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Articolo metodologico

Indagini su GA (III) Complesso di EOB-DTPA e la sua

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DOI:

10.3791/54334

⸱

17 agosto 2016

 ,  ,  , 
1Clinic of Nuclear Medicine, University Hospital Jena, 2Friedrich Schiller University

In questo articolo

Sommario

Una procedura per l'isolamento di EOB-DTPA e successiva complessazione con Ga naturale (III) e 68 Ga è presentato qui, nonché un'attenta analisi di tutti i composti e ricerche sull'efficienza etichettatura, la stabilità in vitro e l'ottanolo / acqua coefficiente di distribuzione del complesso radiomarcato.

Abstract

Abbiamo dimostrato un metodo per l'isolamento di EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris (carbossimetil) -4- (etossibenzile) Acido -undecanedioic) dalla sua Gd (III) e protocolli per preparazione del suo romanzo non radioattiva, cioè, naturale Ga (III) così come radioattivo 68 complesso Ga. Il legante, nonche la Ga (III) sono stati caratterizzati mediante spettroscopia di risonanza magnetica nucleare (NMR), spettrometria di massa e analisi elementare. 68 Ga è stato ottenuto con un metodo eluizione standard da un / 68 generatore 68 Ge Ga. Gli esperimenti per valutare l'efficienza di 68 Ga-etichettatura dei EOB-DTPA a pH sono stati eseguiti 3,8-4,0. tecniche di analisi stabilito la radio TLC (cromatografia su strato sottile) e HPLC della radio (cromatografia liquida ad alte prestazioni) sono stati utilizzati per determinare la purezza radiochimica del tracciante. Come prima indagine di lipofilia 68 Ga traccianti 'la ottanolo / acqua distributioCoefficiente di 68 specie Ga presenti in una soluzione a pH 7,4 è stato determinato mediante un metodo di estrazione. In vitro misure di stabilità del tracciante in vari media a pH fisiologico state eseguite, rivelando diversi tassi di decomposizione.

Introduzione

Acido gadoxetico, un nome comune per il complesso di Gd (III) del ligando EOB-DTPA 1, è un agente di contrasto utilizzato frequentemente nell'imaging epatobiliare risonanza magnetica (MRI). 2,3 Grazie al suo assorbimento specifico epatociti del fegato e un'alta percentuale di escrezione epatobiliare consente la localizzazione di lesioni focali e tumori epatici. 2-5 Tuttavia, alcune limitazioni della tecnica MRI (ad esempio, tossicità dei mezzi di contrasto, limitata applicabilità nei pazienti con impianti claustrofobia o metallo) richiedono uno strumento diagnostico alternativa .

Tomografia ad emissione di positroni (PET) è un metodo di imaging molecolare, in cui viene somministrata una piccola quantità di una sostanza radioattiva (tracciante), su cui la sua distribuzione nel corpo è registrato da uno scanner PET. 6 PET è un metodo dinamico che consente per alta risoluzione spaziale e temporale delle immagini così come quantificazione dei risultati, senza doveraffrontare gli effetti collaterali degli agenti di contrasto per MRI. Il valore informativo delle informazioni metaboliche ottenuto può essere ulteriormente aumentata combinazione con dati anatomici ricevuti da metodi di imaging addizionali, come più comunemente realizzato da immagini ibrida con la tomografia computerizzata (CT) in scanner PET / CT.

La struttura chimica di un tracciante adatto per PET deve includere un isotopo radioattivo che funge da emettitore positroni. Positroni hanno una breve durata in quanto si annichilano quasi immediatamente con gli elettroni dei gusci atomo di tessuto circostante. Con annientamento due fotoni gamma 511 keV con direzione opposta del movimento sono emessi, che sono registrati dallo scanner PET. 7,8 Per formare un tracciante, nuclidi PET possono essere legati covalentemente ad una molecola, come avviene in 2-deoxy- 2- [18 F] fluoroglucose (FDG), il PET tracciante più ampiamente utilizzato. 7 Tuttavia, un nuclide può anche formare legami di coordinazione a uno o più leganti (ad esempio, [68 Ga] -DOTATOC 9,10) o essere applicato come sali inorganici disciolti (ad esempio, [18 F] sodio fluoruro 11). Complessivamente, la struttura del tracciante è fondamentale in quanto determina il comportamento biodistribuzione, metabolismo ed escrezione.

Un adatto nuclide PET deve combinare caratteristiche favorevoli come conveniente energia positrone e disponibilità così come un'emivita adeguata per l'indagine previsto. Il 68 Ga nuclide è diventata una forza essenziale nel campo della PET negli ultimi due decenni. 12,13 Ciò è dovuto principalmente alla sua disponibilità attraverso un sistema di generatore, che permette etichettatura sul posto indipendentemente dalle vicinanze di un ciclotrone. In un generatore, la madre nuclide 68 Ge viene assorbito su una colonna da cui figlia nuclide 68 Ga viene eluito e successivamente etichettata per un chelante adeguato. 6,14 Poiché il 68 Ga nuclide esiste come trivalent cazione proprio come Gd (III) 10,13, chelanti EOB-DTPA con 68 Ga invece produrrebbe un complesso con la stessa carica negativa complessiva come acido gadoxetico. Di conseguenza, che il 68 Ga tracciante potrebbe combinare una caratteristica simile specificità del fegato con l'idoneità per l'imaging PET. Sebbene l'acido gadoxetico viene acquistato e somministrato come sale disodico, nel contesto seguente si farà riferimento ad esso come Gd [EOB-DTPA] e dal complesso non radioattivo Ga (III) come Ga [EOB-DTPA], o 68 Ga [ EOB-DTPA] nel caso della componente radiomarcato per motivi di convenienza.

Per valutare la loro applicabilità come traccianti per PET, complessi metallici radioattivi devono essere esaminate estesamente in vitro, in vivo o ex vivo esperimenti prima. Per determinare l'idoneità per un rispettivo problema medico, varie caratteristiche traccianti come comportamento biodistribuzione e profilo di liquidazione, la stabilità, la specificità degli organi e delle cellule o Tissue l'assorbimento bisogno di essere indagato. A causa del loro carattere non invasivo, le determinazioni in vitro sono spesso eseguiti prima di esperimenti in vivo. È generalmente riconosciuto che DTPA e suoi derivati ​​sono limitatamente idonee come chelanti per 68 Ga causa di questi complessi privi inerzia cinetica, con conseguente decomposizione comparabilmente veloce quando somministrati in vivo. 14-20 Questo è principalmente causata da apo transferrina fungendo da concorrente per 68 Ga nel plasma. Tuttavia, abbiamo studiato questo nuovo tracciante per quanto riguarda la sua possibile applicazione nel campo dell'imaging epatobiliare, in cui le informazioni di diagnostica possono essere fornite in pochi minuti dopo l'iniezione 3,4,21-23, quindi non necessariamente richiedono stabilità tracciante a lungo termine. A questo scopo abbiamo isolato EOB-DTPA da acido gadoxetico e inizialmente eseguito la complessazione con Ga naturale (III), che esiste come miscela di due isotopi stabili, 69 Ga e 71 Ga. Il complesso così ottenuto servito come campione non radioattivo per il seguente chelazione del 68 Ga. Abbiamo usato stabilito metodi e contemporaneamente valutato la loro idoneità per determinare l'efficienza 68 Galabeling di EOB-DTPA e di indagare la lipofilia della nuova 68 Ga tracciante e la sua stabilità in diversi media.

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Protocollo

1. Preparazione di EOB-DTPA e Ga [EOB-DTPA]

Attenzione: Si prega di consultare tutte le schede di sicurezza materiale pertinente (MSDS) dei macchinari usati solventi organici, acidi e alcali prima dell'uso. Eseguire tutti i passaggi in una cappa aspirante e utilizzare dispositivi di protezione individuale (occhiali, guanti, camice da laboratorio).

  1. Isolamento di EOB-DTPA da acido gadoxetico
    1. Mettere 3 ml di 0,25 M soluzione iniettabile gadoxetico acido in un pallone. Aggiungere 500 mg (5,6 mmol) di acido ossalico alla soluzione agitata.
    2. Dopo agitazione per 1 ora, filtrare la sospensione attraverso una fritta con pressione ridotta. Lavare il residuo tre volte con 3 ml di acqua, rispettivamente.
    3. Unire i filtrati acquosi e dotare la soluzione con un elettrodo di pH. Aggiungere 12 M di acido cloridrico al filtrato finché il pH è circa -0.1.
    4. Rimuovere il solvente sotto vuoto ottenendo un residuo incolore. Conservare sotto gas inerte.
    5. Lavare accuratamente il residuo (almeno trevolte) con acetato di etile per rimuovere l'eccesso di acido ossalico. Essiccare il residuo sotto vuoto.
    6. Riprendere il residuo in 2 ml di acqua a temperatura ambiente e poi raffreddare la soluzione in un bagno di ghiaccio. Senza rimuovere il bagno di ghiaccio, si aggiungono 0,5 M di idrossido di sodio acquoso soluzione goccia a goccia fino alla formazione di un incolore collosa solido viene osservato.
    7. Rimuovere l'acqua per decantazione. Lavare i solidi altre due volte con 1 ml di acqua fredda. Essiccare il solido sotto vuoto ottenendo la prima frazione di prodotto.
    8. Isolare una seconda frazione del prodotto dalle frazioni combinate di acqua decantata tramite cromatografia su colonna (silice, metanolo / acqua 4/1). 24 Rimuovere il solvente sotto vuoto.
    9. Se il solido così ottenuto non è bianco puro, scioglierla in 1 ml di acqua, aggiungere 10 ml di etanolo e successivamente 10 ml di etere etilico per far precipitare il prodotto. Filtrare attraverso una fritta con pressione ridotta e secco sotto vuoto.
    10. combinareentrambe le frazioni solide di EOB-DTPA ed eseguire spettroscopica NMR, 25 spettrometria di massa 26 e 27 elementari analisi.
  2. Sintesi di Ga [EOB-DTPA]
    ATTENZIONE: solido Ga (III) cloruro Conservare in atmosfera inerte, secco, dal momento che al contatto con l'aria, l'umidità o la decomposizione di grasso si svolge, con conseguente fumi corrosivi e la formazione di impurità giallo, marrone o nero.
    1. Preparare una soluzione 0,11 M magazzino sciogliendo 1,94 g (11,0 mmoli) di Ga (III) cloruro in 100 ml di acqua. Diluire 1 ml di 25% soluzione acquosa ammoniacale con 4 ml di acqua.
    2. Sciogliere 80 mg (0,15 mmoli) di EOB-DTPA in un pallone a 10 ml di acqua. Se necessario, riscaldare il solvente per ottenere la completa dissoluzione.
    3. Aggiungere 1,4 ml (0,15 mmol) del Ga (III) cloruro soluzione madre. Dotare il pallone con un agitatore e pH-elettrodo. Aggiungere diluita soluzione acquosa di ammoniaca goccia a goccia fino a che il pH della soluzione è circa 4,1. Mescolare a rotemperatura om per 30 min.
    4. Rimuovere il solvente sotto vuoto. Posizionare il residuo in un pallone munito di un stillhead con un collo lato centrale e parallelo. Dotare collo centrale con un dito di raffreddamento e il collo laterale con una presa di pompa da vuoto
    5. Riscaldare il residuo a pressione ridotta (125 ° C, 0,6 mbar). Periodicamente rimuovere il cloruro di ammonio sublimata (visibile come rivestimento bianco della superficie di vetro) dal dito di raffreddamento ed ancora testa, nonché dalle parti superiori del pallone con un panno leggermente bagnato. Continuare il processo fino a quando non vi è alcuna formazione visibile di nuovo sublimato.
    6. Per rimuovere le ultime tracce di cloruro di ammonio lavare il residuo tre volte con 0,5 ml di metanolo caldo, rispettivamente. Essiccare il residuo incolore sotto vuoto. Eseguire NMR spettroscopica, 25 di massa spettrometria di 26 e 27 elementari analisi.

2. Procedura generale Labeling

ATTENZIONE: tutti gli exesperi- compreso il contatto diretto o indiretto con le sostanze radioattive devono essere effettuate solo da personale qualificato. Si prega di utilizzare apparecchiature schermatura appropriata. Raccogliere tutte le scorie radioattive a parte e conservare e smaltire secondo le norme vigenti.

  1. Eluizione del generatore
    Nota: A 40 mCi 68 Ge / 68 Ga generatore con il nuclide madre vincolati come ossido di silice dodecil-3,4,5-trihydroxybenzoate è stato utilizzato. Elution e purificazione possono essere eseguite manualmente o, come nel caso in questa procedura, come un processo automatizzato combinati utilizzando una pompa peristaltica e dispositivo erogatore.
    1. Preparare soluzioni di 5,5 M, 1,0 M e 0,05 M di acido cloridrico. Preparare una soluzione di 5,0 M di cloruro di sodio contenente 25 ml di 5,5 M di acido cloridrico per ml. Preparare una soluzione tampone a pH 4,6 combinando 4,1 g di acetato di sodio, 1 ml di HCl (30%) e 2,5 ml di acido acetico glaciale e diluendo la miscela con acqua a 50 ml.
    2. precondition PS-H + cartuccia lavaggio lentamente con 1 ml di 1,0 M di acido cloridrico e poi 5 ml di acqua.
    3. Eluire la colonna di silice del generatore con 4 ml di 0,05 M HCl. 12 Caricare il 68 Ga eluato sulla PS-H + cartuccia.
    4. Lavare la cartuccia con 5 ml di acqua e successivamente asciugare con 5 ml di aria. Eluire il 68 Ga dalla cartuccia con 1 ml 5.0 M acidificato soluzione di cloruro di sodio. 28
  2. Etichettatura di EOB-DTPA con 68 Ga
    1. Sciogliere 1 mg (1,9 mmol) di EOB-DTPA in 1 ml di acqua. Da questa soluzione prendere 100 ml (0,19 mmol) e diluire con 9,9 ml di acqua per preparare un 19 micron (10 mg / ml) soluzione madre di EOB-DTPA.
    2. Rimuovere 50 ml (pari 22-29 MBq) della soluzione contenente 68 Ga e messi in una fiala. Aggiungere 50 ml (0,5 mg) di mm soluzione stock di EOB-DTPA 19 e 300 ml of tampone per aumentare il pH a 4,0. Agitare brevemente e incubare la soluzione a temperatura ambiente per 5 min. Rimuovere una aliquota di 1-5 ml e mettere a un'analisi HPLC o TLC.
    3. Eseguire l'analisi HPLC la radio su una fase inversa (RP) C18 colonna 29 Utilizzare la seguente fase mobile:. A - acqua / acido trifluoroacetico (99,9% / 0,1%), B - Acido acetonitrile / trifluoroacetico (99,9% / 0,1%), pendenza : 06 min 80% A → 0% A (0,5 ml / min), 610 min 0% A (0,5 ml / min).
    4. Determinare l'intensità dei picchi dei segnali radio HPLC come area sotto la curva. Calcolare la resa di etichettatura radiochimica purezza (RCP) del tracciante come segue:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A + A Ga Ga-EOB-DTPA) ∙ 100%
      Un Ga-EOB-DTPA: area sotto la curva di 68 Ga [EOB-DTPA]
      A Ga: area sotto la curva del libero 68 Ga

3. etichettatura dell'efficienza

  1. Eseguire procedure di etichettatura come descrittod nella sezione 2. Utilizzare una serie coerente di avviare l'attività di 68 Ga eluato, ad esempio, 22-29 MBq (40-140 ml, a seconda della freschezza del eluato).
  2. Aggiungere la quantità richiesta di soluzione tampone per regolare il pH a 3,8-4,0 (40-190 microlitri, a seconda del volume di 68 Ga eluato). Aggiungere la quantità richiesta di soluzione di legante magazzino (10-70 ml di una soluzione di 19 mm).
  3. Aggiungere la quantità necessaria di acqua per regolare il volume complessivo di ogni sonda etichettatura a 1,75 ml. Mescolare accuratamente e lasciare riposare il campione per 5 minuti a temperatura ambiente. Effettuare analisi HPLC come descritto al punto 2 per determinare la resa di etichettatura.
  4. Eseguire le procedure di etichettatura con quantità di legante tra 0,1 mg e 0,7 mg a passi di 0,1 mg. Effettuare esperimenti in triplicato per ciascuna concentrazione ligando. Calcolare la resa media e deviazione standard.

4. In Vitro stabilità

  1. p GeneraleROCEDURA e preparati
    1. Sciogliere una compressa di tampone fosfato salino (PBS) in 200 ml di acqua deionizzata per preparare una soluzione madre PBS con una concentrazione di fosfato 10 mM.
    2. Eseguire etichettatura di 22-29 MBq 68 Ga con 0,5 ml di soluzione stock EOB-DTPA, come descritto nella sezione 2. A seconda del volume del 68 Ga eluato, regolare la quantità di tampone, come descritto nella sezione 3. Prelevare campioni di soluzione di etichettatura contenente 6-12 MBq di tracciante per eseguire misure di stabilità.
    3. Eseguire la radio analisi TLC su piastre di alluminio 80 mm di gel di silice rivestite con 0,1 M citrato di sodio acquoso come eluente e analizzare le piastre con uno scanner radioattività TLC. 30 Determinare le intensità dei segnali TLC come area sotto la curva. Calcolare la RCP del tracciante come segue:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A-Ga libero + A Ga-EOB-DTPA + A Ga-colloidale) ∙ 100%
      Un Ga-EOB-DTPA: area sotto la curva di 68 Ga [EOB-DTPA]
      Un Ga-libera: area sotto la curva del libero 68 Ga
      Un Ga-colloidale: area sotto la curva di colloidale 68 Ga
    4. Calcolare RCP t / RCP 0 per ogni punto di tempo. Tracciare la RCP in tal modo standardizzato rispetto differenza di tempo da quando il punto di partenza t = 0 min.
      RCP t = RCP di 68 Ga [EOB-DTPA] al punto di tempo t.
      RCP = 0 RCP di 68 Ga [EOB-DTPA] al tempo t = 0 min.
  2. Stabilità in tampone fosfato (A)
    1. Per 65 ml di soluzione di etichettatura aggiungere 150 ml di soluzione madre PBS e 60 ml di soluzione di idrossido di sodio (0,1 M) per sollevare il pH a 7,4. Mescolare accuratamente.
    2. Rimuovere una aliquota di 1-5 microlitri per effettuare analisi TLC ( 'punto di partenza'). memorizzare immediatamente la soluzione in un incubatore a 37 ° C e rimuovere aliquote di effettuare analisi TLC a rappresentareative punti di tempo più di 3 ore.
  3. Stabilità verso eccesso di apo -transferrin in PBS (B)
    1. Per 120 ml di soluzione di etichettatura aggiungere 50 ml di soluzione madre PBS e 430 ml di soluzione di idrossido di sodio (0,1 M) per sollevare il pH a 7,4. Aggiungere 40 ml di una soluzione di apo -transferrin (25 mg / ml). Mescolare accuratamente.
    2. Rimuovere una aliquota di 1-5 microlitri per effettuare analisi TLC ( 'punto di partenza'). memorizzare immediatamente la soluzione in un incubatore a 37 ° C e rimuovere aliquote di effettuare analisi TLC in punti temporali rappresentativi oltre 3 ore.
  4. Stabilità in siero umano (C)
    1. Per 500 ml di siero umano aggiungere 25 ml di soluzione di etichettatura e 45 ml di soluzione di idrossido di sodio (0,1 M) per sollevare il pH a 7,4. Mescolare accuratamente.
    2. Rimuovere una aliquota di 1-5 microlitri per effettuare analisi TLC ( 'punto di partenza'). memorizzare immediatamente la soluzione in un incuBator a 37 ° C e rimuovere aliquote di eseguire analisi TLC in momenti rappresentativi di oltre 3 ore.

5. Determinazione del coefficiente di ripartizione LoGD

  1. Eseguire procedure di etichettatura, come descritto nella sezione 2. Per 50 ml di soluzione di etichettatura aggiungere 20 ml di soluzione madre PBS e 170 ml di soluzione di idrossido di sodio (0,1 M) per sollevare il pH a 7,4.
  2. Prelevare 200 ml di questa soluzione e metterla in una plastica V-fiala. Aggiungere 200 ml di n-ottanolo. Chiudere la fiala e vortex per 2 min. Poi centrifugare il campione a 1.600 xg per 5 min.
  3. Rimuovere triplicato da 40 ml dalla fase n n-octanolo e la fase acquosa ogni e metterli in V-flaconcini separati. Fare attenzione a non mischiare gli strati.
  4. Misurare l'attività di ciascun campione in un contatore gamma bene per 30 sec. Per ogni campione ripetere la misurazione immediatamente due volte e ne calcola la media dell'attività Ᾱ t in conteggi per minuto (cpm). Elencare il Ᾱ t così guadagnato, W1, Ᾱ t, W2 e Ᾱ t, W3 (attività in campioni acquosi) e Ᾱ t, O1, Ᾱ t, O2, Ᾱ t, O3 (attività in n- ottanolo) insieme con il rispettivo punto t momento della loro determinazione.
  5. Definire il punto di tempo della misurazione dell'ultimo campione come t 0. Determinare ed elencare Dt in min calcolando At = TT 0. Eseguire la correzione di decadimento Ᾱ t, utilizzando la seguente formula:
    Ᾱ 0 = Ᾱ t · 2 (Dt / 68 min).
  6. Calcolare Ᾱ 0, W come media di Ᾱ 0, W1, Ᾱ 0, W2 e Ᾱ 0, W3 e Ᾱ 0, O come media di Ᾱ 0, O1, Ᾱ 0, O2 e Ᾱ 0, O3. Calcolare LoGD utilizzando la seguente formula:
    LoGD = log [(Ᾱ 0, O · 40 mcg) / (Ᾱ 0, W · 33 mg)].
  7. Eseguire l'intero esperimento in triplicato e calcolare la media LoGD insieme con la sua deviazione standard.

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Risultati

Il ligando EOB-DTPA e Ga non radioattivo (III) sono stati analizzati mediante 1 H e 13 C {1} H spettroscopia NMR, spettrometria di massa e analisi elementare. I risultati riportati in Tabella 1 e rappresentati nelle figure 1-6 verifica la purezza delle sostanze.

Eluizione del generatore 68 Ge / 68 Ga ha prodotto soluzioni di 400-6...

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Discussione

EOB-DTPA è accessibile attraverso una sintesi multi-step 33, ma può benissimo essere isolato dagli agenti di contrasto disponibili contenenti acido gadoxetico. Per questo scopo, lo ione centrale di Gd (III) può essere precipitato con un eccesso di acido ossalico. Dopo aver rimosso Gd ossalato (III) e acido ossalico il legante può essere isolato mediante precipitazione in acqua fredda a pH 1.5. Tuttavia, al fine di migliorare le rese colonna cromatografica del filtrato può essere eseguita preferibilmente o com...

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori non hanno riconoscimenti.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
primovistaM
cloruro di gallio(III)Sigma-Aldrich Co.
acqua (deionizzata)--apparecchiature per la deionizzazione dell'acqua di rubinetto di Auma-Tec GmbH
acido cloridrico 12 MVWR20252.29
idrossido di sodioPolskie Odczynniki Chemiczne S.A.
acido ossalicoSigma-Aldrich Co.75688
acetato di etileBrenntag GmbH10010447
gel di siliceMerck KGaA1.10832.9025Geduran Si 60 0.063-0.2  mm
TLC gel di silice 60 F254Merck KGaA1.16834.0001
metanoloVWR20903.55
etanoloBrenntag GmbH10018366
eietiletereVWR23807.468conservato su piastre KOH
soluzione di ammoniaca (25%)VWR1133.1
elettrodo pHVWR662-1657
unità di agitazione e riscaldamentoHeidolph505-20000-00
pompaIlmvac GmbH322002
fritta-design
spettrometro NMRBruker Coorporation-UltraShield 400
spettrometro di massaThermo Fisher Scientific Inc.-
analizzatore elementareHekatech GmbH Analysentechnik-EuroVectorEA 3000 CHNS
acqua deuterata D2Oeuriso-topD21499.90% D
Materiale/Attrezzatura necessaria per le procedure di etichettatura
68Ge/68GaITG Isotope Technologies Garching GmbHA150
sistema di pompe ed erogatoriScintomicsGmbH-Variosystem
acido cloridrico 30% (suprapur)Merck KGaA1.00318.1000
acqua (ultrapur)Merck KGaA1.01262.1000
cloruro di sodio (suprapur)Merck KGaA1.06406.0500
acetato di sodio (suprapur)Merck KGaA1.06264.0050
acido acetico glaciale (suprapur)Merck KGaA1.00066.0250
citrato di sodio diidratoVEB Laborchemie Apolda10782>98,5%
PS-H+ Cartuccia (S)Macherey-Nagel731867Chromafix
apo-TransferrinSigma-Aldrich Co.Tampone PBS T2036
(compresse)Sigma-Aldrich Co.79382
siero umanoSigma-Aldrich Co.H4522di plasma AB maschio umano
, colonne, ecc.elettrodo pH dal design
Knick Elektronische Messgerä te GmbH & Co. KG765-Set
pompa binaria (HPLC)Hewlett-PackardG1312A (HP 1100)
Rivelatore UV/VIS (HPLC)Hewlett-PackardG1315A (HP 1100)
rivelatore radioattivo (HPLC)EGRC Berthold
HPLC C-18-PFP colonnaAdvanced Chromatography Technologies Ltd.ACE-1110-1503/A100528
Fiale in vetro HPLCGTG Glastechnik Graefenroda GmbH8004-HP-H/i3µ
pipettaEppendorf-fiale
di plasticaSarstedt AG & Co.6542.007
fiale di plasticaGreiner Bio-One International GmbH717201
activimeterMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed 2010
pinzette incubatricedesign
Heraeus Instruments GmbH51008815
miscelatore a vorticeFisons-Whirlimixer
centrifugaHeraeus Instruments GmbH75003360
contatore di pozzi gammaMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed2100
acqua per cromatografiaMerck KGaA1.15333.2500
acetonitrile per cromatografiaMerck KGaA1.00030.2500
acido trifluoroaceticoSigma-Aldrich91707
scanner di radioattività TLCraytest Isotopenmessgerä te GmbHB00003875dotato di rivelatore di plastica beta
Bayer-0,25 450898810925429 personalizzato da fiasche personalizzatopersonalizzato

Riferimenti

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