L'epitelio pigmentato retinico (RPE) supporta la retina sensoriale attraverso il riciclaggio dei sottoprodotti del ciclo visivo, che si accumulano sotto forma di lipofuscina. Questi prodotti sono autofluorescenti e possono essere visualizzati qualitativamente in vivo. Qui, descriviamo un metodo per visualizzare quantitativamente la lipofuscina RPE utilizzando l'oftalmoscopia laser a scansione confocale.
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Articolo metodologico
Quantitative Fundus autofluorescenza per la valutazione delle patologie retiniche
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'epitelio pigmentato retinico (RPE) è giustapposto alla retina sensoriale sovrastante e supporta la funzione del sistema visivo. Tra i compiti svolti dall'RPE vi sono la fagocitosi e l'elaborazione dei segmenti fotorecettori esterni attraverso organelli derivati dai lisosomi. Questi prodotti di degradazione, conservati e indicati come granuli di lipofuscina, sono composti parzialmente da bisretinoidi, che hanno ampi spettri di assorbimento ed emissione della fluorescenza che possono essere rilevati clinicamente come autofluorescenza del fondo oculare con oftalmoscopia laser a scansione confocale (cSLO). L'accumulo di lipofuscina è associato all'avanzare dell'età, ma si trova anche in vari modelli nelle malattie degenerative della retina sia acquisite che ereditarie. Pertanto, studiare il suo modello di accumulo e correlare tali modelli con i cambiamenti nella retina sensoriale sovrastante è essenziale per comprendere la fisiopatologia e la progressione della malattia retinica. Qui, descriviamo una tecnica impiegata dal nostro laboratorio e da altri che utilizza il cSLO per quantificare il livello di RPE lipofuscina sia negli occhi sani che in quelli malati.
Introduzione
L'epitelio pigmentato retinico (RPE) supporta la funzione della retina sensoriale attraverso numerosi processi 1. Età degenerazione maculare (AMD) è la causa più importante di cecità incurabile nei paesi industrializzati ed è caratterizzata da cambiamenti nella RPE, tra cui la perdita di pigmento, perdita della funzione e atrofia. In AMD ed in normale invecchiamento, l'RPE accumula fluorescenti, organelli lisosomi-derivati contenenti frammenti di fotorecettori fagocitati, di cui come granuli di lipofuscina. L'accumulo di RPE lipofuscina è stato pensato per indicare ossidativo disfunzioni 1, ma recenti studi hanno dimostrato che la ....
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Protocollo
Etica Dichiarazione: Tutti i pazienti arruolati in questi studi sono stati fatti così in conformità approvato revisione istituzionale di Vigilanza presso la New York University School of Medicine.
1. selezione dei pazienti e preparazione iniziale per l'imaging
Nota: Sono necessari i seguenti materiali: 0.5% soluzione oftalmica tropicamide, 2,5% soluzione oftalmica fenilefrina, cSLO dotato di dominio spettrale tomografia a coerenza ottica (SD-OCT), e il riferimento di fluorescenza interna.
- Prima di immagini, opportunamente istituito cSLO per l'acquisizione dei dati in base alle istruzioni del....
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Risultati
Questa tecnica è stata utilizzata per studiare QaF in entrambi i sani e 13 di malattia stati 10-12. In occhi sani (Figura 1), AF emessa dal RPE è distribuito in modo relativamente uniforme in tutto il fondo (Figura 1A). intensità ridotta è visto nella regione maculare centrale dovuto al blocco della luce da pigmento maculare, e ai lati ed angoli dell'immagine dovuto l'ottica dell'occhio e fotocamera. Vasi appaiono scure .......
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Discussione
Anormale distribuzione lipofuscina RPE, sia aumentato o diminuito, è un marcatore sensibile della malattia retinica ed è generalmente associata a perdita di funzione retina sensitiva. Qui, descriviamo l'applicazione di Qaf per la valutazione dei RPE lipofuscina. Costituzione di un riferimento fluorescente interna per correggere per la variabile potenza del laser e rilevatore di sensibilità 9 a fianco della nostra tecnica di imaging standardizzata consente una quantificazione affidabile dei livelli di AF. .......
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Dichiarazioni
STA: nessuna divulgazione, JPG: nessuna divulgazione, RTS: consulente, Ocata Therapeutics.
Ringraziamenti
Vorremmo ringraziare i nostri collaboratori, Francois Delori, Tomas Burke e Tobias Duncker.
Supporto di ricerca: NIH / NEI R01 EY015520 (RTS, JPG), e fondi disponibili da Research per prevenire la cecità (RTB).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Spectralis HRA + OCT | Heidelberg Engineering | ||
| oftalmica tropicale allo 0,5% | Qualsiasi marca può essere utilizzata | ||
| Soluzione | Qualsiasi marca può essere utilizzata | ||
| Riferimento fluorescente interno | Heidelberg Engineering | ||
| Software IGOR Pro | WaveMetrics |
Riferimenti
- Strauss, O. The retinal pigment epithelium in visual function. Physiological reviews. 85, 845-881 (2005).
- Ach, T., et al. Quantitative autofluorescence and cell density maps of the human retinal pigment epithelium. In....
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Ristampe e permessi
