I modelli animali sono strumenti importanti per la valutazione degli innesti di ingegneria tissutale. Questo articolo presenta il protocollo per la preparazione di un innesto polimerico biodegradabile elettrofilato per l'uso nell'ingegneria tissutale del legamento crociato anteriore, nonché un protocollo chirurgico per l'impianto in un modello di ratto.
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Articolo metodologico
Atimico Rat modello per la valutazione di Engineered legamento crociato anteriore Innesti
In questo articolo
Sommario
Abstract
La rottura del legamento crociato anteriore (LCA) è una lesione legamentosa comune che spesso richiede un intervento chirurgico perché il LCA non guarisce bene senza intervento. Le attuali strategie di trattamento includono la ricostruzione dei legamenti con autotrapianto o allotrapianto, che hanno ciascuno i propri limiti associati. Pertanto, c'è interesse nella progettazione di un innesto di ingegneria tissutale da utilizzare nella ricostruzione del LCA. Descriviamo la fabbricazione di un innesto polimerico elettrofilato per l'uso nell'ingegneria tissutale ACL. Questo innesto di policaprolattone è biocompatibile, biodegradabile, poroso ed è composto da fibre allineate. Poiché per valutare un tale innesto è necessario un modello animale di questo tipo, questo articolo descrive un modello intra-articolare di ratto atimico di ricostruzione del LCA che può essere utilizzato per valutare innesti ingegnerizzati, compresi quelli seminati con cellule xenogeniche. Vengono presentati i risultati rappresentativi dei test istologici e biomeccanici a 16 settimane dopo l'intervento, con gli innesti testati immediatamente dopo l'impianto e gli ACL nativi controlaterali che fungono da controlli. Il presente studio fornisce un modello animale riproducibile con cui valutare gli innesti di LCA di ingegneria tissutale e dimostra il potenziale di un approccio di medicina rigenerativa al trattamento della rottura del LCA.
Introduzione
Rottura del legamento crociato anteriore (LCA) è uno dei più comuni lesioni legamentose del ginocchio 1. Perché la rottura del LCA è in grado di guarire senza intervento chirurgico, le limitazioni nelle attività della vita quotidiana e la partecipazione a sport di auto oltre 175.000 pazienti di sottoporsi ad intervento chirurgico ogni anno 2, con un costo stimato di un miliardo di dollari l'anno 3. Attualmente, sia autologo o allogenico tendine viene utilizzato per la ricostruzione del legamento. Anche se gli alti tassi di successo possono essere realizzati sia con autologo e allogenico sostituzione, gravi complicanze sono associa....
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Protocollo
NOTA: Tutti gli interventi chirurgici su animali sono stati approvati dal personale e veterinaria comitato uso locale prima di iniziare gli esperimenti.
1. Preparazione di elettrofilate policaprolattone Ponteggi
- Pesare e sciogliere estere grado medicale poli terminato (ε-caprolattone) in granuli in 1,1,1,3,3,3-esafluoro-2-propanolo per creare un 10% w / w soluzione del polimero PCL. Lasciate che il mescolare soluzione con un piatto mescolare per almeno 3 ore per garantire una soluzione omogenea.
- Electrospin la soluzione PCL per creare un bracciale di fibre PCL altamente allineati per ponteggio fabbricazione.
- ....
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Risultati
Nella nostra esperienza di 92 interventi chirurgici di ratto da un singolo chirurgo, tempo medio operatorio dall'incisione al completamento della ferita era 16,9 min, con una deviazione standard di 4,7 min. Al momento del sacrificio, ratti pesati 356 ± 23 g. Tutti i ratti hanno tollerato la chirurgia bene, e con esperienza senza complicazioni. Subito dopo l'intervento chirurgico, i ratti sono stati notati a sopportare il peso sull'estremità operativa, ma hanno mostrato una leggera zoppia. Di una settimana do.......
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Discussione
Lesioni ACL sono una condizione comune in chirurgia ortopedica sportiva, con opzioni limitate per la ricostruzione, al momento presente. Per sviluppare un sostituto tissutale appropriate per LCA che permetterà la rigenerazione in vivo, è necessario un modello animale adatto. In questo studio, la realizzazione di un innesto ingegnerizzato biodegradabile è descritto, così come il suo impianto in vivo utilizzando un modello riproducibile di ricostruzione del LCA in ratti atimici. Questo modello può essere.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.
Ringraziamenti
Gli autori desiderano ringraziare Gabriel Arom e Michael Yeranosian per i loro contributi tecnici alla iterazioni precedenti di questo progetto. Questo progetto è stato finanziato dalla OREF Clinico Scientist Training Grant (NL), HH Lee Surgical Research Grant (NL), Veterans Administration BLR & D Merit recensione 1 I01 BX00012601 (DM) e muscoloscheletrico Trapianto Foundation Young Investigator Award (FP).
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Polimero medical grade a terminazione esterea di poli(ε-caprolattone), forma granulare (PM = 110.000) |  Lactel Absorbable Polymers | Polimero sintetizzato su misura al peso molecolare desiderato | |
| 1,1,1,3,3,3-esafluoro-2-propanolo | Sigma-Aldrich | 105228 | Solvente per polimero PCL |
| Ago bevel 18 G x 1½" | BD Medical | 305196 | |
| Pompa per siringa programmabile per infusione/estrazione remota | Harvard Apparatus | 702101 | |
| VersaLaser VLS2.30 Incisore laser | Microgeo USA | VLS2.30 | |
| Pulitore al plasma espanso 115 V | Harrick Plasma | PDC-001 | Marcatura al plasma appena prima del rivestimento con collagene per la modifica della superficie |
| Soluzione standard di collagene PureCol, 3 mg/ml | Advanced Biomatrix | 5015-A | Preparare una soluzione 8:1:2,5 di PureCol, PBS 10x e NaOH 0,1 N 1:9 in PBS 1x |
| Chirurgica riassorbibile, 5-0 Vicryl | Henry Schein | 1086471 | |
| Chirurgica riassorbibile, 4-0 Vicryl | Henry Schein | 6540072 | |
| Forbici anatomiche a punta acuta (dritte; 4,5 pollici) | Fisher Scientific | 8940 | |
| Cloridrato di buprenorfina | Sigma-Aldrich | B9275 | Utilizzare 0,03 mg/kg sia intraoperatoriamente che postoperatoriamente per il controllo del dolore |
| Ampicillina, iniettabile | Henry Schein | 1185678 | Utilizzare 25 mg/kg per via sottocutanea durante la procedura |
| Pin di Kirschner, 1,6 mm | Spectrum Surgical | SI040062 | |
| Ago di Keith, dritto 1½" | Delasco Dermatology Lab & Supply | KE-112 | |
| Soluzione decalcificante Immunocal | Fisher Scientific | NC9491030 | |
| Cemento osseo in resina acrilica Opticryl (PMMA) (monomero e polimero) | US Dental Depot | OPTICRYL 100410 | |
| Macchina per prove di trazione Instron Modello 5564 | Instron | 5564 | Qualsiasi apparecchiatura per prove di trazione comparabile è adatta |
Riferimenti
- Fetto, J. F., Marshall, J. L. The natural history and diagnosis of anterior cruciate ligament insufficiency. Clin Orthop Relat Res. (147), 29-38 (1980).
- Kim, Y. M., Lee, C. A., Matava, M. J. Clinical results of arthrosco....
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Ristampe e permessi
