Articolo metodologico
Il latte è una fonte primaria di nutrimento per il neonato. L'analisi dei componenti del latte può fornire informazioni sui fattori materni che influenzano la salute della prole. Questo protocollo descrive un metodo manuale per raccogliere campioni di latte dal ratto in allattamento, che possono quindi essere utilizzati per ulteriori analisi a valle.
Il latte, come unica fonte di nutrimento per il mammifero appena nato, fornisce i nutrienti e l'energia necessari per la crescita e lo sviluppo della prole. Contiene anche un vasto numero di composti bioattivi che influenzano notevolmente lo sviluppo del neonato. L'analisi dei componenti del latte aiuterà a chiarire i fattori chiave che collegano il metabolismo e la salute materna con la crescita e lo sviluppo della prole. Il ratto da laboratorio rappresenta un popolare organismo modello per gli studi materni e il latte di ratto può essere utilizzato per esaminare l'effetto di vari interventi fisiologici, nutrizionali e farmacologici materni sui componenti del latte, che possono quindi avere un impatto sulla salute della prole. Qui viene descritto un semplice metodo di raccolta manuale del latte dal ratto in lattazione, che può essere eseguito da un singolo investigatore, non richiede attrezzature specializzate per il vuoto o l'aspirazione e fornisce latte sufficiente per la successiva analisi a valle. Viene inoltre presentato un metodo per stimare il contenuto di grassi del latte misurando la percentuale di panna all'interno del campione di latte, noto come creamatocrito. Questi metodi possono essere utilizzati per aumentare la comprensione della salute materno-infantile e per chiarire i fattori materni che sono coinvolti nella corretta crescita e sviluppo della prole.
Il latte è l'unica fonte di nutrimento per i mammiferi neonati, fornendo energia e nutrienti per la crescita infantile e lo sviluppo 1,2. Mentre il latte è composto principalmente da cellule, lipidi e proteine 1, contiene anche una pletora di composti bioattivi che modulano lo sviluppo primi anni di vita della prole compresi gli enzimi, carboidrati, ormoni, anticorpi, fattori di crescita, citochine, esosomi, microvescicole, e piccoli RNA tali come microRNA 1,2. Il ruolo fondamentale del latte materno nello stabilimento della prole immunitario e la salute intestinale 3, insieme con la prova che allattati al seno i neon....
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Questo protocollo è stato approvato dalla University of Calgary Comitato cura degli animali e conforme alla Guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio.
1. Diga separato da Offspring
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Il latte è stato raccolto come descritto allo svezzamento da dighe Wistar (circa 22 settimane di età, peso 350 a 400 g) che consuma un controllo (AIN-93G, n = 5), ad alto contenuto proteico (40% di caseina peso / peso, n = 5) , o di fibre prebiotiche (21,6% peso / peso, rapporto 1: 1 di oligofruttosio e l'inulina, n = 4) dieta durante la gravidanza e l'allattamento. La dose di ossitocina era 2 UI. Il latte è stato raccolto in provette capillari, e un tubo è stato filato usando un filatore ematocrito per determin.......
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Le indagini sui componenti del latte materno sono aumentate con l'aumento dell'interesse per la ricerca sullo sviluppo delle prime fasi della vita. Essendo l'unica fonte di nutrimento durante il periodo neonatale, i composti bioattivi del latte sono essenziali per la crescita e lo sviluppo ideali, soprattutto nel contesto della salute intestinale e immunitaria3. Il metodo qui presentato è un metodo semplice e non invasivo per raccogliere il latte dal ratto in allattamento in quantità sufficienti per l'analisi .......
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Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare. Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati condotti secondo protocolli approvati CCAC.
Funziona questo è stato sostenuto attraverso sovvenzioni dal scienze naturali e ingegneria Research Council del Canada (RGPIN 238382-2011) e Canadian Institutes of Health Research (MOP115076). Heather Paul è stato sostenuto da una borsa di studio post-laurea scienze naturali e ingegneria Research Council del Canada e una borsa di studio Alberta innova Health Solutions. Megan Hallam è stato sostenuto da un scienze naturali e ingegneria Research Council Postgraduate borse di studio, una borsa di studio Frederick Banting e Charles Best Canada laureato e premio un bambini Alberta Hospital Research Training Institute in Genetica, Child Development, e la salute.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Equipment - Mungitura | |||
| 1 ml siringhe | BD-Canada | 309602 | |
| aghi da 25 g | BD-Canada | 305122 | |
| aghi da 18 g | BD-Canada | 305196 | |
| 50 &; l Microdispenser Provette capillari | Fisher Scientific | 21-169D | |
| Ossitocina (20 unità USP/ml) | Bimeda-MTC | 1OXY015 | |
| PPC Vet Isoflurano Anestetico per inalazione, 250 ml | Fresenius Kabi | M60302 | Utilizzato su prescrizione di un veterinario |
| Tampone sterile per la preparazione dell'alcol | Dukal | 853 | |
| Sottobanco assorbente | VWR | 82020-845 | |
| Maxi-Therm Coperta per iper/ipotermia | Cincinnati Sub-Zero | 274 | |
| Macchina per anestesia per roditori con vaporizzatore | Benson Medical Industries Inc. | In base alle esigenze individuali del laboratorio | |
| : Maschere per animali | Benson Medical Industries, Inc. | 50100/50102 | |
| Provette per microcentrifuga | Axygen | MCT-060-C | |
| ChroMini Rifinitore professionale | Wahl | ||
| Equipment - Creamatocrit | |||
| StatSpin SafeCrit Provette per microematocrito in plastica (non trattate) | Fisher Scientific | 22-274-914 | |
| Critoseal Vassoio sigillante per tubi capillari | VWR | 470161-478 | |
| Centrifuga per microematocrito StatSpin CritSpin | Beckman Coulter, Inc | X00-004999-001 |
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