Qui vi presentiamo un protocollo che descrive ossigenato ex situ macchina di perfusione di fegati donatore. Questo articolo contiene un passo per passo protocollo di procurarsi e preparare il trapianto di fegato per la macchina di perfusione, preparare il liquido di perfusione, primo la macchina di perfusione ed eseguire ossigenato normotermica macchina perfusione del trapianto di fegato.
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Articolo metodologico
Ex Situ normotermica macchina di perfusione di Vivi donatori
In questo articolo
Sommario
Abstract
In contrasto con conservazione a freddo statico convenzionale (0-4 ° C), ex situ perfusione macchina può fornire una migliore conservazione di fegati di donatori. Perfusione continua degli organi offre l'opportunità di migliorare la qualità di organi e permette ex valutazione della vitalità economica situ di fegati donatori prima del trapianto. Questo articolo video fornisce un passo per passo protocollo per ex situ perfusione macchina normotermica (37 ° C) di fegati di donatori umani utilizzando un dispositivo che fornisce una pressione e temperatura controllate pulsatile perfusione dell'arteria epatica e perfusione continua della vena porta. Il liquido di perfusione viene ossigenata da due ossigenatori a membrana a fibre cave e la temperatura può essere regolata tra 10 ° C e 37 ° C. Durante la perfusione, l'attività metabolica del fegato così come il grado di lesione può essere valutata mediante analisi biochimica dei campioni prelevati dal liquido di perfusione. Perfusione macchina è uno strumento molto promettenteper aumentare il numero di fegati che sono adatti per il trapianto.
Introduzione
L'attuale metodo di conservazione dell'organo nel trapianto di fegato è a filo con e successivo stoccaggio di fegatini di donatori a freddo (0-4 ° C) del liquido di conservazione (come ad esempio l'Università di Wisconsin soluzione o la soluzione Istidina-triptofano-chetoglutarato). Questo metodo è denominato frigoconservazione statica (SCS). Sebbene il tasso metabolico di fegati a 0-4 ° C è molto basso, vi è ancora richiesta per / min / g di tessuto epatico 0,27 mmol ossigeno, che non possono essere forniti durante SCS 1. Il metodo convenzionale di SCS, quindi, si traduce in un certo grado di (ulteriore) lesione di fegatini di donatori. Anche ....
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Protocollo
Questo protocollo è stato approvato dal Comitato Etico Medico (Medisch Ethische Toetsingscommissie) del University Medical Center di Groningen, Paesi Bassi.
1. Preparazione del liquido di perfusione
Nota: Il volume totale del fluido di perfusione preparato per normotermica perfusione macchina secondo questo protocollo è 2.233 ml e l'osmolarità mirata del liquido di perfusione è 302 mOsmol / L.
- Dai componenti del liquido di perfusione descritto in Tabella 1, mantenere le umane imballato globuli rossi, plasma congelato fresco e albumina umana separati. Mescolare il resto dei compo....
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Risultati
12 fegati umani che sono stati declinati per il trapianto a causa di vari motivi sono stati utilizzati dopo aver ottenuto il consenso informato per la ricerca provenienti da famiglie di donatori. Caratteristiche donatori sono descritte in Tabella 2. I fegati di donatori umani sono stati perfusi normothermically per 6 ore utilizzando il protocollo descritto in questo documento. La qualità dei fegati sono stati valutati attraverso il monitoraggio omogeneità macroscopica della perfusione del fegato
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Discussione
Questo video offre un passo per passo protocollo per normotermica macchina di perfusione di fegatini di donatori umani utilizzando un dispositivo che consente a pressione controllata a doppio perfusione attraverso la arteria epatica e vena porta. Seguendo questo protocollo, guasti tecnici della macchina di perfusione non si è verificato e tutti gli innesti sono stati ben perfuso e ben ossigenato. I situ perfuso fegati ex avevano emodinamica stabile ed erano metabolicamente attiva, come definito dalla p.......
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Dichiarazioni
Gli autori di questo manoscritto non hanno alcun conflitto di interessi di rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro di ricerca è stato sostenuto finanziariamente da sovvenzioni fornite da Innovatief Actieprogramma Groningen (IAG-3), Jan de Cock Kornelis Stichting e Tekke Huizingafonds, tutto nei Paesi Bassi. Siamo grati a tutti i coordinatori di trapianto olandesi per identificare i potenziali scartato fegatini e ottenere il consenso informato.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Assistenza epatica | Assistenza d'organo OA | . Li.Li.140 | Dispositivo di perfusione |
| Liver Assist confezione monouso | Organ Assist | OA. Li.DP.540 | Set monouso e cannule |
| Meredith No.8 | Vygon Nederlands B.V. | 1362082 | Cannula del dotto biliare |
| Albumina umana 200 g/L / ALBUMAN | Sanquin | 15522598 | 100 ml |
| Nutrizione parenterale modificata | Baxter Nederland B.V. | N14G30E | 7,35 ml |
| Multivitaminici per infusione / CERNEVIT | Baxter International Inc. | 9800927 | 7 μ l |
| Oligoelementi concentrati per infusione / NUTRITRACE | B. Braun Melsungen AG | 14811332 | 7,35 ml |
| Metronidazolo 5 mg/ml | Baxter Nederland B.V. | 98181882 | 40 ml |
| di Cefazolina / SERVAZOLIN | Sandoz B.V. | 15611337 | 2 ml |
| insulina ad azione rapida | 20 ml | ||
| di glucoinato di calcio, soluzione endovenosa 10%, 137,5 mg/ml | Sandoz 97038695 | 40 ml | |
| sterile H2O | Fresenius Kabi Nederland B.V. | 98084453 | 51,3 ml |
| NaCl 0,9% | Baxter Nederland B.V. | 15262510 | 160 ml |
| di eparina 5.000 IE/ml per somministrazione endovenosa | LEO Pharma B.V. | 98026178 | 4 ml |
| Bicarbonato di sodio 8,4% | B. Braun Melsungen AG | 97973874 | La quantità dipende dal pH |
| Globuli rossi concentrati (in SAGM) | Banca del sangue (Sanquin) | N0012000 | 750 ml |
| Plasma fresco congelato | Banca del sangue (Sanquin) | N04030A0/N04030B0 | 900 ml |
Riferimenti
- Plaats, A., et al. Hypothermic machine preservation in liver transplantation revisited: Concepts and criteria in the new millennium. Ann. Biomed. Eng. 32 (4), 623-631 (2004).
- op den Dries, S., Sutton, M. E., Lisman, Y., Porte, R. J.
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Ristampe e permessi
