Determinazione Preferenze ultrasuoni vocalizzazione nei topi utilizzando un test di riproduzione a due scelta

Summary

Le vocalizzazioni ultrasoniche (USV) nei topi differiscono a seconda dell'età, del sesso, della condizione e del background genetico. Utilizzando due emettitori di ultrasuoni che trasmettono simultaneamente in luoghi diversi, questo test a due scelte può valutare il riconoscimento murino e le risposte delle preferenze a diverse caratteristiche degli USV.

Abstract

I topi emettono vocalizzazioni ultrasoniche (USV) durante una varietà di condizioni, come l'isolamento dei cuccioli e le interazioni sociali degli adulti. Questi USV differiscono per età, sesso, condizione e background genetico dell'animale emittente. Sebbene molti studi abbiano caratterizzato queste differenze, resta da chiarire se i topi riceventi siano in grado di discriminare tra USV oggettivamente diversi e mostrare preferenze per particolari tratti sonori. Per determinare se i topi possono discriminare tra le diverse caratteristiche degli USV, è stato recentemente sviluppato un esperimento di riproduzione, in cui le risposte di preferenza dei topi a due diversi USV potrebbero essere valutate sotto forma di preferenza di luogo.

Innanzitutto, sono stati registrati gli USV dei topi. Quindi, gli USV registrati sono stati modificati, tagliati di conseguenza ed esportati come file audio stereofonici. Successivamente, le ampiezze USV generate dai due emettitori di ultrasuoni utilizzati nell'esperimento sono state regolate allo stesso livello di pressione sonora. Gli emettitori termoacustici in silicio nanocristallino sono stati utilizzati per riprodurre gli USV. Infine, per studiare la preferenza dei topi soggetti rispetto agli USV selezionati, coppie di due diversi segnali USV sono state riprodotte simultaneamente in una scatola di test a due scelte. Entrando ripetutamente in una zona definita vicino a un emettitore di ultrasuoni e cercando la rete metallica davanti all'emettitore, il mouse rivela la sua preferenza per un suono rispetto a un altro. Questo modello consente di confrontare l'attrattiva delle varie caratteristiche degli USV di topo, in vari contesti.

Introduction

Molti animali usano vocalizzazioni per la comunicazione intraspecifica. Nel topo Mus musculus, uno importante tipo di segnale di comunicazione è vocalizzazioni ultrasoniche (USV), che hanno frequenze superiori a 20 kHz. USV emessi dai topi sono considerati una componente di riconoscimento sociale in maschio-femmina ^1-4, femmina-femmina ^{1, 5,} e maschio-maschio ^{1, 6} interazioni. USV vengono emessi anche da cuccioli quando sono isolate dalla loro madre, che aumenta il suo comportamento-pup recupero, e di conseguenza la sopravvivenza Pup ^7. Anche se molti studi hanno analizzato e classificato USV del mouse ^{8, 9,} le r....

Protocol

Tutte le procedure sono state approvate dal Comitato Etico di Azabu University. Tutti gli esperimenti sono stati eseguiti in una camera insonorizzata.

1. Preparazione degli animali

1. Maschi per la registrazione
   1. Ottenere topi maschi sessualmente maturi esperienza in accoppiamento.
2. Soggetti di sesso femminile
   1. Ottenere vergine topi femmina che hanno ospitato da 2 a 5 fratellini per gabbia (di solito 8 - 12 settimane).
   2. Ottenere striscio vaginale giornaliero per determinare la fase del ciclo estrale prima della prova, secondo McLean ^21. Si deve prestare attenzione a ridurre al....

Results

I USV registrate da un topo BALB-maschio (161 sillabe per 20 sec), così come rumore di fondo sono stati utilizzati come riprodurre suoni nell'esperimento rappresentante illustrato nella figura 3. In questo esperimento, 7 topi B6 femminili sono stati usati a 9 settimane di età . Per determinare la migliore durata della prova della risposta femminile di riproduzione suoni, i parametri comportamentali sono state analizzate separatamente per i primi e gli ultimi cinque minuti del tempo di collaudo totale 10.......

Discussion

Qui, i risultati di un test rappresentativo hanno mostrato che i topi femmina possono discriminare tra USV maschi artificiali e rumore di fondo (Figura 3). La conclusione che si può trarre da questi risultati è che il segnale di discriminazione si riflette nella durata della permanenza nella stanza e nella zona sonora, e nella durata della ricerca della rete nei primi 5 minuti di test, ma non nei secondi 5 minuti (Figura 3C, E e F). Questi dati indicano che i topi si abituano ai suoni di.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Camera insonorizzata	Muromachi Kikai
Gabbia piccola	CLEA Japan	CL-0113-1
Gabbia centrale	CLEA Japan	CL-0103-1
Microfoni a condensatore ad ultrasuoni	Avisoft Bioacoustics	CM16/CMPA
Convertitore A/D	Avisoft Bioacoustics	UltraSoundGate116H
Audio software	Avisoft Bioacoustics	RECORDER USGH
Adobe Audition 3.0 / Software di editing audio	Adobe	Systems Adobe Audition 3.0
Emettitore Nc-Si	Originale		non disponibile in commercio ma si prevede di esserlo nel prossimo futuro
Convertitore D/A	National Instruments	NI USB-6251 BNC
Attenuator	Original
Amplificatore	Yamatake
PC	Windows 7 professionale		Intel® core i7-2600K CPU @ 3.4GHz, 8GB RAM, sistema operativo a 64 bit
Registratore di eventi Excel-macro / Software di punteggio	di eventi originale		Programmato da Naoto Akagawa & Takeru Yamamoto
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