Non restrittivo EEG radiotelemetria è un approccio metodologico valido per registrare in vivo elettroencefalogrammi a lungo termine dai roditori liberi di muoversi. Questo protocollo dettagliato descrive epidurale stereotassica e profondo posizionamento degli elettrodi intracerebrale in diverse regioni del cervello per ottenere registrazioni affidabili di CNS ritmicità e fasi comportamentali correlati CNS.
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Articolo metodologico
Non restrittivo EEG Radiotelemetry: epidurale e Deep intracerebrale Stereotassica EEG Posizionamento degli elettrodi
In questo articolo
Sommario
Abstract
Impiantabile EEG radiotelemetria è rilevante centrale nella caratterizzazione neurologica di modelli transgenici murini di malattie neuropsichiatriche e neurodegenerative, nonché epilessie. Questa potente tecnica non solo fornisce preziose informazioni sui meccanismi fisiopatologici alla base, vale a dire., L'eziopatogenesi delle malattie del sistema nervoso centrale connessi, facilita anche lo sviluppo di nuovi traslazionale, vale a dire., Approcci terapeutici. Mentre le tecniche di concorrenti che fanno uso di sistemi di registratore utilizzato in giacche o sistemi frenati soffrono di loro restrittivo non fisiologica a carattere semi-restrittivo, registrazioni EEG radiotelemetrico ovviare a questi inconvenienti. Tecnicamente, impiantabile EEG radiotelemetria consente la misurazione precisa e molto sensibile della EEG, intracerebrali epidurale e profonde in varie condizioni fisiologiche e fisiopatologiche. In primo luogo, vi presentiamo un protocollo dettagliato di un dritto in avanti, con successo,tecnica rapido ed efficiente per registrazioni epidurale (superficie) EEG conseguente electrocorticograms alta qualità. In secondo luogo, abbiamo dimostrato come impiantare profonde, elettrodi intracerebrali EEG, ad esempio, nell'ippocampo (electrohippocampogram). Per entrambi gli approcci, un sistema di elettrodi di impianto stereotassico 3D informatizzato. Il trasmettitore a radiofrequenza si è impiantato in una tasca sottocutanea in topi e ratti. Particolare attenzione deve anche essere pagato al pre-, peri- e post-operatorio trattamento degli animali da esperimento. Preparazione preoperatoria di topi e ratti, anestesia idonei nonché la gestione e il trattamento del dolore postoperatorio sono descritte in dettaglio.
Introduzione
Radiotelemetry è un approccio metodologico più prezioso per misurare vari parametri comportamentali e fisiologici in animali coscienti sfrenate di varie dimensioni, in particolare nel contesto di EEG, ECG, EMG, pressione sanguigna, temperatura corporea o misurazione dell'attività 1-7. Teoricamente, qualsiasi specie possono essere analizzati utilizzando impiantabile radiotelemetria EEG da roditori da laboratorio, come topi e ratti ai gatti, cani, maiali e primati 3,8. Anche i pesci, rettili e anfibi sono oggetto di indagine radiotelemetrico 9. Negli ultimi due decenni, impiantabile radiotelemetria EEG ha dimostrato di essere prezio....
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Protocollo
Etica Dichiarazione: Tutti sperimentazione animale è stata eseguita secondo le linee guida del Consiglio locale e istituzionale su Animal Care (Università di Bonn, BfArM, LANUV, Germania). Inoltre, tutti sperimentazione sugli animali è stata effettuata in conformità con la legislazione superiore, ad esempio., Della direttiva del Consiglio Comunità europee del 24 novembre 1986 (86/609 / CEE) o individuali legislazione regionale o nazionale. sforzo specifico è fatto per ridurre al minimo il numero di animali utilizzati e le loro sofferenze.
1. Gli animali sperimentali
- Selezione di animali da laboratorio e specie
- ....
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Risultati
Questa sezione illustra esempi ottenuti dalla superficie e, registrazioni EEG intracerebrali profonde. Inizialmente è opportuno precisare che le registrazioni di base in condizioni fisiologiche sono obbligatori prima di registrazioni successive seguenti ad esempio, il trattamento farmacologico. Tali registrazioni di base possono fornire preziose informazioni circa l'interdipendenza funzionale del cervello con ritmicità diversi stati comportamentali o sonno / ritmicità circad.......
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Discussione
Impiantabile EEG radiotelemetria è di importanza centrale, in quanto è una tecnica non restrittivo consentendo animali da laboratorio di eseguire il loro repertorio di comportamento 1,3. Questo è di grande interesse in quanto l'approccio telemetrica permette non solo le registrazioni EEG spontaneo, ma anche registrazioni in compiti cognitivi e le impostazioni analitiche circadiani, come ad esempio T-labirinto, labirinto radiale, labirinto d'acqua, attività di privazione del sonno o quando una registra.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Gli autori desiderano ringraziare la Dott.ssa Christina Ginkel (Centro Tedesco per le Malattie Neurodegenerative, DZNE), la Dott.ssa Michaela Möhring (DZNE) e il Dott. Robert Stark (DZNE) per l'assistenza nell'allevamento e nella cura della salute animale. Questo lavoro è stato sostenuto finanziariamente dall'Istituto federale per i farmaci e i dispositivi medici (Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM) di Bonn, Germania.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Carprofene (Rimadyl VET - InjektionA2:D43slö Pfizer | PZN 0110208 | 20 ml | |
| Microscopio chirurgico binoculare con ingrandimento | Zeiss Stemi 2000 | 0000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000 | |
| Bulldog serrefine | F.S.T.18051-28 | 28 mm | |
| Gabbie (Macrolon) | Techniplast | 1264C, 1290D | |
| Sorgente luminosa fredda | Schott KL2500 LCD | 9.705 202 | ordinati da Th.Geyer |
| Applicatori di punte in cotone (sterili) | Carl Roth | EH12.1 | |
| Dexpanthenole (Bepanthen Wund- und Heilsalbe) | Bayer | PZN: 1578818 | |
| Teli (sterili) | Hartmann | PZN 0366787 | |
| 70% etanolo | Carl Roth | 9065.5 | |
| Soluzione di perossido di idrogeno 0,3%/3% | Sigma | 95321 | Soluzione madre al 30% |
| Guanti (sterili) | Unigloves | 1570 | |
| Cemento vetroionomerico dentale | KentDental /NORDENTA | 957 321 | |
| Soluzione di glutaraldeide al 2% | Sigma | G6257 | |
| Graefe Forcipe curvo, seghettato | F.S.T. | 11052-10 | |
| Halsey Micro Needle Holder-Carburo di tungsteno | F.S.T.12500-12 | 12,5 cm | |
| Sterilizzatore per strumenti chirurgici a base di calore | F.S.T. | 18000-50 | |
| Termoforo | AEG HK5510 | 520010 | ordinato su myToolStore |
| Trapano dentale ad alta velocità | Adeor | SI-1708 | |
| Forbici per iride extra sottili | F.S.T.14058-09 | cm | |
| Sistema narcotico per inalazione (isoflurano) | Harvard Apparatus GmbH | 34-1352, 10-1340, 34-0422, 34-1041, 34-0401, 34-1067, 72-3044, 34-0426, 34-0387, 34-0415, 69-0230 | |
| Isoflurano | Baxter 250 ml | PZN 6497131 | |
| Ketamina | Pfizer | PZN 07506004 | |
| Ringer lattato' s soluzione (sterile) | Braun | L7502 | |
| Lexar-Baby Forbici-dritte, 10 cm | F.S.T.14078-10 | 10 cm | |
| Soluzione colorante Nissl | Armin Baack | BAA31712159 | |
| Materiale di sutura non assorbibile 5-0/6-0 (sterile) | SABANA (Sabafil) | N-63123-45 | |
| Covidien (Sofsilk) | S1172, S1173 | ||
| Halsey Porta aghi | F.S.T.12001-13 | 13 cm | |
| Cuscinetti (sterili) | ReWa Krankenhausbedarf | 2003/01 | |
| 0,9% soluzione salina (NaCl, sterile) | Braun | PZN:8609255 | |
| Lame per bisturi con manico (sterile) | propraxis | 2029/10 | |
| Standard Pattern Pinze | F.S.T.1100-12 | , 11000-14 | 12 cm e 14,5 cm di lunghezza |
| Elettrodi in acciaio e tungsteno rivestiti in parilene | FHC Inc., Stati Uniti) | UEWLGESEANND | |
| Telaio stereotassico | Neurostar | 51730M | ordinato a Stoelting |
| (Stereo Drive-New Motorized Stereotaxic) | |||
| Nastri (sterili) | BSN medical GmbH & Co. KG | 626225 | |
| TA10ETA-F20 | DSI | 270-0042-001X | Trasmettitore a radiofrequenza 3,9 g, 3,9 g, 1,9 ml, intervallo di tensione di ingresso & plusmn; 2,5 mV, larghezza di banda del canale (B) 1 - 200 Hz, frequenza di campionamento nominale (f) 1.000 Hz (f = 5B) intervallo di temperatura operativa 34 - 41 gradi C durata della batteria garantita 4 mesi |
| TL11M2-F20EET | Trasmettitore a radiofrequenza DSI | 270-0124-001X | 3,9 g, 1,9 ml, intervallo di tensione di ingresso & plusmn; 1,25 mV, larghezza di banda del canale (B) 1 - 50 Hz, frequenza di campionamento nominale (f) 250 Hz (f = 5B) intervallo di temperatura operativa 34 - 41 gradi C garantito durata della batteria 1,5 mesi |
| Pinze per tessuti - 1x2 denti 12 cm | F.S.T.11021-12 | 12 cm di lunghezza Forbici | |
| iride in carburo di tungsteno | F.S.T.14558-11 | 11,5 cm | |
| Vibroslicer 5000 MZ | Microscopia elettronica | Sciences 5000-005 | |
| Xilazina (Rompun) | Bayer | PZN: 1320422 |
Riferimenti
- Kramer, K., et al. The use of radiotelemetry in small laboratory animals: recent advances. Contemp Top Lab Anim Sci. 40, 8-16 (2001).
- Kramer, K., et al. The use of telemetry to record electrocardiogram and hea....
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Ristampe e permessi
