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Articolo metodologico

Sintesi di ciclici polimeri e caratterizzazione di loro moto diffusivo allo stato fuso alla molecola Piano unico

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⸱

DOI:

10.3791/54503

⸱

26 settembre 2016

 ,  , 
1Biological and Environmental Sciences and Engineering Division, King Abdullah University of Science and Technology (KAUST), 2Division of Applied Chemistry, Faculty of Engineering, Hokkaido University, 3Department of Organic and Polymeric Materials, Tokyo Institute of Technology

In questo articolo

Sommario

Un protocollo per la sintesi e la caratterizzazione di moto diffusivo di polimeri ciclici a livello di singola molecola è presentato.

Abstract

Dimostriamo un metodo per la sintesi di polimeri ciclici e un protocollo per caratterizzare il loro moto diffusivo in uno stato fuso a livello di singola molecola. Per la sintesi del poli(tetraidrofurano) ciclico viene utilizzato un processo di autoassemblaggio elettrostatico e fissazione covalente (ESA-CF)). Il movimento diffusivo delle singole catene polimeriche cicliche in uno stato fuso viene visualizzato utilizzando l'imaging a fluorescenza a singola molecola incorporando un'unità fluoroforo nelle catene cicliche. Il moto diffusivo delle catene è caratterizzato quantitativamente mediante una combinazione di analisi dello spostamento quadratico medio (MSD) e di un'analisi della funzione di distribuzione cumulativa (CDF). Il polimero ciclico mostra una diffusione multimodale che è distinta dalla sua controparte lineare. I risultati dimostrano che l'eterogeneità diffusionale dei polimeri, che spesso si nasconde dietro la media d'insieme, può essere rivelata dall'efficiente sintesi dei polimeri ciclici utilizzando il processo ESA-CF e dall'analisi quantitativa del moto diffusivo a livello di singola molecola utilizzando le analisi MSD e CDF.

Introduzione

I polimeri ciclici sono unici in quanto non hanno estremità a catena. Spesso mostrano comportamenti insoliti che si distinguono dalla loro controparte lineare, tra cui una maggiore stabilità termica delle micelle polimeriche mediante una conversione da lineare a ciclica,1,2 e l'organizzazione spaziale del DNA nelle cellule batteriche mediante la formazione di un anello. 3 Si ritiene che le interazioni topologiche tra le catene cicliche siano il fattore critico per tali comportamenti insoliti. 4,5 Pertanto, la caratterizzazione del movimento e del rilassamento dei polimeri ciclici in condizioni di entangled è stato un importante argomento di ricerca nella scienza dei polimeri per decenni. 6

La dinamica ciclica dei polimeri è stata studiata utilizzando sia molecole sintetiche che naturali per mezzo di metodi sperimentali mediati d'insieme come la risonanza magnetica nucleare (NMR), la diffusione della luce e le misure di viscosità. 7-9 Tuttavia, questi studi spesso soffrono di molecole di impurità nei campioni. 10 Inoltre, in questi studi, le eterogeneità spazio-temporali del movimento delle singole molecole causate dall'intrinseca eterogeneità strutturale dei polimeri entangled, sono spesso nascoste dietro la media d'insieme. Al fine di caratterizzare la dinamica a livello molecolare dei polimeri ciclici, è necessario sviluppare un metodo di sintesi che fornisca polimeri ciclici ad alta purezza e un metodo sperimentale e di analisi che consenta la caratterizzazione quantitativa del moto molecolare a livello di singola molecola. Qui, mostreremo un metodo per sintetizzare policiclici e diciciclici ad alta purezza (THF) che incorporano un'unità fluoroforica utilizzando un processo di autoassemblaggio elettrostatico e fissazione covalente (ESA-CF)11-13 e un metodo per analizzare il movimento delle singole catene polimeriche incorporate in fluoroforo utilizzando una combinazione di analisi dello spostamento quadratico medio (MSD) e della funzione di distribuzione cumulativa (CDF).

È stato dimostrato che una corretta elaborazione dei dati è essenziale per la caratterizzazione accurata del moto diffusivo. Con un'adeguata analisi MSD e CDF, è stata rivelata una diffusione multimodale dei polimeri ciclici e diciclici nella soluzione fusa e semi-diluita delle catene polimeriche lineari,14-16 suggerendo gli effetti significativi degli stati topologici dei polimeri sul moto diffusivo delle catene in condizioni di entangled. 17 Mentre gli approcci sperimentali e analitici per caratterizzare il moto dei polimeri ciclici sono descritti in questo protocollo, lo stesso metodo può essere utilizzato per caratterizzare quantitativamente il moto diffusivo in molti altri sistemi eterogenei. L'approccio sarebbe particolarmente adatto quando si devono analizzare più componenti di diffusione esistenti nei campioni.

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Protocollo

1. Sintesi di monofunzionale e bifunzionale Poly (THF)

  1. Poly monofunzionali (THF)
    1. Fiamma asciugare un pallone a 2-collo da 100 ml. Aspirare e riempire il pallone con azoto (3 cicli).
    2. Aggiungere tetraidrofurano distillato (THF) (50 ml) al pallone. Mettere il pallone in un bagno di acqua a 20 ° C ed equilibrare la temperatura.
    3. Aggiungere triflato metile (0,5 mmol) al pallone da una siringa. Mescolare la miscela per 5-10 minuti a 20 ° C.
    4. Aggiungere N fenil pirrolidina (4-6 equiv.) Al pallone da una siringa. Lavorare l'impasto per 30-60 min.
    5. Rimuovere completamente il solvente a pressione ridotta (circa 100 Torr). Sciogliere il residuo in 3-5 ml di acetone. Aggiungere la soluzione di acetone in 300-500 ml di n esano. Filtrare il precipitato e asciugare sotto pressione ridotta.
  2. Poli bifunzionale (THF)
    1. Fiamma asciugare un pallone a 2-collo da 100 ml. Vacuum e riempire il pallone con azoto (3 cicli).
    2. Aggiungere THF distillata (50 ml) al pallone. Mettere il pallone in un bagno di acqua a 20 ° C ed equilibrare la temperatura.
    3. Aggiungere anidride triflica (0,3 mmol) al pallone da una siringa. Mescolare la miscela per 5-10 minuti a 20 ° C.
    4. Aggiungere N fenil pirrolidina (4-6 equiv.) Al pallone da una siringa. Lavorare l'impasto per 30-60 min.
    5. Rimuovere completamente il solvente a pressione ridotta (circa 100 Torr). Sciogliere il residuo in 3-5 ml di acetone. Aggiungere la soluzione di acetone a 300-500 ml di n esano. Filtrare il precipitato e asciugare sotto pressione ridotta.

a forma di 8 2. Sintesi di Perilene diimide-incorporato 4 armata Star e Dicyclic Poli (THF)

  1. Armato poli stella (THF)
    1. Scambio ionico
      1. Sciogliere perilene diimide tetracarbossilato sale di sodio in acqua (10 mg / ml, 150 ml). Scioglierepoly monofunzionale (THF) in acetone (160 mg / ml, 4 ml). Aggiungere goccia a goccia una soluzione di acetone nella soluzione acquosa agitata vigorosamente. Raccogliere il precipitato formatosi mediante filtrazione.
      2. Ripetere la procedura di cui sopra con il precipitato recuperato (2.1.1.1) quattro volte.
    2. fissazione covalente
      1. Sciogliere il precipitato ottenuto in toluene (5 mg / ml). Riflusso soluzione per 4 ore.
      2. Rimuovere completamente il solvente a pressione ridotta (circa 100 Torr). Filtrare il residuo attraverso un tampone di gel di silice con n esano / acetone (2/1 vol / vol). Aggiungere la soluzione in acqua raffreddata con ghiaccio (300-500 ml) per precipitare il prodotto. Raccogliere il precipitato per filtrazione.
  2. Poly forma di 8 Dicyclic (THF)
    1. Scambio ionico
      1. Sciogliere perilene diimide tetracarbossilato sale di sodio in acqua (6 mg / ml, 50 ml). Sciogliere poli bifunzionale (THF) (0,5 g) In 30-50 ml di acetone. Aggiungere goccia a goccia una soluzione di acetone nella soluzione acquosa vigorosamente agitata a 0 ° C. Raccogliere il precipitato formatosi mediante filtrazione.
      2. Ripetere la procedura di cui sopra con il precipitato recuperato (2.2.1.1).
    2. fissazione covalente
      1. Sciogliere il precipitato ottenuto in toluene (0,05 g / L). Riflusso soluzione per 4 ore.
      2. Rimuovere completamente il solvente a pressione ridotta (circa 100 Torr). Aggiungere toluene per sciogliere parzialmente il residuo. Re-precipitare in 300-500 ml di n esano.
      3. Filtrare il precipitato formato attraverso un tappo di gel di silice con n esano / acetone (2/1 vol / vol). Re-precipitare in 300-500 ml di acqua.
      4. Purificare il precipitato formato mediante cromatografia in colonna 18 utilizzando un gel di polistirene. Ulteriori purificare il prodotto grezzo da preparativa cromatografia a permeazione (GPC) 19 con un eluente di CHCl 3 a remsottoprodotti ove monitorando indice di rifrazione (RI) e rivelatori di raggi UV.

3. singola molecola di imaging di fluorescenza Experiment

  1. preparazione del campione
    1. Pulizia del microscopio copertura scivola
      1. Posizionare la copertura mm microscopio No. 1.5 24 x 24 scivola in una vaschetta di colorazione.
      2. Aggiungere la soluzione idruro 1 M di potassio (100 ml) nel vaso e ultrasuoni per 15 min. Eliminare la soluzione di idrossido di potassio per decantazione e risciacquare le scivola coprire con acqua ultra-pura per diverse volte. Aggiungere spettroscopica etanolo (100 ml) nel vaso e ultrasuoni per 15 min.
      3. Eliminare l'etanolo per decantazione e risciacquare le scivola coprire con acqua ultra-pura per diverse volte. Dopo aver versato l'acqua ultra-pura per decantazione, ripetere il passo 3.1.1.2.
      4. Aggiungere l'acqua ultra-pura al barattolo e ultrasuoni per 15 minuti. Sciacquare i vetrini con acqua ultra-pura per diverse volte. Estrarre i vetrini dal vaso da una pinzetta di plastica e asciugarle con o aria secca o azoto secco.
    2. Preparazione dei campioni polimero fuso 14,15
      1. Aggiungere 100 ml di poli lineari non marcato (THF) in una bottiglia di vetro e riscaldarlo ad una temperatura superiore al punto di fusione (circa 25 ° C) usando un asciugacapelli.
      2. Sciogliere il polimero fluoroforo-incorporato (lineare, stella 4 bracci, ciclico, o dicyclic a forma di 8 sintetizzato in 2.1 e 2.2) in cloroformio (1 ml, 10 -6 M). Aggiungere 1 ml di soluzione per 100 ml di fusione del poli lineari non-marcato (THF).
      3. Dopo aver accuratamente la miscelazione del campione con un puntale, evapora il cloroformio riscaldando il campione utilizzando un essiccatore.
        NOTA: Questo fornisce una colata del poli non marcato lineare (THF) contenente 10 -8 M dei polimeri fluoroforo incorporato.
      4. Prendere 10 microlitri del campione usando un micro-pipetta e dRop su un vetrino pulito. Mettere un altro vetrino pulito sul campione e panino il campione tra le due coprioggetto.
      5. Premere il campione delicatamente con una pinzetta di plastica.
  2. Wide-field configurazione imaging di fluorescenza 15
    1. Introduzione di un laser di eccitazione (488 nm) nella porta posteriore del microscopio invertito
      1. Inserire un filtro passa-banda di eccitazione e polarizzatore nel percorso ottico.
      2. Espandere il fascio di circa 1 cm di diametro con un espansore del fascio.
      3. Inserire una lastra quarto d'onda nel percorso ottico. Impostare l'asse ottico del piatto dell'onda a 45 gradi rispetto a quello del polarizzatore. In alternativa, inserire un compensatore Berek e impostare il ritardo ottica di lambda / 4.
      4. Inserire un diaframma nel percorso del fascio di eccitazione per regolare la dimensione del fascio.
      5. Prima di introdurre il raggio laser nella porta posteriore del microsco ottica invertitape, inserire una lente di focalizzazione (lente piano-convessa, lunghezza focale ≈ 300 mm) in una posizione in cui viene collimato il raggio laser dalla lente obiettivo.
    2. Dopo che riflette il fascio laser utilizzando uno specchio dicroico montato su un cubo filtro, introdurre il raggio laser il campione attraverso un'alta apertura numerica (NA) lente obiettivo (per esempio, NA 1.3, ingrandimento 100X, immersione in olio).
    3. Attaccare un riscaldatore obiettivo di lente obiettivo e impostare la temperatura a 30 ° C.
    4. Montaggio del campione sul palco del microscopio invertito
      1. Goccia una goccia di olio per immersione sulla lente dell'obiettivo e montare il campione sullo stato microscopio.
      2. Assicurarsi che lo spessore del campione di circa 10 micron è ottenuta controllando la posizione assiale della superficie inferiore e superiore del campione.
      3. Regolare il fuoco del microscopio per pochi micrometri sopra la superficie inferiore del campione.
    5. Ottenere luce di eccitazione polarizzata circolarmente sotto la lente dell'obiettivo
      1. Inserire un polarizzatore il raggio laser collimato dalla lente dell'obiettivo.
      2. Registrare l'intensità del laser trasmesso attraverso il polarizzatore inserendo un misuratore di potenza dopo il polarizzatore. Registrare la potenza del laser trasmessa a diversi angoli di polarizzazione ruotando il polarizzatore.
      3. Se la potenza del laser trasmesso non è costante per tutti gli angoli di polarizzazione, ruotare leggermente la piastra a quarto d'onda o Berek compensatore inserito nel percorso del fascio di eccitazione.
      4. Ripetere il passaggio 3.2.5.2 e 3.2.5.3 fino a quando la potenza del laser trasmessa costante è ottenuto a tutti gli angoli di polarizzazione. Assicurarsi che la luce polarizzata circolarmente si ottiene il campione.
    6. Imposta la EM (moltiplicazione degli elettroni) -Charge Coupled Device (CCD) fotocamera
      1. Fissare la telecamera EM-CCD alla porta laterale del microscopio e collegarlo a tegli software di acquisizione immagini.
      2. Se necessario, sincronizzare l'esposizione fotocamera a un otturatore meccanico o un filtro acusto-ottico sintonizzabile inserito nel percorso del fascio di eccitazione inviando logica transistor-transistor (TTL) segnali generati dalla telecamera EM-CCD ai dispositivi. In alternativa, sincronizzare l'esposizione fotocamera all'uscita laser inviando i segnali TTL generati dalla telecamera EM-CCD al laser.
        NOTA: L'ultima opzione è applicabile solo quando un laser a stato solido la cui potenza di uscita può essere modulata dalla logica transistore-transistore di ingresso (TTL) segnali viene utilizzata per l'esperimento.
      3. Applicare un guadagno EM (tipicamente di circa 300) alla camera CCD utilizzando software di controllo della telecamera in modo da ottenere un'immagine di fluorescenza di alta qualità del singolo fluoroforo.
      4. Impostare una regione di interesse (ROI) (tipicamente 128 x 128 pixel al centro del campo visivo) utilizzando software di controllo della telecamera.
        NOTA: Questo permette la Imagiesperimenti ng ai frame rate da 100 - 200 Hz in modalità di trasferimento telaio, che è richiesto per visualizzare il movimento delle catene polimeriche fluoroforo incorporato nel campione melt.
  3. Esecuzione dell'esperimento
    1. Ottimizzando le condizioni sperimentali
      1. Regolare la zona di illuminazione del campione a circa 20 micron di diametro utilizzando il diaframma inserito nel percorso ottico di eccitazione.
      2. Impostare la potenza del laser di eccitazione al campione 4 - 8 mW selezionando manualmente un filtro appropriato densità neutra (ND) inserito nel percorso del fascio di eccitazione.
        NOTA: Questo fornisce la potenza del laser medio di 1 - 2 kW cm -2 al campione.
      3. Per registrare immagini di fluorescenza del campione ai frame rate di 100-200 Hz. Se l'intensità di fluorescenza ottenute dai singoli polimeri fluoroforo incorporata è troppo bassa, aumentare gradualmente la potenza di eccitazione utilizzando the ND filtro fino a raggiungere circa 100 mW a campione.
      4. Se la qualità dell'immagine di fluorescenza singola molecola non è ancora soddisfacente, controllare le impurità fluorescenza del campione registrando immagini di fluorescenza di una fusione pura del poli non marcato (THF). Nel caso in cui si osserva uno sfondo di fluorescenza, utilizzare diversi poli non etichettati (THF).
      5. Se la densità dello spot di fluorescenza ottenute dai polimeri fluoroforo incorporato nella massa fusa è troppo alta per loro (ciò causa errori nell'analisi del moto diffusivo) isolare spazialmente, diminuire la concentrazione dei polimeri fluoroforo incorporato nel campione finché spazialmente sono osservate macchie isolate.
      6. Se la densità dello spot di fluorescenza ottenute dai polimeri fluoroforo incorporato nella massa fusa è troppo bassa (ciò provoca una bassa produttività dell'esperimento di imaging), aumentare la concentrazione dei polimeri fluoroforo incorporato nel campione finché un approprsi raggiunge la densità iate dello spot di fluorescenza.
      7. Se le immagini di fluorescenza ottenuti dai polimeri fluoroforo incorporato nella massa fusa sono sfocate, aumentare il frame rate di acquisizione delle immagini.
        NOTA: Questo richiede spesso un ROI più piccolo, di solito 64 x 64 pixel.
  4. Acquisizione dell'immagine
    1. Una volta che le condizioni sperimentali sono ottimizzate, lasciare il campione montato sul palco microscopio per un'ora in modo che il campione raggiunge condizioni di equilibrio.
    2. Registrate 500 - 1.000 sequenze di immagini di fluorescenza dei polimeri fluoroforo incorporato allo stato fuso in un 100-200 Hz cornice rate. Se il formato file predefinito non è TIFF, convertire tutte le sequenze di immagini in formato TIFF.

4. Analisi del movimento diffusivo

  1. Spostamento quadratico medio (MSD) Analisi
    1. Raccolto le sequenze di immagini di fluorescenza in modoche ogni sequenza di immagini contiene un polimero diffonde utilizzando il software di elaborazione singola e ben focalizzato fluoroforo-incorporato immagine, come ad esempio ImageJ.
    2. Quando le sequenze di immagini ritagliate contengono più di 10 fotogrammi, dividere le sequenze di immagini in più sequenze in modo tale che ogni sequenza è composta da 10 fotogrammi.
    3. Determinare le posizioni delle molecole in ogni sequenze di immagini accuratamente da bidimensionale montaggio gaussiana delle immagini.
    4. Determinare il coefficiente di diffusione (D) di singole molecole mediante spostamento (MSD) analisi quadratico medio delle traiettorie di diffusione (cioè posizioni dipendenti dal tempo della molecola) utilizzando un'equazione 20
      figure-protocol-1
      dove x i ey i sono le posizioni della molecola nella trama dell'immagine i, e n denota il numero di frame con il lasso di tempo Dt dal telaio i.
    5. Tracciare i coefficienti di diffusione inun istogramma di frequenza.
      NOTA: Tipicamente, l'istogramma è costruito da più di 100 molecole.
  2. Funzione di distribuzione cumulativa (CDF) Analisi
    NOTA: A CDF, P (r 2, i Δ t) corrisponde alla probabilità cumulativa di trovare le molecole che diffondono entro un raggio r dall'origine dopo un certo lasso di tempo i Δ t.
    1. Calcolare il quadrato-spostamento che si verificano durante il tempo di ritardo di 1Δt, 2Δt, ····, iΔt per tutte le traiettorie di diffusione ottenuti in 4.1.3.
      NOTA: Questi calcoli danno m totale i squadrata spostamenti per il tempo in ritardo di iΔt.
    2. Calcolare il numero dei-spostamenti quadrati (L i) all'interno di set di dati m i totali che sono più piccoli r 2 a differenti valori di R 2 (0 i vs R 2 trame corrispondono alla CDF, P (R 2, iΔt).
  3. L'analisi di CDF con modelli di diffusione distinti
    Nota: I CDF ottenuti sono montati dai modelli di diffusione distinti; modello omogeneo diffusione, molteplici modalità di diffusione nel quale la distribuzione D è descritta da un (unico modello gaussiano) gaussiana, e molteplici modalità di diffusione in cui la distribuzione D è descritta da più gaussiana (multipla modello gaussiana).
    1. Nel modello di diffusione omogenea, determinare una media D inserendo la CDF utilizzando un'equazione 21
      figure-protocol-2
      NOTA: Qualsiasi deviazione dalla equazione suggerisce la diffusione eterogenea della molecola.
    2. Nel modello Gaussiano singolo, determinare la distribuzione di probabilità di D descritta da una gaussiana (f (D)) inserendo la CDF utilizzando 15
      on3 "src =" / files / ftp_upload / 54503 / 54503equation3.jpg "/>
      figure-protocol-3
      dove A, w, e D 0 sono l'ampiezza, la larghezza e il centro della gaussiana.
    3. Nel modello doppia gaussiana, determinare la distribuzione di probabilità di j esima componente D descritta da una gaussiana (f (D)) inserendo la CDF utilizzando 14
      figure-protocol-4
      figure-protocol-5
      dove A j è la frazione di ciascun componente di diffusione, e α j, w j, e D 0 j sono l'ampiezza, la larghezza e il centro della j esima componente della gaussiana.
  4. Calcolo del distri probabilità teoricabuto di coefficiente di diffusione
    NOTA: Le distribuzioni di probabilità di D che si verificano a causa degli errori statistici (p (D) d D) sono calcolati per i diversi modelli di diffusione; modello omogeneo diffusione, molteplici modalità di diffusione nel quale la distribuzione D è descritta da un (unico modello gaussiano) gaussiana, e molteplici modalità di diffusione in cui la distribuzione D è descritta da più gaussiana (multipla modello gaussiana).
    1. Nel modello di diffusione omogenea, calcolare la distribuzione di probabilità statistica di D utilizzando un'equazione 22
      figure-protocol-6
      dove N è il numero di punti di dati in una traiettoria di diffusione (N = 10, vedere 4.1.2), D 0 è il coefficiente medio di diffusione (determinato mediante analisi CDF, vedere 4.2.3.1), e D è il sperimentalmente ottenuto coefficiente di diffusione per una traiettoria individuale.
    2. Nelsingolo modello di diffusione gaussiana, calcolare la distribuzione di probabilità statistica di D utilizzando un'equazione 15
      figure-protocol-7
      dove f (D) indica distribuzione di probabilità di D determinata dall'analisi CDF (vedi 4.2.3.2), e D 0 è il coefficiente medio di diffusione (determinato mediante analisi CDF, vedere 4.2.3.2).
    3. Nel modello di diffusione gaussiana doppio, calcolare la distribuzione di probabilità statistica di D utilizzando un'equazione 14
      figure-protocol-8
      dove f (D j) indica distribuzione di probabilità del j esima componente D (D j) determinato dall'analisi CDF (vedi 4.2.3.3), e D 0j è il coefficiente medio di diffusione del j esima componente (determinata dal CDF analisi, vedi 4.2.3.3).

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Risultati

Il perylene diimide-incorporato stella 4 armata e forma-8 poli dicyclic (THF) s sono stati sintetizzati utilizzando il elettrostatica auto-assemblaggio e covalente fissaggio (ESA-CF) di processo (Figura 1, Figura 2). Immagini di fluorescenza singola molecola time-lapse sono stati misurati per il 4-armata (Figura 3a) e 8 a forma di polimeri (figura 3b). Le immagini time-lapse di fluorescenza (Figura 3) mo...

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Discussione

I polimeri 4-armati e sagomati-8 sono state preparate tramite il protocollo ESA-CF (figura 1), che è un passaggio fondamentale per la sintesi. 12,24 monofunzionale e bifunzionale poli lineare (THF) s con N terminali -phenylpiperidinium erano sintetizzato secondo la procedura precedente. 11 lo scambio ionico è stata effettuata da riprecipitazione di una soluzione in acetone di un precursore polimero con counteranions triflato in una soluzione acquosa contenente un eccesso d...

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato supportato da una sovvenzione per la ricerca scientifica n. 22750122 (S.H.), n. 26288099 (T.Y.) e n. 23350050 (Y.T.) della Japan Society for the Promotion of Science. S.H. è grato per la Kurata Memorial Hitachi Science and Technology Foundation. La ricerca riportata in questa pubblicazione è stata supportata dalla King Abdullah University of Science and Technology (S.H.).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Materiali
THFGodo
Wakosil C-300Wako Pure Chemical Industries
AcetoneGodo
TolueneGodo
n-HexaneGodo
CHCl3Kanto Chemical
Bio-Beads S-X1Bio-Rad
Methyl triflateNacalai Tesque
Triflic anidrideNacalai Tesque
Potassium HydroxideWako Pure Chemical Industries
EtanoloWako Pure Chemical Industries
Poly( tetraidrofurano)Aldrich
CloroformioWako Pure Chemical Industries
Olio da immersioneCargilleTipo 37 / Tipo A
Attrezzatura
2-Collo 100-ml pallone
Bicchiere
Imbuto
Carta da filtroWhatman
Condensatore
Siringa
Bagno
Agitatore
Evaporatore
Microscopio vetrini di copertura (24 x 24 mm, n. 1)Matsunami GlassCO22241
Vaso di colorazioneAS ONE Corporation1-7934-01
Pulitore ad ultrasuoniVWR International 142-0047
Microscopio invertitoOlympusIX71
Laser ionico Ar-KrCompensatore coerenteInnova 70C
BerekNewport5540
Filtro di eccitazioneSemrockLL01-488-12.5
Specchio dicloricoOmega ottico500DRLP
Filtro di emissioneSemrockBLP01-488R-25
Lente e specchioFotocamera Thorlabs
EM-CCDTecnologia AndoriXon
Obiettivo (100X, N.A. = 1.3)OlympusUPLFLN 100XOP
Riscaldatore obiettivoBioptechs
Preparativo GPCGiappone Industria analiticaLC-908
a fondo tondo per fiasco a riflussod'acquamagneticorotante

Riferimenti

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