La diffusione metastatica del cancro è la principale causa di decessi correlati al cancro. Forniamo una descrizione approfondita della nostra metodologia chirurgia sopravvivenza per stabilire un modello di sistema ortotopico singenici mouse "paziente-tipo" per lo studio dei meccanismi di metastatizzazione dei tumori di organi solidi.
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Articolo metodologico
A "paziente-Like" ortotopico Singenico modello murino della carcinoma epatocellulare Metastasi
In questo articolo
Sommario
Abstract
La maggior parte dei decessi correlati al cancro sono causati dalle metastasi del cancro piuttosto che dal tumore primario stesso. Tuttavia, i meccanismi alla base delle metastasi tumorali non sono ancora chiari. I modelli animali sono essenziali per chiarire i meccanismi e per valutare nuove strategie per il trattamento dei tumori metastatici. Qui viene fornita una descrizione approfondita di un modello murino singenico ortotopico "paziente-simile" per esplorare i meccanismi di metastasi dei tumori degli organi solidi. Viene descritto l'impianto chirurgico di sopravvivenza di cellule di carcinoma epatocellulare di topo BNL 1ME A.7R.1 direttamente nel fegato (l'organo di origine) del ceppo di topo di laboratorio immunocompetente di tipo selvatico consanguineo, BALB/c. Il successo e la riproducibilità di questa metodologia ne raccomandano un uso diffuso per chiarire i meccanismi biologici delle metastasi del cancro degli organi solidi.
Introduzione
Il carcinoma epatocellulare (HCC) è uno dei tumori più letali, con prognosi infausta e bassa aspettativa di vita. Quasi tutti i decessi correlati al cancro sono dovuti alla diffusione metastatica della malattia dall'organo di origine ad altri organi distanti2-6. La progressione dell'HCC è un processo complesso. Pertanto, essere in grado di modellare il microambiente tumorale che si trova naturalmente nell'HCC metastatico in modelli animali può rivelarsi un modo efficace e utile per rivelare meccanismi rilevanti nell'uomo. 7Sfortunatamente, i meccanismi delle metastasi del cancro sono ancora in gran parte poco chiari. Pertanto, è necessario stabil....
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Protocollo
Etica Dichiarazione
Tutti gli studi sugli animali sono stati approvati dalla cura e l'uso Comitato istituzionale animali (IACUC) di Hunter College della City University di New York.
Nota: Otto topi BALB / c sono stati usati in questa procedura sperimentale. Cinque topi BALB / c sono stati impiantati con 5 x 10 6 BNL 1ME A.7R.1 topo cellule di carcinoma epatocellulare per produrre i tumori primari. Tre topi BALB / c senza implantologia sono stati utilizzati come controlli. BNL 1ME A.7R.1 è una linea di cellule murine carcinoma epatocellulare che è stato derivato per trasformazione chimica dal murino n....
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Risultati
Il fegato dei topi Balb / c sono stati impiantati con 5 × 10 6 BNL 1ME A.7R.1 cellule del mouse HCC. L'evidenza clinica di sviluppo HCC era osservabile 63 giorni dopo l'intervento. Di conseguenza, i topi sono stati umanamente eutanasia. Necroscopia è stata effettuata su topi eutanasia. I polmoni e il fegato sono stati asportati e un esame attento lordo è stata effettuata per identificare i tumori macroscopiche. In un mouse, un tumore superficiale è stata osservata sulla superficie del fegato con qualc.......
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Discussione
In questo articolo viene fornita una descrizione approfondita del metodo che è stato recentemente riportato da Ogunwobi e colleghi di successo creazione di un modello di topo singenici ortotopico di HCC metastasi (Figura 2) 3. Il tasso di tumori per questa procedura è generalmente elevata. Abbiamo già osservato un tasso di tumore al 100% 3. Tuttavia, il tasso di utilizzo può essere variabile a seconda della competenza del ricercatore. In un recente esperimento condotto da un nuovo .......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.
Ringraziamenti
Vorremmo ringraziare Pascal DuBois per aver corretto le bozze dell'articolo. Gli autori desiderano anche ringraziare il personale dell'Animal Facility dell'Hunter College della City University di New York. Questo lavoro è stato sostenuto da una sovvenzione NIH RCMI all'Hunter College.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Pinzetta per micro dissezione | Roboz | (RS-5040) | Punta 0,20 x 0,12 mm |
| Graefe Micro Dissecting Pincips, punta curva seghettata | Roboz | (RS-5111) | 1 X 2 denti, larghezza punta curva 0,6 mm |
| Micro Divaricatore per dissezione-Agricola (3 per 3 rebbi) | Roboz | (RS-6501) | Smussato 3 X 3 rebbi, profondità 4 mm, apertura 25 mm |
| Micro Divaricatore per dissezione-Goldstein (3 per 3 rebbi) | Roboz | (RS-6503) | Smussato, 3 x 3 rebbi, profondità 4 mm, apertura 19 mm |
| Calibro Jameson (misura i tumori) | Roboz | (RS-6466) | scala 80 mm/3 pollici, cromato |
| Forbici per micro dissezione, grandi ansori ad anello, lame diritte e affilate | Roboz | (RS-5852) | 23 mm, lunghezza 4 pollici, gambi piatti e anelli grandi |
| Bisturi con lame, per delicate procedure di dissezione | Roboz | (RS-9861-36) | |
| Manico per bisturi | Roboz | (RS-9884) | |
| Solid Littauer Stitch Sissors | Roboz | (RS-7074) | Lunghezza 4,5 pollici |
| Porta aghi marrone, per una facile legatura della sutura | Roboz | (RS-7960) | Mascella convessa, dentellature fini |
| Clip per ferite reflex da 7 mm con applicatore di clip reflex 7 | Roboz | (RS-9262) | metodo alternativo sicuro e sicuro per la chiusura della ferita |
| Vassoio per strumenti e coperchio | Roboz | RT-1350S | |
| Mini-clipper con lama staccabile | Roboz | (RS-5903) | |
| Germinator 500 (il Germ Terminator) Sterilizzatore a secco | Roboz | Ds-400, Ds-401, DS-501 | Per la decontaminazione rapida degli strumenti di micro-dissezione. Gli strumenti decontaminano entro 15 sec. |
| Aghi per microiniezione | VWR | BD305125 | 25G Ago |
Riferimenti
- Sheng, W., et al. Capture, release and culture of circulating tumor cells from pancreatic cancer patients using an enhanced mixing chip. Lab on a Chip. 14, 89-98 (2014).
- Ogunwobi, O. O., Liu, C.
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Ristampe e permessi
