procedure di taglio del cervello organizzati sono necessarie per correlare fenomeni neuropsichiatrici specifici con diagnosi neuropathologic definitive. talee cervello vengono eseguiti in modo diverso in base a varie contingenze clinico-accademico. Questo protocollo descrive una procedura simmetrica bihemispheric taglio del cervello per indagare le differenze emisferiche nelle patologie del cervello umano e per massimizzare le tecniche biomolecolari / neuroimaging attuali e future.
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Articolo metodologico
Simmetrica Bihemispheric Postmortem cervello taglio per studiare sano e patologico del cervello Condizioni di esseri umani
In questo articolo
Sommario
Abstract
Neuropatologi, a volte, si sentono intimiditi dalla quantità di conoscenze necessarie per generare diagnosi definitive per fenomeni neuropsichiatrici complessi descritti in quei pazienti per i quali è stato richiesto un autopsia del cervello. Anche se i progressi delle scienze biomediche e di neuroimaging hanno rivoluzionato il campo neuropsichiatrico, ma hanno anche generato l'idea fuorviante che le autopsie del cervello hanno solo un valore di conferma. Questa falsa idea creata una drastica riduzione dei tassi autopsia e, conseguentemente, una ridotta possibilità di eseguire indagini neuropatologiche più dettagliati ed estesi, che sono necessari per comprendere numerosi aspetti normali e patologici ancora sconosciute del cervello umano. Il metodo tradizionale inferenziale di correlazione tra i fenomeni osservati neuropsichiatrici e corrispondente localizzazione / caratterizzazione dei loro possibili correlati neuroistologici continua ad avere un valore innegabile. Nel contesto di neuropsychimalattie atric, il metodo clinico-tradizionale è ancora la migliore metodologia possibile (e spesso l'unica disponibile) per collegare le caratteristiche neuropsichiatriche uniche per i loro corrispondenti substrati neuropatologici, dato che si basa in particolare sulla valutazione fisica diretta dei tessuti cerebrali. La valutazione del cervello post-mortem si basa su procedure che variano tra i diversi centri di neuropatologia taglio del cervello. talee cerebrali vengono eseguite in modo relativamente ampia e sistematica basata sulle varie contingenze cliniche e accademiche presenti in ogni istituzione. Una metodologia di taglio cervello bi-emisferico più anatomicamente inclusiva e simmetrica dovrebbe almeno essere utilizzato per scopi di ricerca in neuropatologia umana per indagare in modo coerente, in profondità, condizioni normali e patologiche, con le peculiarità del cervello umano (cioè, specializzazione emisferica e lateralizzazione per specifiche funzioni). Tale metodo fornirebbe un colle più completoction di cervelli neuropatologicamente ben caratterizzati disponibili per tecniche biotecnologiche e di neuroimaging attuali e future. Descriviamo una procedura simmetrica bi-emisferica taglio del cervello per la ricerca delle differenze emisferiche nelle patologie del cervello umano e per l'uso con la corrente così come le future tecniche biomolecolari / neuroimaging.
Introduzione
Neuropatologi hanno il privilegio scientifica, l'onore intellettuale, e l'obbligo di diagnostica per valutare il cervello umano. Per molti decenni, descrizioni cliniche dettagliate delle malattie del cervello e grandi sforzi per individuare le possibili correlati neuroistologici nel cervello post-mortem umani sono stati intrapresi. Storicamente, questi sforzi hanno rappresentato la modalità più produttivo con cui le scienze mediche, e la neurologia in particolare, avanzato in epoca moderna. Grazie alle precedenti neuropatologi eminenti e la loro dedizione, determinazione, borse di studio, e la capacità sorprendente di discriminare tra normale e anormale tessu....
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Protocollo
Le procedure che coinvolgono tessuti umani postmortem sono stati esaminati dal comitato di revisione istituzionale e esentato ai sensi 45 CFR (Code of Federal Regulations).
NOTA: Il protocollo descrive una procedura di taglio del cervello bihemispheric simmetrica per la valutazione del cervello post-mortem finalizzato per gli studi neuropatologici negli esseri umani. saranno esclusi descrizioni dettagliate degli apparati, strumenti, materiali e rifornimenti necessari per eseguire il taglio cervello umano. Materiali e forniture per dissezioni del cervello vengono scelti a discrezione del singolo ricercatore e si basano su strumenti autopsia consentiti o approvati ad ogni istituto ....
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Risultati
protocollo Lunghezza
Il tempo trascorso per una procedura unica di taglio simmetrico bihemispheric fisso cervello è stimato a 1 h (escluso il tempo trascorso l'istituzione del tavolo di dissezione, strumenti, e il taglio delle superfici, l'etichettatura,., Ecc). Il tempo necessario per un unico alternato bi-emisferica simmetrica congelato e fissa cervello procedura di taglio è stimata a prendere 2 ore. Si può pre.......
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Discussione
Questo metodo cervello di taglio può essere adattata alle esigenze specifiche di ogni laboratorio neuropatologia (per esempio, riducendo il numero di regioni cerebrali valutare per ogni emisfero) pur mantenendo la procedura di taglio simmetrica bihemispheric come una delle sue caratteristiche principali. Questo protocollo proposto potrebbe essere utilizzato per le procedure di routine (centri neuropatologici orientate alla ricerca) o solo quando necessario (studi specifici clinicamente orientati). Può essere utilizzato .......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Ringraziamo le migliaia di donatori di cervello, pazienti, famiglie e neuroscienziati in tutto il mondo che, durante gli ultimi due secoli e attraverso i loro generosi doni e sforzi intellettuali, hanno contribuito a scoprire come funziona il cervello umano, a comprendere le devastanti malattie cerebrali e a sviluppare i relativi trattamenti. Ringraziamo in particolare la signora Cecilia V. Feltis per l'edizione e la revisione di questo manoscritto.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Copia del consenso informato firmato che consente l'autopsia e la donazione di cervello per uso di ricerca. | |||
| Anamnesi clinica dettagliata del soggetto che dovrebbe includere una descrizione dettagliata di eventuali sintomi e segni neurologici e psichiatrici. | |||
| Video-registrazioni mediche o non mediche quando disponibili (particolarmente utili nel campo dei disturbi del movimento). Parente prossimo è richiesto il consenso di S. | |||
| Neuroimaging, neurofisiologia, neuropsichiatria e valutazione o scale clinicometriche. | |||
| Dati genetici e genealogici. I rapporti genetici esaminano, se sono state diagnosticate malattie neurogenetiche. | |||
| Contenitore per istologia | MICROSCOPIA ELETTRONICA SCIENCES | 64233-24 | |
| Cassette per istologia | VWR | 18000-142 (arancione) | |
| Cassette per istologia | VWR | 18000-132 (navy) | |
| Manici di coltelli e lame monouso | MICROSCOPIA ELETTRONICA SCIENCES | 62560-04 | |
| Lame lunghe | MICROSCOPIA ELETTRONICA SCIENCES | 62561-20 | |
| Manico per coltello a lama usa e getta | MICROSCOPIA ELETTRONICA SCIENCES | 72040-08 | |
| Lame per bisturi | MICROSCOPIA ELETTRONICA SCIENCES | 72049-22 | |
| Accu-Punch 2 mm | MICROSCOPIA ELETTRONICA SCIENCES | 69038-02 | |
| Contenitori in polistirolo – Scheda di | ELECTRONIC MICROSCOPY SCIENCES | 64240-12 | |
| ELECTRONIC MICROSCOPY SCIENCES | 63307-30 | ||
| Soluzione di formalina, tampone neutro, 10% | Sigma-Aldrich | HT501128 SIGMA | |
| , Gill n. 2 | Sigma-Aldrich | GHS280 Soluzione SIGMA | |
| Eosin Y, acquosa | Sigma-Aldrich | HT1102128 SIGMA | |
| anti-beta-amiloide | Covance, Princeton, NJ | SIG-39220 | 1:500 |
| anti-tau | Thermo Fisher Scientific | MN1020 | 1:500 |
| anti-alfa-sinucleina | Abcam | ab27766 | 1:500 |
| anti-fosfo-TDP43 | Cosmo Bio Co. | TIP-PTD-P02 | 1:2000 |
| Macchina | |||
| Sigillatrice A Impulsi A Teste | Grainger | 5ZZ35 |
Riferimenti
- Braun, B., Stadlober-Degwerth, M., Hajak, G., Klunemann, H. H. 100th anniversary of Perusini's second case: patient RM and his kindred. Am. J. Alzheimers Dis. Other Demen. 25, 189-192 (2010).
- Jellinger, K. A. Neuropathology of sporadic ....
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Ristampe e permessi
