20 gauge) | Quantità: 1+ (1 per ogni catetere arterioso) |
| Tappo per iniezione Surflo | Terumo | SR-IP2 | Quantità: 1+ (1 per ogni catetere arterioso) |
| Meadox | PTFE (Teflon) Feltro | 19306 | Taglio a misura. Il feltro PTFE utilizzato nei nostri studi è stato interrotto. Tuttavia, aziende comparabili come " Rete chirurgica" offrire prodotti equivalenti. |
Riferimenti
- Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: Results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study. Journal of the American College of Cardiology. 44, 2149-2156 (2004).
- Achouh, P., et al.
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Ristampe e permessi
