Articolo metodologico

Test per Odore Discriminazione e assuefazione nei topi

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DOI:

10.3791/52615

5 maggio 2015

In questo articolo

Sommario

Questo manoscritto descrive un protocollo per esaminare il sistema olfattivo dei roditori. Il test di assuefazione/disassuefazione olfattiva consentirà agli investigatori di determinare se un topo si abitua a un odore presentato ripetutamente e se il topo dimostra disassuefazione quando gli viene presentato un nuovo odore.

Abstract

Questo video dimostra una tecnica per stabilire la presenza di un sistema olfattivo normalmente funzionante in un topo. Il test aiuta a determinare se il topo è in grado di discriminare tra odori non sociali e odori sociali, se il topo si abitua a un odore presentato ripetutamente e se il topo dimostra disabitudine quando gli viene presentato un nuovo odore. Poiché molti test di comportamento sociale misurano la risposta dell'animale sperimentale a un topo familiare o nuovo, i falsi positivi possono essere evitati stabilendo che gli animali possono rilevare e discriminare tra gli odori sociali. Ci sono considerazioni simili nei test di apprendimento, come il condizionamento della paura, che utilizzano l'odore per creare un nuovo ambiente o segnali olfattivi come stimolo associativo. I deficit nel sistema olfattivo comprometterebbero la capacità di distinguere tra i contesti e di formare un'associazione con un segnale olfattivo durante il condizionamento della paura.

Nel test di abitazione/disassuefazione degli odori, al topo vengono presentati ripetutamente diversi odori. Ogni odore viene presentato tre volte per due minuti. L'investigatore registra il tempo di sniffing diretto verso l'odore come misura della risposta olfattiva. Un topo tipico mostra una diminuzione della risposta all'odore nel corso di presentazioni ripetute (assuefazione). Lo sperimentatore presenta quindi un nuovo odore che suscita un aumento dell'annusare verso il nuovo odore (disassuefazione). Dopo ripetute presentazioni del nuovo odore, l'animale mostra di nuovo assuefazione. Questo protocollo prevede la presentazione di acqua, due o più odori non sociali e due odori sociali. Oltre a ridurre i confondi sperimentali, questo test può fornire informazioni sulla funzione dei sistemi olfattivi di nuove linee di topi knockout, knock-in e knockout condizionale.

Introduzione

I topi sono dipendenti olfatto per la navigazione nuovi ambienti, trovare cibo, per riconoscere gli altri individui, e il comportamento sessuale 1-3. È essenziale che gli investigatori stabilire se animali da esperimento hanno un senso dell'olfatto funzionamento prima di somministrare test comportamentali che coinvolgono il cibo, interazione sociale, o eventuali odori destinati a provocare una risposta dal mouse. Anosmia o l'incapacità di distinguere tra diversi odori, potrebbe causare falsi positivi o negativi in ​​una vasta gamma di paradigmi comportamentali, quindi la capacità di un mouse per rilevare e distinguere gli odori devono essere stabil....

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Protocollo

I topi maschi adulti utilizzati per la seguente esperimento sono stati generati e ospitati presso la Baylor University ad una temperatura ambiente di 22 ° C, con una luce 14 ore e 10 ore scuro (20:00-6:00 h) ciclo diurno. I topi sono stati dati ad libitum l'accesso al cibo e all'acqua. Tutte le procedure per i topi erano in conformità con il National Institutes of linee guida sanitarie per la cura e l'uso di animali da laboratorio e il protocollo di origine animale è stato approvato dal Baylor University Animal Care and Use Committee. I topi sono stati testati nella tarda mattinata / primo pomeriggio. Per tutte le procedure sotto l'investigatore deve indossare i ....

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Risultati

Seguendo il protocollo descritto, i risultati sono stati registrati usando dieci adulti (giorno postnatale 90-120) maschi C57BL / 6J e otto FVB misto sfondo ceppo maschio (giorno postnatale 50-70). Il test è stato effettuato da un singolo operatore su più giorni. Ogni punto sui grafici rappresenta il tempo medio trascorso investigare un odore.

Quando viene introdotto il tampone di cotone imbevuto di acqua, i topi trascorrono gran parte del tempo a studiare questo nuovo oggetto (Figur.......

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Discussione

I risultati forniti nel presente documento sono ottimali per i topi. I topi dimostrano una forte risposta ad un romanzo odore, quindi abituare rapidamente. Una delle fasi principali di questo metodo è la preparazione degli odori. L'investigatore deve fare molta attenzione per isolare gli odori gli uni dagli altri per evitare contaminazioni. Un altro aspetto fondamentale è la presentazione del tampone di cotone. L'investigatore deve risolvere la migliore posizione della punta di cotone in modo che il mouse può in.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è supportato da una sovvenzione del Baylor University Research Council e da una borsa di ricerca della Epilepsy Foundation.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Gabbia per topiAllentownper topi standard
Coperchio in filo metallicoAllentownBCU Mouse WBL 2500
Biancheria da lettoHarlan7090 Sani-Chips
Cotton fiocVWR89031-270Manico in legno da 6"
Estratto di bananaMcCormick
Estratto di mandorleMcCormick
Nastro da laboratorioVWR89098-062
CronometroVWR62374-000
Guanti in nitrileVWR82026
Dispositivo di cronometraggioVWR61161-350
Tubi conici da 15 mlVWR89003-294
Bicchieri da 2 LPyrex1003
ParafilmParafilmPM-9924" x 250'
Bottiglia da 1 L con tappoVWR89000-240
Gabbia

Riferimenti

  1. Doty, R. L. Odor-guided behavior in mammals. Experientia. 42, 257-271 (1986).
  2. Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in respon....

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Abituazione agli odoriSistema olfattivoOdori socialiOdori non socialiComportamento del topoComportamento di sniffingTest di abituazioneDishabituazioneReattivit olfattiva

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