Questo manoscritto descrive un protocollo dettagliato per la raccolta di dati pressione-volume dal mouse.
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Articolo metodologico
Misurazione Loops Volume Pressione nel mouse
In questo articolo
Sommario
Abstract
Comprendere le cause e la progressione della malattia di cuore rappresenta una sfida significativa per la comunità biomedica. La flessibilità genetica del mouse fornisce un grande potenziale per esplorare funzione cardiaca a livello molecolare. Le ridotte dimensioni del mouse non presentare alcune sfide per quanto riguarda l'esecuzione di fenotipizzazione cardiaca dettagliata. La miniaturizzazione e altri avanzamenti nella tecnologia hanno fatto molti metodi di valutazione cardiaca possibile nel topo. Di questi, la raccolta simultanea di dati di pressione e di volume fornisce un quadro dettagliato della funzione cardiaca che non è disponibile attraverso qualsiasi altra modalità. Qui una procedura dettagliata per la raccolta di pressione-volume di dati loop è descritto. Incluso è una discussione dei principi alla base delle misure e le potenziali fonti di errore. anestesiologico e approcci chirurgici sono discusse in dettaglio in quanto sono entrambi fondamentali per ottenere la misura emodinamica di alta qualitàS. I principi dello sviluppo protocollo emodinamica e gli aspetti rilevanti di analisi dei dati sono anche indirizzati.
Introduzione
Le malattie cardiovascolari continua ad essere una causa importante di mortalità e morbilità in tutto il mondo 1. Malattie del cuore rappresentano sfide particolarmente difficili per lo sviluppo di nuove terapie. I progressi della genetica prevedono la possibilità di identificare una moltitudine di potenziali contributori genetici allo sviluppo di malattie cardiache. La natura integrativa del sistema cardiovascolare richiede che tali obiettivi genetici essere convalidati in modelli animali intatti. I costi genetici flessibilità e bassa abitative del mouse hanno portato alla ribalta per la valutazione del ruolo fisiologico di un dato gene. Le piccole dimens....
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Protocollo
Prima di eseguire le procedure descritte in questo protocollo, ottenere l'approvazione da parte del comitato cura degli animali e uso istituzionale locale.
1. Impostazione del Rig Sperimentale
Nota: Questa procedura viene eseguita su animali anestetizzati e la qualità dei dati è proporzionale alla qualità del sostegno offerto anestetico all'animale. Questo primo particolare sezione sarà l'attrezzatura e le procedure necessarie per fornire anestesia per il mouse durante l'esecuzione di questo protocollo.
- Selezionare un protocollo anestetico. anestetici inalatori hanno....
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Risultati
Per convenzione, volume viene tracciata sull'asse X e la pressione sul l'asse Y come in Figura 1. I cicli di pressione-volume risultanti dalla pressione tramato contro di volume deve essere simile a un rettangolo, i bordi verticali rappresentano variazioni isovolumic di pressione (vale a dire, quando entrambi valvole mitrale e aortica sono chiusi). Il orizzontale inferiore rappresenta riempimento ventricolare attraverso la valvola mitrale e la p.......
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Discussione
Ci sono tre passaggi critici di questa procedura: 1) il posizionamento del tubo endotracheale e ventilazione appropriata, 2) posizionamento del catetere IV giugulare, e 3) il corretto posizionamento del catetere PV nel ventricolo sinistro. Determinare la frequenza respiratoria appropriata è una parte importante di fornire un supporto ventilatorio. topi coscienti generalmente mantengono ventilazione alveolare con rapidi respiri. In generale, i topi ventilati avranno volumi correnti molto più grandi. Pertanto è richiesto .......
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Dichiarazioni
L'autore non ha nulla da rivelare.
Ringraziamenti
L'autore desidera ringraziare il finanziamento da NHLBI (K08 HL102066 e R01 HL114832).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Dumont 5/45 (2) | Fine Science Tools | 11251-33 | |
| Pinze dilatatrici per vasi Strumenti per | fini | 18153-11 | |
| Forbice a molla per micro dissezione Castroviejo | Roboz Instruments | RS-5668 | |
| Pinze ottagonali - Seghettate/curve | Strumenti per le scienze fini | 11041-08 | |
| Pinze ottagonali - Seghettate/Dritte | Fine Strumenti scientifici | 11040-08 | |
| Forbici per dissettore - Lama pesante | Strumenti per la scienza fine | 14082-09 | |
| Nastro chirurgico per traspore | 3M | 1527-1 | |
| 3-0 Sutura in seta | Strumenti per la scienza fine | 18020-30 | |
| Ventilatore TOPO | Kent Scientific | TOPO | |
| Martin ME 102 Unità elettrochirurgica | Apparecchio | HarvardPY2 72-2484 | |
| Pompa a siringa | Lucca Technologies | Stereomicroscopio GenieTouch | |
| con supporto a braccio | Nikon | SMZ-800N | |
| Termometro a termocoppia | Cole Parmer | EW-91100-40 | |
| T/Pump Ricircolatore d'acqua calda | Kent Scientific | TP-700 | |
| ADVantage Sistema pressione-volume | Transonic | ADV500 | |
| Acquisizione e Analisi Dati | DSI | Ponemah ACQ-16 |
Riferimenti
- Mozaffarian, D., et al. Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 131 (4), e29-e322 (2015).
- Katz, A. M. Influence of altered inotropy and lusitropy on ventricula....
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Ristampe e permessi
