Descriviamo un test rapido, molecolare a base di Influenza A e B. Il saggio Influenza rileva ogni bersaglio entro 15 minuti utilizzando l'amplificazione isotermica con primer specifici per l'influenza seguita da rilevamento di target con sonde segnale molecolare. Il saggio e influenza A B è facile da usare e richiede minimi hands-on tempo per eseguire.
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Articolo metodologico
Rilevazione rapida molecolare e la differenziazione dei virus influenzali A e B
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'influenza è una malattia respiratoria contagiosa causata da virus influenzali A e B negli esseri umani e provoca una notevole quantità di morbilità e mortalità ogni anno. L'influenza A e B saggio è stato il primo test molecolare rapida influenza CLIA-rinunciato a disposizione. Il test di influenza A e B funziona utilizzando l'amplificazione isotermica con primer specifici per l'influenza seguita da rilevamento di target con sonde segnale molecolare. Qui, le prestazioni della influenza A e B saggio su congelato, archiviati tampone nasofaringeo (NPS) campioni conservati in terreno di trasporto virale (VTM) sono stati confrontati con un test del pannello respiratoria.
Le prestazioni della A e B saggio Influenza stata valutata confrontando i risultati al metodo di riferimento del pannello respiratoria. La sensibilità per il virus dell'influenza A totale è stata del 67,5% (95% CI (CI), 56,6-78,5) e la specificità del 86,9% (CI, 71,0-100). Per il test virus dell'influenza B, la sensibilità e la specificità sono state 90,2% (CI, 68,5-100) E il 98,8% (CI, 68,5-100), rispettivamente.
Questo sistema ha il vantaggio di un tempo di prova significativamente più breve rispetto a qualsiasi altro test molecolare attualmente disponibili e la procedura semplice, priva di pipetta viene eseguito su un chiuso, sistema completamente integrato dimensioni ridotte. Nel complesso, l'influenza A e dosaggio B valutati in questo studio ha il potenziale per servire come test diagnostico point-of-care rapida influenza.
Introduzione
Infezioni da virus dell'influenza determinano una quantità significativa di morbilità e mortalità ogni anno 1, 2, 3. L'influenza non complicata è caratterizzata da sintomi costituzionali e respiratori quali febbre, mialgia, cefalea e tosse non produttiva 4, 5. Gli individui più anziani, bambini, pazienti immunocompromessi e pazienti con comorbilità sottostanti sono a più alto rischio di complicanze gravi come la polmonite, la miocardite, malattia del sistema nervoso centrale, o la morte
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Protocollo
ETICA DICHIARAZIONE: L'utilizzo di avanzi di campioni clinici è approvato e segue le linee guida del Memorial Sloan Kettering Cancer Center Institutional Review Board.
1. Prima di eseguire il test
NOTA: L'influenza A e B test è approvato per campioni di tamponi nasofaringei e tamponi nasofaringei memorizzati nei mezzi di trasporto virale. I tamponi sono incluse nel kit e devono essere utilizzati per ottenere prestazioni ottimali. Tuttavia, rayon, schiuma, accorrevano tamponi o tamponi nasali poliestere può essere utilizzato anche per raccogliere campioni di tamponi nasali.
- Per raccogliere un campione di tampone nasale, inserire il t....
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Risultati
In questo studio, i campioni NPS archiviati sono stati raccolti da pazienti ricoverati con sintomi simil-influenzali al Memorial Sloan-Kettering Cancer Center (MSKCC) nel corso di un focolaio di influenza tra il 15 Dicembre, 2012 e il 1 marzo 2013. I campioni NPS sono state presentate in 3 ml di VTM e testato come parte della pratica clinica di routine con un saggio molecolare che rileva un gruppo di virus respiratori (RP), tra cui l'influenza a, a-1, a-3, e B. Durante il periodo di stud.......
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Discussione
I virus influenzali sono importanti cause mondiali di morbilità e mortalità. diagnosi rapida e accurata di influenza è una delle principali chiavi per la gestione di focolai di influenza durante la stagione delle vie respiratorie. Altri test antigene-based sono rapidi e facili da eseguire; Tuttavia, essi hanno bassi sensibilità 13. D'altra parte, i test molecolari tradizionali hanno migliorato la sensibilità, ma richiedono tecnici di laboratorio più esperti di eseguire e sono più costosi. Il .......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Ringraziamo il personale del Servizio di Microbiologia Clinica del Memorial Sloan-Kettering Cancer Center per l'aiuto nella raccolta di campioni clinici. Questo studio è stato supportato in parte da un accordo di ricerca tra MSKCC e Alere Scarborough (SK2013-0262).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Alere i Instrument | Alere | NAT-000 (Globale), NAT-024 (US) | |
| Alere i Influenza A & Kit di test B 24 | Alere | 425-000 (Globale), 425-024 (Stati Uniti) | |
| Alere i Barcode Scanner | Alere | EQ001001 | |
| Alere Stampante universale Alere | 55115 (Globale), alereiprinter ( US) | ||
| 200 µ L Pipetta | |||
| 200 & Micro; l. puntali | |||
| Terreno di trasporto virale | Remel | M4-RT |
Riferimenti
- Prevention control of seasonal influenza with vaccines. Recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices--United States, 2013-2014. , Report No. 1057-5987 1-43 (2013).
- Poehling, K. A., et al. The Underrecognized B....
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Ristampe e permessi
