Un poco costoso, test comportamentale scalabile per la misurazione etanolo sedazione sensibilità e tolleranza Rapid in<em&gt; Drosophila</em

Simran Sandhu; Arnavaz P. Kollah; Lara Lewellyn; Robin F. Chan; Mike Grotewiel

doi:10.3791/52676

Articolo metodologico

Un poco costoso, test comportamentale scalabile per la misurazione etanolo sedazione sensibilità e tolleranza Rapid in

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DOI:

10.3791/52676

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15 aprile 2015

Simran Sandhu¹ , Arnavaz P. Kollah¹ , Lara Lewellyn¹ , Robin F. Chan¹ , Mike Grotewiel¹^,²

¹Department of Human and Molecular Genetics, Virginia Commonwealth University, ²VCU Alcohol Research Center, Virginia Commonwealth University

In questo articolo

Sommario

Semplici saggi per misurare la sensibilità all'etanolo e la rapida tolleranza in Drosophila facilitano l'uso di questo organismo modello per studiare questi importanti comportamenti correlati all'etanolo. Qui viene descritto un test relativamente semplice e scalabile per misurare la sensibilità all'etanolo e la rapida tolleranza nei moscerini.

Abstract

L'uso di alcol disturbo (AUD) è una sfida di salute gravi. Nonostante una grande componente ereditaria per AUD, pochi geni sono stati inequivocabilmente implicati nella loro eziologia. Il moscerino della frutta, Drosophila melanogaster, è un modello potente per esplorare i meccanismi molecolari alla base genetica comportamenti alcol-correlati e detiene quindi una grande promessa per l'identificazione e la comprensione della funzione dei geni che influenzano AUD. L'uso del modello Drosophila per questi tipi di studi dipende dalla disponibilità di saggi che misurano affidabile risposte comportamentali a etanolo. Questo rapporto descrive un test adatto per valutare la sensibilità etanolo e tolleranza rapida in mosche. Etanolo sensibilità misurata in questo saggio è influenzata dal volume e la concentrazione di etanolo utilizzato, una varietà di manipolazioni genetiche precedentemente riportati, e anche la lunghezza di tempo in linea sono alloggiati senza cibo immediatamente prima del test. Al contrario, etanolo sensitivity misurata in questo dosaggio non è influenzato dal vigore di movimentazione mosca, sesso in linea, e la supplementazione di mezzo di crescita con antibiotici o lieviti vivi. Tre metodi diversi per quantificazione sensibilità etanolo sono descritte, tutto conduce a risultati sostanzialmente indistinguibili sensibilità etanolo. La natura scalabile di questo test, in combinazione con la sua semplicità complessiva di set-up e relativamente a basso costo, lo rendono adatto per l'analisi piccola e grande scala genetica della sensibilità etanolo e tolleranza rapida in Drosophila.

Introduzione

L'uso di alcol disturbo (AUD) è un problema di salute enorme in tutto il mondo (rivisto in ^1). Sebbene i meccanismi di guida lo sviluppo di AUD sono complesse, questi disturbi hanno una notevole componente genetica (ad esempio, ^2). La grande ereditabilità di AUD e le risposte comportamentali conservati in etanolo in molte specie (recensito in ^3,4) hanno generato un forte interesse ad utilizzare organismi modello genetici per studiare il coinvolgimento di specifici geni nei comportamenti etanolo legate verso una migliore comprensione delle basi molecolari di AUD. Il moscerino della frutta, Drosophila melanogaster,....