Viene presentata la caratterizzazione dei complessi formati in diversi rapporti relativi di mercurio (II) e dicicesteinil tetrapeptidi mediante spettrometria di massa orbitrap a ionizzazione elettrospray.
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Articolo metodologico
Uno studio della Complessazione di Mercurio (II) con Dicysteinyl Tetrapeptidi da Electrospray ionizzazione Spettrometria di Massa
In questo articolo
Sommario
Abstract
In questo studio abbiamo valutato un metodo per la caratterizzazione di complessi, formati in diversi rapporti relativi di mercurio(II) e dicicesteinil tetrapeptide, mediante spettrometria di massa orbitrap a ionizzazione elettrospray. Questa strategia si basa su una precedente caratterizzazione di successo di complessi mercurio-dicicesteinil che coinvolgono tripeptidi utilizzando la spettrometria di massa tra le altre tecniche. Il cloruro di mercurio(II) e un dicicisteinil tetrapeptide sono stati incubati in un terreno tamponato degassato a rapporti stechiometrici variabili. I complessi formati sono stati successivamente analizzati su uno spettrometro di massa elettrospray costituito da un analizzatore di massa ibrido lineare a trappola ionica e orbi. Gli spettri della spettrometria di massa a ionizzazione elettrospray (ESI-MS) sono stati acquisiti in modalità positiva e i picchi osservati sono stati quindi analizzati per individuare i distinti modelli di distribuzione isotopica del mercurio e il picco monoisotopico associato. Questo lavoro dimostra che un'accurata stechiometria del mercurio e del peptide nei complessi formati in specifiche condizioni di ionizzazione elettrospray può essere determinata utilizzando ESI MS ad alta risoluzione basata su distinti modelli di distribuzione isotopica del mercurio.
Introduzione
Gli attuali farmaci clinici prescritti per la terapia chelante dell'avvelenamento da mercurio1 contengono gruppi tiolici, che sono responsabili del legame e del sequestro degli ioni mercurio2,3. Tuttavia, gli studi hanno dimostrato che questi piccoli composti tiolici [acido dimercaptosuccinico (DMSA) e acido dimercaptopropano-solfonico (DMPS)] non sono ottimali per la terapia chelante del mercurio4-6. Pertanto, è necessario comprendere l'associazione e le tendenze di formazione complessa del mercurio con i tioli per migliorare la progettazione razionale dei farmaci dei composti tiolici per la chelazione del mercurio. Recentemente, a....
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Protocollo
Nota: Si prega di consultare tutte le schede di sicurezza pertinenti (MSDS) prima dell'uso. Cloruro di mercurio è una sostanza chimica tossica. Dispositivi di protezione individuale (guanti, occhiali di sicurezza, e camice) devono essere indossati al momento della consegna e tutte le soluzioni collegate. Smaltire le soluzioni in bottiglie rifiuti chimici chiaramente etichettati designate per i metalli pesanti.
1. Preparazione di 5 mm degassificato ammonio formiato tampone, pH 7,5
- Sciogliere 0,1576 g di buffer di formiato di ammonio in 450 ml di acqua per HPLC. Regolare il pH della soluzione sopra con 1 M di acido formico e ....
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Risultati
Uno studio è stato effettuato per caratterizzare l'eventuale mercurio peptide complessa composizione per due tetrapeptidi, CGGC e PECO (Figura 1) mediante spettrometria di massa ESI. Complessi di mercurio (II) con CGGC o PECO sono stati studiati facendo reagire le miscele di mercurio (II) e soluzioni di peptidi a tre differenti rapporti molari: 1: 0.5, 1: 1 e 1: 2 (mercurio (II): peptide) . La concentrazione di mercurio (II) era 7,5 x 10 -6 M e la co.......
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Discussione
Il dicysteinyl tetrapeptide idrofoba CGGC (C 10 H 18 N 4 O 5 S 2; PM = 338) (Figura 1), forma complessi con mercurio (II) come mostrato in Figura 2 e Tabella 1 Inoltre, forma dimeri peptidici e trimeri. incrementale come aumenta la quantità di peptide nella miscela di reazione. Come mostrato dai valori m / z dei dimeri associati [(2M + H) + = 677] e trimeri [(3M + H) + = 1.015].......
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Dichiarazioni
Non vi è alcuna divulgazione per il lavoro riportato.
Ringraziamenti
MN-S riconosce il sostegno della National Science Foundation, RUI concedere CHE 1011859. Gli autori ringraziano lo strumento Triade Spettrometria di Massa presso la University of North Carolina a Greensboro per l'uso del spettrometro di massa Thermo Fisher Scientific LTQ Orbitrap XL. Gli autori ringraziano Daniel Todd, Vincenzo Sica, e Brandie Erhmann presso la University of North Carolina a Greensboro per utili suggerimenti e commenti questo lavoro.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Cloruro di mercurio (II) | Sigma-Aldrich | 429724 | |
| Formiato di ammonio | Sigma-Aldrich | 516961 | |
| Acido formico | Sigma-Aldrich | F0507 | |
| Idrossido di ammonio | Fisher | A512-P500 | |
| Acqua HPLC | Fisher | W5-4 | |
| HPLC Acetonitrile | Fisher | BP2405-1 | |
| HPLC Pescatore di metanolo | A452-4 |
Riferimenti
- Clifton, J. C. Mercury exposure and public health. Pediatr. Clin. N. Am. 54, 237-269 (2007).
- Andersen, O. Principles and Recent Developments in Chelation Treatment of Metal Intoxication. Chem. Rev. 99, 2683-2710 (1999).
- Aposhian, H. V., Maiorino, R. M., Gonzal....
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Ristampe e permessi
