È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

Articolo metodologico

Un ripetitivo Concussive trauma cranico Modello nei topi

11.6K visualizzazioni

⸱

DOI:

10.3791/54530

⸱

12 ottobre 2016

In questo articolo

Sommario

La commozione cerebrale rappresenta il tipo più comune di lesione cerebrale traumatica. Pertanto, un modello animale di commozione cerebrale ripetitiva, che replica le caratteristiche importanti di una lesione nei pazienti, può fornire un mezzo per studiare la commozione cerebrale in modo rigoroso, controllato ed efficiente.

Abstract

Nonostante la commozione cerebrale/lesione cerebrale traumatica lieve (mTBI) sia l'evento più frequente di lesione cerebrale traumatica, c'è ancora una mancanza di conoscenza sulla lesione e sui suoi effetti. Per sviluppare una migliore comprensione delle commozioni cerebrali, gli animali vengono spesso utilizzati perché forniscono un modello controllato, rigoroso ed efficiente. Gli studi hanno adattato i modelli animali tradizionali per eseguire l'mTBI per stimolare la gravità della lesione lieve modificando i parametri della lesione. Questi modelli sono stati utilizzati perché possono produrre lesioni cerebrali morfologicamente simili alla condizione clinica e fornire uno spettro di gravità delle lesioni. Tuttavia, sono limitati nella loro capacità di presentare le caratteristiche identiche delle lesioni nei pazienti. Utilizzando un sistema di impatto tradizionale, un modello di lesione concussiva ripetitiva (rCHI) può indurre una commozione cerebrale simile a quella umana da lieve a moderata. Il grado di lesione può essere determinato misurando il periodo di perdita di coscienza (LOC) con un segno di un'interruzione transitoria della respirazione. Il modello rCHI è vantaggioso da utilizzare per la sua accuratezza e semplicità nel determinare gli effetti mTBI e i potenziali trattamenti.

Introduzione

Commozione cerebrale, chiamata anche lievi lesioni cerebrali traumatiche (mTBI), è la presenza più frequente di lesione cerebrale traumatica (TBI) e colpisce milioni di persone in Stati Uniti. Commozioni può essere difficile da diagnosticare e non esiste una cura specifica per commozione cerebrale. Vi è un crescente riconoscimento e alcune prove che lievi traumi meccanici derivanti da infortuni sportivi, combattimento militare, e altre attività fisicamente coinvolgenti può avere conseguenze cumulativi e croniche neurologiche 1,2. Tuttavia, vi è ancora una mancanza di conoscenza per quanto riguarda traumi e dei loro effetti. metodologia attuale limita gli s....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Protocollo

Tutte le procedure sono state eseguite secondo protocolli # 201.207.692 approvato dal comitato di Cura e uso istituzionale degli animali della University of Florida e secondo il National Institutes of Health Guide per la Cura e l'Utilizzo di animali da laboratorio.

1. Animal Care

  1. Utilizzare 3-4 mesi di età maschi 6J / C57BL. Fornire biancheria, materiale di nidificazione, cibo e acqua ad libitum. Mantenere i topi in temperatura ambiente controllata a 20 - 22 ° C con la luce / 12-hr cicli scuri 12 hr costanti.

2. Pre-compressione Preparazione

  1. Collegare un silicone gommat....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

In questo modello (Figura 1 AC), ci sono stati brevi periodi di boccheggiare e respirazioni profonde. Una perdita di coscienza (inconscia) è definita come una diminuzione del tasso di respirazione o la cessazione della respirazione transitoria prima di riprendere una normale respirazione. Un impatto sul centro della testa ha causato perdita di coscienza di breve durata (7.5 ± 4.7, 7.8 ± 5.5, 10.2 ± 8.8, 9.5 ± 8.0 sec a ogni impatto separatamente, Figura 1D).

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Discussione

Per simulare le lesioni cerebrali morfologicamente simili alle condizioni cliniche, sono attesi i sintomi post-commozione cerebrale. sintomi post-commozione cerebrale generalmente includono mal di testa, capogiri, vertigini, stanchezza, problemi di memoria e di sonno, difficoltà di concentrazione così come ansia e umore depresso. Dal momento che i sintomi somatici non possono ancora essere misurabile in modelli animali, i cambiamenti del motore e la funzione cognitiva e il comportamento emotivo sono utilizzati come crit.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Dichiarazioni

Gli autori non hanno alcun interesse finanziario da rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato supportato da un finanziamento di una sovvenzione della Florida Health (Fondo per la ricerca sulle lesioni cerebrali e del midollo spinale) (KKW).

....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
macchina per anestesiaEagle Eye Anesthesia, IncModello 150 anestesia
Impattatore elettromagneticoLeicaBiosystemsImpact One Impattatore stereotassicoa urto
Strumento stereotassico digitaleLeicaBiosystems39462501montare il mouse e le punte di posizionamento
Punta in metallo rivestita in gomma SiciloneStrumento di precisione e Ingegneria, Gainesvill FLpunta d'urtosu misura
Trimmer all-in-one agli ioni di litioWAHL Home Prodotti9854-600rasatura dei capelli del mouse
clip di cartapunta della sondasu misura
Applicatori con punta in cotoneMEDLINEMDS202055testina di lavaggio con soluzione salina
Tissue Tek O.C.T.ASKURA FINETEK USA INC4583
anticorpo anti-GFAPDakoCA93013IHC
anti ferritinaAnticorpo SigmaF6136per IHC
VECTASTAIN Elite ABC  kitVector laboratoriesPK-6100Sistema di rilevamento IHC
Permount Mounting MediumFisher ScientificSP15-100
Aperio XT ScanScope scannerLeica Microsystems Inc,scansione di vetrini
Leica AutoStainer XLLeica la patologia AziendaST2010H& E colorazione
DAB Sistema di rilevamento IHCsigmaD3939
per

Riferimenti

  1. Baugh, C. M., et al. Chronic traumatic encephalopathy: neurodegeneration following repetitive concussive and subconcussive brain trauma. Brain Imaging Behav. 6 (2), 244-254 (2012).
  2. McKee, A. C., et al.

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Ristampe e permessi

Tag

Modello murinoSistema di impatto elettromagneticoModellizzazione del trauma cranicoMisurazione della perdita di coscienzaAnalisi dell'attivazione degli astrocitiCellule immuno-positive alla ferritinaPosizionamento nel telaio stereotassicoCalibrazione della profondità di impattoProtocollo di lesione ripetitiva