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Articolo metodologico

Cateterizzazione cardiaca nei topi per misurare il rapporto pressione del volume: Indagare l'effetto Bowditch

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DOI:

10.3791/52618

14 giugno 2015

In questo articolo

Sommario

Questo articolo descrive la misurazione della funzione ventricolare sinistra murina tramite l'analisi della pressione/volume a diverse frequenze cardiache.

Abstract

I modelli animali che imitano i disturbi cardiaci umani sono stati creati per testare potenziali strategie terapeutiche. Un componente chiave per valutare queste strategie è quello di esaminare i loro effetti sulla funzione cardiaca. Ci sono diverse tecniche per misurare in vivo meccanica cardiaca (ad esempio, ecocardiografia, le relazioni di pressione / volume, ecc.) Rispetto a ecocardiogramma, ventricolare in tempo reale a sinistra (LV) pressione / analisi del volume tramite cateterismo è più precisa e penetranti nel valutare la funzione ventricolare sinistra. Inoltre, l'analisi LV pressione / volume di fornisce la capacità di registrare istantaneamente variazioni durante le manipolazioni di contrattilità (ad esempio, la stimolazione β-adrenergico) e insulti patologici (ad esempio, ischemia / riperfusione). Oltre al massimo (+ dP / dt) e minimo (-dP / dt) tasso di variazione di pressione nella LV, una valutazione accurata della funzione ventricolare sinistra attraverso diversi indici indipendenti dal carico (ad esempio, pressione finale sistolicapossono essere raggiunti rapporto volume e precarico lavoro ictus recruitable). La frequenza cardiaca ha un effetto significativo sulla LV contrattilità tale che un aumento della frequenza cardiaca è il meccanismo principale per aumentare la gittata cardiaca (cioè, effetto Bowditch). Così, quando si confrontano emodinamica tra i gruppi sperimentali, è necessario avere frequenze cardiache simili. Inoltre, una caratteristica di molti modelli cardiomiopatia è una diminuzione della riserva contrattile (cioè, diminuzione effetto Bowditch). Di conseguenza, le informazioni vitali può essere ottenuta tramite determinare gli effetti di aumentare la frequenza cardiaca sulla contrattilità. I nostri e altri dati hanno dimostrato che il neuronale ossido nitrico sintasi (NOS1) topo knockout è diminuita contrattilità. Qui si descrive la procedura di misurazione della pressione LV / volume con l'aumento della frequenza cardiaca utilizzando il modello di topo knockout NOS1.

Introduzione

Lo scopo del cuore è di pompare sangue attraverso il corpo per soddisfare le richieste metaboliche dell'organismo. Poiché queste richieste sono costantemente fluttuanti (ad esempio, durante l'esercizio), il cuore deve adattarsi (cioè, aumentare la gittata cardiaca). Il cuore ha messo a punto numerosi sentieri per compiere questa impresa. La maniera privilegiata nel cuore raggiunge questo è tramite un aumento della frequenza cardiaca (ad esempio, effetto Bowditch) 1. Cioè, come uno di frequenza cardiaca aumenta, ciò si traduce in un aumento della contrattilità e un aumento della gittata cardiaca. Pertanto, la funzione del ....

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Protocollo

NOTA: Questo protocollo animale è stato approvato dalla cura e l'uso degli animali Comitato Istituzionale (IACUC) presso la Ohio State University. Questa procedura può essere utilizzato su qualsiasi topo in cui il diametro interno della carotide è grande abbastanza per inserire il catetere. Utilizzare i topi che sono al di sopra di 16 g (~ 2 mesi più vecchi).

1. Preparazione del mouse per Catheterization

  1. Sigillare tutti gli strumenti chirurgici e le forniture in un sacchetto di sterilizzazione. Sterilizzare il sacchetto in una macchina autoclave. Mantenere un campo sterile tutta la procedura e indossare guanti sterili.

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Risultati

Il corretto inserimento del catetere nel ventricolo sinistro è un passo importante per raggiungere valori di pressione e volume appropriato. Mostrato in figura 1, utilizzando LabChart Pro 7, è il cambiamento della forma d'onda di pressione (forma e valori) come il catetere va dalla arteria nel ventricolo.

Dopo corretto inserimento del catetere nel ventricolo sinistro, la pressione (P) ed il volume (V) i valori ottenuti saranno poi utilizzati per generare i loop PV (mostr.......

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Discussione

Un punto critico per questa tecnica per ottenere una misura affidabile della contrattilità è corretto posizionamento del catetere nel LV. Se il catetere non è posizionato correttamente, quando contrae la LV le pareti possono contattare il catetere a valori molto elevati, e non fisiologici, pressione causando irregolare loop PV sagomati. Se necessario, il catetere può essere ruotato per ottenere il corretto posizionamento. Un altro passo fondamentale per questa tecnica è quello di assicurarsi il mouse ricevuto anestesia .......

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Dichiarazioni

Non vi sono interessi finanziari concorrenti.

Ringraziamenti

Questo studio è stato supportato da sovvenzioni NIH HL091986 (JPD) e HL094692 (MTZ).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Glizina 100  mg/mlAna Sed4821
Katamin 50  mg/mlKetalar310006
EparinaAPP Prodotti farmaceutici6003922
filo di seta 4-0Specialità chirurgicheSP102
6-0 filo di setaSpecialità chirurgicheMBKF270
PinzeStrumenti per la scienza fine11251-10
Pinze per curveStrumenti per la scienza fine11274-20
ForbiciFine Science Tools14090-09
Pinza vascolareFine Science Tools18555-03
MicroscopioWorld precision instrumentsPZM-3
Catetere a pressioneStrumenti MillarSPR-839
Sistema di pressione e volumeStrumenti MillarMPVS-300
PowerLab4/35AD instrumentsN12128
LabchartPro 7AD instruments
Regolatore di temperaturaCWETC-1000
StimolatoreGrassSD-5
Guanto sterileMicro-Touch1305018821
Lozione depilanteNair
Betadine scrub chirurgicoLaboratori veterinariNDC 6761815401
di decontaminazionedell'alcol2801
Bovie CauterryBovieAA29
1  ml Siringa (26  Ago G)BD8017299

Riferimenti

  1. Janssen, P. M. Myocardial contraction-relaxation coupling. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 299, H1741-H1749 (2010).
  2. Roman, M. J., Devereux, R. B. Comparison of noninvasive measures of contractility in dilated cardiomyopathy. Echocardiography. 8....

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Ristampe e permessi

Tag

Analisi pressione volumeventricolo sinistrotopo knockout per NOS1stimolazione della frequenza cardiacamisurazione del ciclo PVprelievo di sangue eparinatoocclusione della vena cavavalutazione della contrattilit