Presentiamo un test olfattivo semplice e imparziale nei topi. Con questo protocollo la discriminazione olfattiva, la preferenza, l'evitamento e la sensibilità a un nuovo odore rispetto all'acqua possono essere valutati in singole sessioni comportamentali. Questo metodo è indicato per un singolo sperimentatore e l'analisi si basa sull'elaborazione video assistita da computer.
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Articolo metodologico
Semplice e assistita da computer Olfattivo Test per Mice
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'olfatto è altamente conservata tra le specie ed è necessario per la riproduzione e la sopravvivenza.
Negli esseri umani, l'olfatto è anche uno dei sensi che viene colpito con l'invecchiamento ed è un forte predittore di malattie neurodegenerative. Così, test olfattivo è usato come un metodo diagnostico non invasivo per rilevare deficit neurologici presto. Al fine di comprendere i meccanismi alla base olfattiva suscettibilità rete, ricerca olfattiva nei roditori ha preso slancio negli ultimi dieci anni.
Qui, presentiamo un metodo semplice, efficiente e riproducibile test olfattivo tempo di percezione dell'odore innata e sensibilità nei topi senza la necessità di qualsiasi restrizione cibo o acqua prima. I test vengono eseguiti in un ambiente familiare per i topi, richiedono solo i profumi e 2 minuti a sessione di esposizione odorizzante. Viene eseguita l'analisi post-hoc, utilizzando i comandi del computer-assistita in ImageJ e può essere, quindi,, Effettuata dall'inizio alla fine da un ricercatore.
Questo protocollo non richiede alcun hardware o configurazione speciale ed è indicato per qualsiasi laboratorio interessati a testare percezione olfattiva e sensibilità.
Introduzione
Olfatto è una delle funzioni sensoriali più sviluppate ed importanti nei mammiferi. Qualsiasi riduzione di valore di attività olfattiva possono influenzare l'assunzione di cibo, comportamento sociale e, nel peggiore dei casi, anche la sopravvivenza. Negli esseri umani, il deterioramento olfattivo è l'età dipendente 1 ed è considerato un forte predittore di disturbi neurologici 2-6. Il test di identificazione olfattiva sviluppato dalla University of Pennsylvania rappresenta attualmente uno dei più utilizzati, non invasive e quantificabili, test diagnostici che possono valutare i primi deficit neurologici 7 e prevedere con eleva....
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Protocollo
Tutte le procedure di animali sono in conformità con la Direttiva UE 2010/63 / UE sulla protezione degli animali utilizzati a fini scientifici e sono approvati dalla locale comitato Animal Care (Cantone di Friburgo, Svizzera).
1. Preparazione degli animali
- Animali da esperimento
- Effettuare esperimenti su wild type maschio adulto e topi transgenici (C57BL / 6 di fondo) di 3-5 mesi di età. I tre gruppi di topi corrispondono a controlli di tipo littermate selvatici (gruppo A, Jagged1 flox / flox 19) e due linee del mouse condizionali KO (gruppo B, e C Jagged1ncKO, Jagged1gcKO).
- Topi Camera in condizio....
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Risultati
Il test misura la percezione attrazione di burro di arachidi e di evitare di acido 2-MB. Tre gruppi di topi sono testati e il tempo trascorso in "odore perimetrale" vengono quantificati rispetto all'acqua. Nel test di preferenza, il gruppo di controllo A visualizza preferenza significativa per l'odore rispetto all'acqua (t 8 = 2.52, p <0,05). D'altra parte, il gruppo B non mostra alcuna attrazione significativa al burro di arachidi e passa più tempo con acqua (6 t = 3.2.......
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Discussione
I test proposti in questo protocollo permette di valutare diversi aspetti del comportamento olfattivo innato nei topi: percezione di odori, di discriminazione tra gli odori contro l'acqua e la sensibilità agli odori. Questo protocollo può essere applicato a qualsiasi odore secondo la preferenza e la scala evitamento precedentemente dimostrato 15. Poiché il protocollo si basa sull'attività esplorativa è importante che i topi non presentano deficit motori o ansia che possono influenzare il loro moviment.......
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Dichiarazioni
Non vi è alcun conflitto di interessi.
Ringraziamenti
Questo lavoro è finanziato dalla Fondazione Nazionale Svizzera (31_138429) e dalla Fondazione Synapsis per il sostegno alla ricerca sul morbo di Alzheimer.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Gabbia per topi | Italplast (Italia) | 1144B | 36 cm di lunghezza x 20,5 cm di larghezza x 13,5 cm di altezza |
| Lettiera in legno scheggiato | Abedd (Austria) | LTE E-001 | 3 cm di altezza |
| Burro di arachidi | Migros (Svizzera) | NA | 1:10 |
| 2-Metilbutirrico | Sigma Aldrich (Svizzera) | W269514 | |
| Pura urina femminile proveniente da femmine fertili dello stesso ceppo di topo | NA | NA | Dilution series |
| Camera | Olympus (US) | MOV | Camedia C-8080 |
| Quicktime per Java (Windows) | Apple (USA) | NA | plugin video per la visualizzazione di file MOV |
| ImageJ per Windows | NIH (USA) | NA | Elaborazione/Analisi video |
Riferimenti
- Doty, R. L., Kamath, V. The influences of age on olfaction: a review. Cognitive Science. 5, 20(2014).
- Mesholam, R. I., Moberg, P. J., Mahr, R. N., Doty, R. L. Olfaction in neurodegenerative disease: a meta-analysis of o....
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Ristampe e permessi
